海帶褐藻多糖硫酸酯降尿酸作用機(jī)制的初步研究
發(fā)布時(shí)間:2021-05-11 00:30
高尿酸血癥是目前威脅人類生命健康的重大疾病之一,與多種疾病有著密切的聯(lián)系,是痛風(fēng)、高血壓、糖尿病、高血脂癥、冠心病等各種代謝性相關(guān)疾病的潛在危險(xiǎn)因素,還能損傷腎臟,引起一系列腎臟疾病。但目前的治療藥物多對(duì)機(jī)體具有副作用,所以探索既能降低尿酸而又對(duì)機(jī)體毒副作用較小的天然藥物則具有重要的意義。研究證實(shí)海帶褐藻多糖硫酸酯能夠調(diào)節(jié)高尿酸血癥患者的血肌酐和尿素氮水平,目前已作為一種治療高尿酸血癥所導(dǎo)致的腎臟相關(guān)疾病的藥物,但對(duì)于其降尿酸的作用的研究還比較少,本實(shí)驗(yàn)旨在探索海帶褐藻多糖硫酸酯降尿酸的作用效果,并研究其對(duì)體內(nèi)尿酸合成代謝與腎臟排泄的相關(guān)調(diào)控機(jī)理。另外,從性激素能夠影響尿酸代謝的角度探究海帶褐藻多糖硫酸酯對(duì)性腺軸的影響并進(jìn)一步調(diào)控尿酸含量的變化。為了研究海帶褐藻多糖硫酸酯的降尿酸的作用效果,本實(shí)驗(yàn)采用超聲波復(fù)合酶法提取、乙醇沉淀方法分離提取得到粗海帶褐藻多糖硫酸酯FL,硫酸根含量測(cè)定結(jié)果為11.01%,L-巖藻糖含量為19.04%,糖醛酸含量為4.27%,蛋白質(zhì)含量為1.23%,再經(jīng)柱層析分級(jí),得到兩個(gè)洗脫組分,HPGPC法測(cè)其重均分子量分別為5.6 kDa和0.9 kDa。將分離提取...
【文章來(lái)源】:廣東海洋大學(xué)廣東省
【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 海帶的研究現(xiàn)狀
1.1.1 海帶的化學(xué)成分與性質(zhì)
1.1.2 海帶多糖的生理功能和藥理作用
1.2 海帶褐藻多糖硫酸酯的研究概況
1.2.1 海帶褐藻多糖硫酸酯的組成及結(jié)構(gòu)研究
1.2.2 海帶褐藻多糖硫酸酯的生物活性和功能研究
1.3 高尿酸血癥的研究現(xiàn)狀
1.3.1 高尿酸血癥的發(fā)病機(jī)制
1.3.2 高尿酸血癥的治療方法
1.4 研究目的與技術(shù)路線
1.4.1 研究目的
1.4.2 技術(shù)路線
1.4.3 研究?jī)?nèi)容
2 FL的制備及化學(xué)組成分析
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 原料
2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 超聲波復(fù)合酶法制備FL
2.2.2 化學(xué)組成測(cè)定
2.2.3 海帶褐藻多糖硫酸酯的分級(jí)
2.2.4 SephacrylTM S-300HR凝膠色譜柱層析
2.2.5 分子量測(cè)定及分布—高效凝膠過(guò)濾色譜法(HPGPC)
2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
2.3.1 化學(xué)組成測(cè)定結(jié)果
2.3.2 FL的纖維素陰離子交換柱層析洗脫結(jié)果
2.3.3 SephacrylTMS-300HR凝膠色譜層析洗脫結(jié)果
2.3.4 分子量測(cè)定結(jié)果
2.4 結(jié)論
3 FL對(duì)高尿酸血癥小鼠的拮抗作用及最佳劑量研究
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.1 材料
3.1.2 試劑
3.1.3 主要儀器設(shè)備
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組和處理
3.2.2 樣品制備
3.2.3 組織病理學(xué)檢測(cè)
3.2.4 小鼠臟器系數(shù)測(cè)定
3.2.5 血清尿酸含量的測(cè)定
3.2.6 肝臟功能指標(biāo)測(cè)定
3.2.7 腎臟功能指標(biāo)測(cè)定
3.2.8 數(shù)據(jù)分析
3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.3.1 病理學(xué)觀察結(jié)果
3.3.2 小鼠體重及臟器系數(shù)的變化情況
3.3.3 血清指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果
3.3.4 肝臟功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果
3.3.5 腎臟功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果
3.4 結(jié)論
4 FL降尿酸作用機(jī)制研究
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 動(dòng)物分組和處理
4.2.2 睪丸病理切片觀察
4.2.3 血清性激素與促激素水平變化
4.2.4 睪丸睪酮及抗氧化能力測(cè)定
4.2.5 肝臟尿酸代謝酶ADA和XOD活性的檢測(cè)
4.2.6 免疫熒檢測(cè)
4.2.7 Western blot檢測(cè)尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白的表達(dá)情況
4.2.8 腎臟NF-kB信號(hào)通路相關(guān)因子的變化
4.2.9 數(shù)據(jù)分析
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 睪丸病理切片觀察結(jié)果
4.3.2 血清性激素與促激素水平變化
4.3.3 睪丸睪酮及抗氧化能力測(cè)定
4.3.4 肝臟代謝酶ADA和XOD活性測(cè)定結(jié)果分析
4.3.5 激光共聚焦觀察腎臟轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白UAT、URAT1、OAT4的顆粒聚集情況
4.3.6 FL對(duì)腎臟尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體UAT、URAT和OAT4的影響
4.3.7 FL降尿酸過(guò)程中信號(hào)通路蛋白Nf-kB的變化情況
4.4 討論
5 總結(jié)與展望
5.1 總結(jié)
5.2 創(chuàng)新點(diǎn)
5.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
本文編號(hào):3180360
【文章來(lái)源】:廣東海洋大學(xué)廣東省
【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 海帶的研究現(xiàn)狀
1.1.1 海帶的化學(xué)成分與性質(zhì)
1.1.2 海帶多糖的生理功能和藥理作用
1.2 海帶褐藻多糖硫酸酯的研究概況
1.2.1 海帶褐藻多糖硫酸酯的組成及結(jié)構(gòu)研究
1.2.2 海帶褐藻多糖硫酸酯的生物活性和功能研究
1.3 高尿酸血癥的研究現(xiàn)狀
1.3.1 高尿酸血癥的發(fā)病機(jī)制
1.3.2 高尿酸血癥的治療方法
1.4 研究目的與技術(shù)路線
1.4.1 研究目的
1.4.2 技術(shù)路線
1.4.3 研究?jī)?nèi)容
2 FL的制備及化學(xué)組成分析
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 原料
2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 超聲波復(fù)合酶法制備FL
2.2.2 化學(xué)組成測(cè)定
2.2.3 海帶褐藻多糖硫酸酯的分級(jí)
2.2.4 SephacrylTM S-300HR凝膠色譜柱層析
2.2.5 分子量測(cè)定及分布—高效凝膠過(guò)濾色譜法(HPGPC)
2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
2.3.1 化學(xué)組成測(cè)定結(jié)果
2.3.2 FL的纖維素陰離子交換柱層析洗脫結(jié)果
2.3.3 SephacrylTMS-300HR凝膠色譜層析洗脫結(jié)果
2.3.4 分子量測(cè)定結(jié)果
2.4 結(jié)論
3 FL對(duì)高尿酸血癥小鼠的拮抗作用及最佳劑量研究
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.1 材料
3.1.2 試劑
3.1.3 主要儀器設(shè)備
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組和處理
3.2.2 樣品制備
3.2.3 組織病理學(xué)檢測(cè)
3.2.4 小鼠臟器系數(shù)測(cè)定
3.2.5 血清尿酸含量的測(cè)定
3.2.6 肝臟功能指標(biāo)測(cè)定
3.2.7 腎臟功能指標(biāo)測(cè)定
3.2.8 數(shù)據(jù)分析
3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.3.1 病理學(xué)觀察結(jié)果
3.3.2 小鼠體重及臟器系數(shù)的變化情況
3.3.3 血清指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果
3.3.4 肝臟功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果
3.3.5 腎臟功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果
3.4 結(jié)論
4 FL降尿酸作用機(jī)制研究
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 動(dòng)物分組和處理
4.2.2 睪丸病理切片觀察
4.2.3 血清性激素與促激素水平變化
4.2.4 睪丸睪酮及抗氧化能力測(cè)定
4.2.5 肝臟尿酸代謝酶ADA和XOD活性的檢測(cè)
4.2.6 免疫熒檢測(cè)
4.2.7 Western blot檢測(cè)尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白的表達(dá)情況
4.2.8 腎臟NF-kB信號(hào)通路相關(guān)因子的變化
4.2.9 數(shù)據(jù)分析
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 睪丸病理切片觀察結(jié)果
4.3.2 血清性激素與促激素水平變化
4.3.3 睪丸睪酮及抗氧化能力測(cè)定
4.3.4 肝臟代謝酶ADA和XOD活性測(cè)定結(jié)果分析
4.3.5 激光共聚焦觀察腎臟轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白UAT、URAT1、OAT4的顆粒聚集情況
4.3.6 FL對(duì)腎臟尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體UAT、URAT和OAT4的影響
4.3.7 FL降尿酸過(guò)程中信號(hào)通路蛋白Nf-kB的變化情況
4.4 討論
5 總結(jié)與展望
5.1 總結(jié)
5.2 創(chuàng)新點(diǎn)
5.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
本文編號(hào):3180360
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