目的:本文觀察補腎強督治僂方對強直性脊柱炎動物模型免疫炎癥的作用,以及對IL-23/Th17軸的影響。方法:選擇使用BALB/c小鼠于第0天、第20天、第40天尾部皮下注射牛軟骨來源蛋白聚糖構(gòu)建蛋白聚糖誘導小鼠關(guān)節(jié)炎模型（PGIA）,作為研究的強直性脊柱炎動物模型。在此基礎(chǔ)上設(shè)置對照組、模型組、補腎強督治僂方組和塞來昔布組,每組10只。空白組為正常BALB/c小鼠,其余各組經(jīng)過PGIA造模操作。在第61-90天,空白組、模型組小鼠給予生理鹽水灌胃,補腎強督治僂方組小鼠給予臨床等效劑量的補腎強督治僂方水提液灌胃,塞來昔布組小鼠給予臨床等效劑量的塞來昔布溶液灌胃,每天一次。實驗結(jié)束后處理小鼠,行各項實驗指標觀察。主要實驗指標包括:用國際動物關(guān)節(jié)炎評分量表進行小鼠后爪關(guān)節(jié)腫脹評分;小動物活體成像儀對小鼠脊椎關(guān)節(jié)、爪關(guān)節(jié)腫脹情況進行觀察;進行脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)（TI）測量;提取脾臟總淋巴細胞,CCK-8法測量細胞增殖影響,用流式細胞術(shù)分析Th17細胞比例;采集血清,酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法測量TNF-α、白介素IL-17、IL-23表達水平;提取腸壁組織總蛋白,并且ELISA法測量回腸... 

【文章來源】：廣州中醫(yī)藥大學廣東省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第一章 文獻研究
    1.1 強直性脊柱炎概述
    1.2 IL-23/Th17軸與AS關(guān)系的研究進展
        1.2.1 IL-23/Th17軸簡介
        1.2.2 IL-23/Th17軸在AS患者中的表達情況
        1.2.3 靶向IL-23/Th17軸的生物制劑
    1.3 AS動物模型研究進展
        1.3.1 AS常見動物模型分類
        1.3.2 IL-23/Th17軸在蛋白聚糖誘導小鼠關(guān)節(jié)炎模型中的表達情況
    1.4 中醫(yī)研究進展
        1.4.1 中醫(yī)古籍對AS的相關(guān)描述
        1.4.2 補腎強督治僂方臨床療效肯定,可以改善其影像學進展
    1.5 科學假說的提出
第二章 實驗研究
    2.1 動物與試劑耗材
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 實驗藥品與試劑耗材
    2.2 實驗方法
        2.2.1 構(gòu)建PGIA小鼠模型
        2.2.2 制備補腎強督治僂方的凍干粉及水提液
        2.2.3 藥物干預(yù)與給藥方法
        2.2.4 檢測指標
    2.3 統(tǒng)計學方法
    2.4 實驗結(jié)果
        2.4.1 補腎強督治僂方干預(yù)對PGIA小鼠關(guān)節(jié)腫脹評分的影響
        2.4.2 補腎強督治僂方對PGIA小鼠脾臟指數(shù)（Spleen Index,SI）、胸腺指數(shù)（ThymusIndex,TI）改變的影響
        2.4.3 觀察補腎強督治僂方水提液對PGIA小鼠脾臟總淋巴細胞體外增殖的影響
        2.4.4 流式細胞術(shù)補腎強督治僂方對PGIA小鼠脾臟Th17細胞的影響
        2.4.5 ELISA法檢測補腎強督治僂方對PGIA小鼠血清TNF-α蛋白水平表達的影響
        2.4.6 ELISA法觀察補腎強督治僂方對PGIA模型小鼠血清中IL-17、IL-23蛋白水平的表達影響
        2.4.7 ELISA法觀察補腎強督治僂方對PGIA模型小鼠回腸組織中IL-17、IL-23蛋白水平的表達影響
        2.4.8 蘇木素-伊紅染色（HE）觀察補腎強督治僂方對PGIA模型小鼠的組織病理學影響
        2.4.9 番紅-固綠0染色觀察補腎強督治僂方對PGIA模型小鼠關(guān)節(jié)軟骨的影響
        2.4.10 免疫組化觀察補腎強督治僂方對PGIA小鼠IL-23、IL-17表達的影響
第三章 討論
總結(jié)與展望
參考文獻
附錄
在校期間發(fā)表論文情況
致謝
統(tǒng)計學審核證明


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]從JAK/STAT信號通路調(diào)控Th17分化探索補腎、清熱、活血法干預(yù)強直性脊柱炎炎癥分子機制[D]. 宋俊垚.北京中醫(yī)藥大學 2016
[2]強直性脊柱炎患者外周血Th1/Th17/Treg比率及其相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子和細胞因子表達水平的研究[D]. 許秀秀.福建醫(yī)科大學 2013
[3]補腎強督治僂湯對強直性脊柱炎患者骨質(zhì)變化機理的研究[D]. 余鋒.廣州中醫(yī)藥大學 2007



本文編號：3020709