目的:本文觀察補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方對強(qiáng)直性脊柱炎動物模型免疫炎癥的作用,以及對IL-23/Th17軸的影響。方法:選擇使用BALB/c小鼠于第0天、第20天、第40天尾部皮下注射牛軟骨來源蛋白聚糖構(gòu)建蛋白聚糖誘導(dǎo)小鼠關(guān)節(jié)炎模型（PGIA）,作為研究的強(qiáng)直性脊柱炎動物模型。在此基礎(chǔ)上設(shè)置對照組、模型組、補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方組和塞來昔布組,每組10只。空白組為正常BALB/c小鼠,其余各組經(jīng)過PGIA造模操作。在第61-90天,空白組、模型組小鼠給予生理鹽水灌胃,補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方組小鼠給予臨床等效劑量的補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方水提液灌胃,塞來昔布組小鼠給予臨床等效劑量的塞來昔布溶液灌胃,每天一次。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處理小鼠,行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)觀察。主要實(shí)驗(yàn)指標(biāo)包括:用國際動物關(guān)節(jié)炎評分量表進(jìn)行小鼠后爪關(guān)節(jié)腫脹評分;小動物活體成像儀對小鼠脊椎關(guān)節(jié)、爪關(guān)節(jié)腫脹情況進(jìn)行觀察;進(jìn)行脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)（TI）測量;提取脾臟總淋巴細(xì)胞,CCK-8法測量細(xì)胞增殖影響,用流式細(xì)胞術(shù)分析Th17細(xì)胞比例;采集血清,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法測量TNF-α、白介素IL-17、IL-23表達(dá)水平;提取腸壁組織總蛋白,并且ELISA法測量回腸... 

【文章來源】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第一章 文獻(xiàn)研究
    1.1 強(qiáng)直性脊柱炎概述
    1.2 IL-23/Th17軸與AS關(guān)系的研究進(jìn)展
        1.2.1 IL-23/Th17軸簡介
        1.2.2 IL-23/Th17軸在AS患者中的表達(dá)情況
        1.2.3 靶向IL-23/Th17軸的生物制劑
    1.3 AS動物模型研究進(jìn)展
        1.3.1 AS常見動物模型分類
        1.3.2 IL-23/Th17軸在蛋白聚糖誘導(dǎo)小鼠關(guān)節(jié)炎模型中的表達(dá)情況
    1.4 中醫(yī)研究進(jìn)展
        1.4.1 中醫(yī)古籍對AS的相關(guān)描述
        1.4.2 補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方臨床療效肯定,可以改善其影像學(xué)進(jìn)展
    1.5 科學(xué)假說的提出
第二章 實(shí)驗(yàn)研究
    2.1 動物與試劑耗材
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)藥品與試劑耗材
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 構(gòu)建PGIA小鼠模型
        2.2.2 制備補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方的凍干粉及水提液
        2.2.3 藥物干預(yù)與給藥方法
        2.2.4 檢測指標(biāo)
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方干預(yù)對PGIA小鼠關(guān)節(jié)腫脹評分的影響
        2.4.2 補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方對PGIA小鼠脾臟指數(shù)（Spleen Index,SI）、胸腺指數(shù)（ThymusIndex,TI）改變的影響
        2.4.3 觀察補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方水提液對PGIA小鼠脾臟總淋巴細(xì)胞體外增殖的影響
        2.4.4 流式細(xì)胞術(shù)補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方對PGIA小鼠脾臟Th17細(xì)胞的影響
        2.4.5 ELISA法檢測補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方對PGIA小鼠血清TNF-α蛋白水平表達(dá)的影響
        2.4.6 ELISA法觀察補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方對PGIA模型小鼠血清中IL-17、IL-23蛋白水平的表達(dá)影響
        2.4.7 ELISA法觀察補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方對PGIA模型小鼠回腸組織中IL-17、IL-23蛋白水平的表達(dá)影響
        2.4.8 蘇木素-伊紅染色（HE）觀察補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方對PGIA模型小鼠的組織病理學(xué)影響
        2.4.9 番紅-固綠0染色觀察補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方對PGIA模型小鼠關(guān)節(jié)軟骨的影響
        2.4.10 免疫組化觀察補(bǔ)腎強(qiáng)督治僂方對PGIA小鼠IL-23、IL-17表達(dá)的影響
第三章 討論
總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
附錄
在校期間發(fā)表論文情況
致謝
統(tǒng)計(jì)學(xué)審核證明


【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3020709