目的:從整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)兩個(gè)層面,探討中藥雙丹明目膠囊對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變（Diabetic retinopathy,DR）大鼠新生血管的抑制作用及對(duì)內(nèi)皮祖細(xì)胞（Endothelial progenitor cells,EPCs）的增殖抑制作用,并以VEGF/KDR環(huán)路為切入點(diǎn),闡述雙丹明目膠囊發(fā)揮作用的具體機(jī)制,為DR的發(fā)病機(jī)制研究及中醫(yī)藥防治提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1.取人臍帶血原代分離EPCs,采用其特異性抗原CD34進(jìn)行鑒定,傳代消化后分為8組:對(duì)照組、空白血清組、雙丹明目膠囊含藥血清組（共5組:11.2mg/ml、2.24 mg/ml、1.12 mg/ml、0.56 mg/ml、0.28 mg/ml）、導(dǎo)升明含藥血清組,藥物分別干預(yù)24 h和48 h后,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制率,摸索雙丹明目膠囊的最佳給藥濃度及干預(yù)時(shí)間;確定給藥濃度及干預(yù)時(shí)間后,將EPCs分為5組:空白血清組、雙丹明目膠囊含藥血清組、導(dǎo)升明含藥血清組、VEGF/KDRSU1498阻斷劑組、雙丹明目膠囊含藥血清+VEGF/KDRSU1498阻斷劑組,采用Elisa法檢測(cè)細(xì)胞上清液中VEGF含量,Weste... 

【文章來(lái)源】：湖南中醫(yī)藥大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：108 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

人臍血來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞原代培養(yǎng)形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果

17空白對(duì)照組 EPCs CD133 標(biāo)記占比：19.14%圖2. 人臍血 EPCs 的表面抗原流式細(xì)胞儀分析結(jié)果2.2 含藥血清成分的鑒定雙丹明目膠囊、大鼠空白血漿、大鼠含藥血漿進(jìn)樣量 2μL，Q-TOF-MS 正離子模式下總離子流（TIC）圖如下。采用 Agilent Masshunter QualitativeAnalysis 工作站中的分子特征提�。∕FE）功能，通過(guò)設(shè)定合適的閾值參數(shù)，對(duì)雙丹明目膠囊入血成分正離子模式下采集到的總離子流圖進(jìn)行提取，獲得化合物的準(zhǔn)離子分子峰（如[M+H]+，[M+Na]+）信息，根據(jù)供試品的色譜保留時(shí)間、質(zhì)譜準(zhǔn)分子離子峰(MS)和碎片離子(MS/MS)等信息，共檢測(cè)到 39 個(gè)質(zhì)譜峰（外加丹參酮類3 個(gè)代謝成分），如圖 3、圖 4、圖 5 所示

丹明目膠囊體外樣品并參考文獻(xiàn)報(bào)道的質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行推導(dǎo)確定。最終本實(shí)驗(yàn)從雙丹明目膠囊中共鑒定出 36 個(gè)入血的原型成分，詳見(jiàn)表 8。圖3. 雙丹明目膠囊樣品 UPLC/MS/MS 總離子流圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3002907