目的:通過水蛭素（Hirudin）對轉(zhuǎn)化生長因子-β1（Transforming growth fac tor-β1,TGF-β1）刺激的人胚肺成纖維細(xì)胞MRC-5 TGF-β1/Smads信號通路的研究,探討其對TGF-β1活化肺成纖維細(xì)胞（Lung fibroblast,LFB）機(jī)制的影響,以期為中醫(yī)藥治療肺纖維化（Pulmonary Fibrosis,PF）提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:體外培養(yǎng)MRC-5細(xì)胞,水蛭素作為實(shí)驗(yàn)藥物,隨機(jī)分為對照組、TGF-β1組（TGF-β1 10ng/ml誘導(dǎo)24h）、水蛭素低濃度組A（TGF-β1 10ng/ml誘導(dǎo)24h后給予水蛭素0.1562mmol/L）、水蛭素中濃度組B（TGF-β1 10ng/ml誘導(dǎo)24h后給予水蛭素0.3125mmol/L）、水蛭素高濃度組C（TGF-β1 10ng/ml誘導(dǎo)24h后給予水蛭素0.625mmol/L）五組。CCK-8法檢測細(xì)胞增殖;RT-PCR、Western Blotting檢測TGF-βRⅡ、α-平滑肌肌動蛋白（α-smooth muscle action,α-SMA）、Smad 3、Smad 7 mRN... 

【文章來源】：山東中醫(yī)藥大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

水蛭素cck-8檢測結(jié)果

Smad 3、Smad 7 mRNA 表達(dá)的影響。2：與 Control Group 相比較，★P<0.01,▲P<0.05；與 TGF-β1 Group 相比較，<0.01，△P<0.05；水蛭素各組相比較，◇P<0.01，◆P<0.05。圖 4、5、6 同。 水蛭素對 TGF-β1 誘導(dǎo)的 MRC-5 細(xì)胞 TGF-β1/Smads 信號通路 TGF-β RⅡ、αA 、Smad 3、Smad 7 蛋白磷酸化影響Western blotting 結(jié)果顯示，經(jīng) TGF-β1 刺激后，各組 MRC-5 細(xì)胞 TGF-β Rα-SMA、Smad 3、Smad 7 蛋白表達(dá)水平的變化趨勢與 mRNA 一致（見圖 6），即照組比較，TGF-β1 組、水蛭素各組 TGF-β RⅡ、α-SMA、Smad 3 蛋白表達(dá)量增加，Smad 7 蛋白表達(dá)明顯降低；同 TGF-β1 干預(yù)組比較，水蛭素各組下調(diào) TGF-RⅡ、α-SMA、Smad 3 蛋白表達(dá)量，上調(diào) Smad 7 蛋白水平增加，且呈劑量效應(yīng)關(guān)高濃度組作用最顯著。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3003198