五谷蟲(chóng)及其提取物對(duì)H22荷瘤小鼠的抗腫瘤機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-26 08:33
目的:研究五谷蟲(chóng)及其提取物對(duì)H22荷瘤小鼠的抑瘤作用,探討五谷蟲(chóng)抗腫瘤的分子機(jī)制。方法:構(gòu)建H22荷瘤小鼠模型,隨機(jī)分為正常組、模型組、CTX組、五谷蟲(chóng)低、高劑量(0.75、1.5 g/kg)組和五谷蟲(chóng)提取物低、高劑量(0.75、1.5g/kg)組,連續(xù)給藥10天,觀(guān)察各組小鼠狀態(tài)及腫瘤生長(zhǎng)情況,計(jì)算腫瘤抑制率;檢測(cè)小鼠肝腎功能指標(biāo);Western blotting檢測(cè)瘤組織中p38MAPK和p-p38MAPK的蛋白表達(dá)水平;ELISA法檢測(cè)瘤組織中的IL-1β、IL-6、TNF-α、VEGF水平。重新構(gòu)建H22荷瘤小鼠模型,除調(diào)整給藥組為五谷蟲(chóng)提取物低、中、高劑量(0.375、0.75、1.5g/kg)組,其余實(shí)驗(yàn)條件不變;記錄各組小鼠腫重、胸腺和脾臟的重量,計(jì)算腫瘤抑制率和免疫器官指數(shù);用ELISA法檢測(cè)荷瘤小鼠腫瘤組織中IL-2、IgG、IFN-γ等細(xì)胞因子的活性水平;使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)小鼠外周血和脾臟中T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞數(shù)。結(jié)果:五谷蟲(chóng)勻漿在0.75、1.5 g/kg給藥量時(shí)沒(méi)有抗腫瘤...
【文章來(lái)源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:87 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
五谷蟲(chóng)及其提取物對(duì)H22荷瘤小鼠瘤重的影響
**與模型組相比較,P<0.01。圖1-3 五谷蟲(chóng)提取物對(duì)H22荷瘤小鼠腫瘤組織中IL-1β、IL-6、TNF-α、VEGF水平的影響Figure 1-3 The effect of Chrysomya megacephala (Fab.)extracts on the levels of IL-1β, IL-6, TNF-α, andVEGF in tumors of H22 tumor-bearing mice*P<0.05,vs the model;**P<0.01,vs the model.IL-6IL-6(pg/ml)modelCTXCMextracts0.75g/kgCMextracts1.5g/kg0100020003000* **TNF-aTNF-a(pg/ml)modelCTXCMextracts0.75g/kgCMextracts1.5g/kg0200400600*****
分離液液面上方,不要破壞淋巴細(xì)胞分離液和細(xì)胞懸液的界面,室溫下400g水平離心15 min,另取干凈的做好標(biāo)記的10 mL離心管,每管加入4 mL生理鹽水備用。離心完成后,小心的取出離心管,管內(nèi)分層如圖2-1,取圖中PBMC層細(xì)胞。加至之前準(zhǔn)備好的對(duì)應(yīng)的生理鹽水管中。充分混勻后,2000rpm離心20 min。棄去上清液,沉淀用Lysing cytometry staining buffer洗滌2次后,加入300 μLLysing cytometry staining buffer,并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),并調(diào)整濃度為1*106個(gè)/mL[32-34]。圖2-1 小鼠淋巴細(xì)胞分離液使用示意圖Figure 2-1 The diagram of uselymphocyte separation media(2)荷瘤小鼠脾臟淋巴細(xì)胞懸液中T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞數(shù)的測(cè)定取100 μL細(xì)胞懸液置于相對(duì)應(yīng)的1.5 mL離心管中,按照離心管上標(biāo)記次加入2 μL CD4、2 μL CD8抗體和2 μL CD4、2 μL CD3抗體,空白管不加抗
本文編號(hào):3000801
【文章來(lái)源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:87 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
五谷蟲(chóng)及其提取物對(duì)H22荷瘤小鼠瘤重的影響
**與模型組相比較,P<0.01。圖1-3 五谷蟲(chóng)提取物對(duì)H22荷瘤小鼠腫瘤組織中IL-1β、IL-6、TNF-α、VEGF水平的影響Figure 1-3 The effect of Chrysomya megacephala (Fab.)extracts on the levels of IL-1β, IL-6, TNF-α, andVEGF in tumors of H22 tumor-bearing mice*P<0.05,vs the model;**P<0.01,vs the model.IL-6IL-6(pg/ml)modelCTXCMextracts0.75g/kgCMextracts1.5g/kg0100020003000* **TNF-aTNF-a(pg/ml)modelCTXCMextracts0.75g/kgCMextracts1.5g/kg0200400600*****
分離液液面上方,不要破壞淋巴細(xì)胞分離液和細(xì)胞懸液的界面,室溫下400g水平離心15 min,另取干凈的做好標(biāo)記的10 mL離心管,每管加入4 mL生理鹽水備用。離心完成后,小心的取出離心管,管內(nèi)分層如圖2-1,取圖中PBMC層細(xì)胞。加至之前準(zhǔn)備好的對(duì)應(yīng)的生理鹽水管中。充分混勻后,2000rpm離心20 min。棄去上清液,沉淀用Lysing cytometry staining buffer洗滌2次后,加入300 μLLysing cytometry staining buffer,并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),并調(diào)整濃度為1*106個(gè)/mL[32-34]。圖2-1 小鼠淋巴細(xì)胞分離液使用示意圖Figure 2-1 The diagram of uselymphocyte separation media(2)荷瘤小鼠脾臟淋巴細(xì)胞懸液中T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞數(shù)的測(cè)定取100 μL細(xì)胞懸液置于相對(duì)應(yīng)的1.5 mL離心管中,按照離心管上標(biāo)記次加入2 μL CD4、2 μL CD8抗體和2 μL CD4、2 μL CD3抗體,空白管不加抗
本文編號(hào):3000801
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