目的:觀察大豆苷元（daidzein,DD）對(duì)大鼠心室肌細(xì)胞鈉通道、瞬時(shí)外向鉀通道、L型鈣通道的電流及動(dòng)力學(xué)特征的影響,探討其對(duì)心肌細(xì)胞保護(hù)作用的機(jī)制。方法:MTT法檢測(cè)DD的毒性;Langendorff主動(dòng)脈逆行灌流和單酶解法分離大鼠單個(gè)心肌細(xì)胞;通過(guò)全細(xì)胞膜片鉗技術(shù),在電壓鉗模式下觀察、記錄、分析DD不同劑量組低（1μmol/L）、中（3μmol/L）、高（10μmol/L）)給藥前、后大鼠心肌細(xì)胞離子通道電流及其動(dòng)力學(xué)特征的變化。結(jié)果:1.DD對(duì)乳鼠心肌細(xì)胞活力的影響:SD乳鼠心肌組織經(jīng)0.25%的胰酶液4次消化,獲得心肌細(xì)胞。后接種于培養(yǎng)皿中,隔24～48 h換液。待倒置顯微鏡下觀察心肌細(xì)胞充斥視野80-90%時(shí),在乳鼠心肌培養(yǎng)細(xì)胞液中加入不同濃度DD（0.1、0.3、1、3、10、30、100）μmol/L,再繼續(xù)培養(yǎng)24 h后,隨著藥物濃度增加而降低,細(xì)胞的存活率也不斷下降。其中,當(dāng)所加入的DD終濃度為30～100 μmol/L時(shí),心肌細(xì)胞活力的降低最明顯,與給藥前相比,差異具有顯著性（p<0.05）。因此,我們選取DD終濃度為1、3、10μmol/L作為后續(xù)膜片鉗實(shí)... 

【文章來(lái)源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２?ＤＵ對(duì)乳鼠心室肌細(xì)胞活力的影響（＾土?ｓ，?ｎ＝６）??

穩(wěn)態(tài)激活程序可引發(fā)快速激活內(nèi)向電流。此電流可被１５?＾ｍｏｌ／ＬＴＴＸ（高特異性鈉通道??阻滯劑）近乎阻斷，所引電流即為ＩＮａ。待電流趨于穩(wěn)定后，使用細(xì)胞外液洗脫后，１＆接近??恢復(fù)到給藥前水平（圖４Ａ），提示ＤＤ對(duì)ＩＮａ的作用是可逆的。用細(xì)胞累積加藥法，ＤＤ（０．１??ｐｍｏｌ／Ｌ）對(duì)?ＩＮａ影響微弱，而?ＤＤ（０．３、１、３、ｌＯｐｍｏｌ／Ｌ）使得大鼠心室肌細(xì)胞?ＩＮａ：?（－５３．９±６．３５）??ｐＡ／ｐＦ（〇ｎｍｏｌ／Ｌ）分別降至（－３３．７８±３．２４）ｐＡ／ｐＦ、（－２５．１６±４．２４）ｐＡ／ｐＦ、（－２２．２８±３．５４）ｐＡ／ｐＦ?和??（－１７．９６土４．５６）?ｐＡ／ｐＦ?（＾＜０．０１）（圖４Ｂ）。提示ＤＤ以濃度依賴性抑制ＩＮａ，濃度越高，抑制作??用愈強(qiáng)。??Ａ?Ｂ??ＩＴ＂—?Ｓ．２°．ｌ＿?Ｗ驟??Ｉｆ￣？?０．３?ｕｎｗＷ－?〇〇?！＂４〇’國(guó)?＿?＊＊??Ｈ￣￣？ｗａｓｈｍ?｜?甲琴??＾?＾?Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＩｎＡ?ｇ?？￥〇－丄??Ｉ?？??Ｉ?ｗ?－納，Ｋ０ｍＶ??，〇ｍＳ?－８０?——，——，——，——，——ｒ—??Ｄｒｕｇ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｊｉｉｎｏｌ／Ｌ??圖４ＤＤ對(duì)心室肌細(xì)胞ＩＮａ的影響（Ａ：?jiǎn)未碳ぃ唬拢?ＤＤＯ－ｌ〇Ｍｍｏｌ／Ｌ）。（５±ｓ

??Ｆｉｇｕｒｅ?３?Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ?Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ａｃｕｔｅ?Ｉｓｏｌａｔｅｄ?Ｒａｔ?Ｃａｒｄｉａｃ?Ｍｙｏｃｙｔｅｓ（２００?Ｘ）．（Ａ：?Ａｃｕｔｅ?ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ；Ｂ：??Ｃａｒｄｉａｃ?ｍｙｏｃｙｔｅｓ?ｐｒｅｓｅｒｖｅｄ?ｉｎ?ＫＢ?ｓｏｌｕｔｉｏｎ?ｗｅｒｅ?ｒｅｃａｌｃｉｆｉｅｄ）．??３．３?ＤＤ對(duì)大鼠心室肌細(xì)胞鈉通道的影響??３．３．１?ＤＤ對(duì)心室肌細(xì)胞ＩＮａ的影響??穩(wěn)態(tài)激活程序可引發(fā)快速激活內(nèi)向電流。此電流可被１５?＾ｍｏｌ／ＬＴＴＸ（高特異性鈉通道??阻滯劑）近乎阻斷，所引電流即為ＩＮａ。待電流趨于穩(wěn)定后，使用細(xì)胞外液洗脫后，１＆接近??恢復(fù)到給藥前水平（圖４Ａ），提示ＤＤ對(duì)ＩＮａ的作用是可逆的。用細(xì)胞累積加藥法，ＤＤ（０．１??

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