目的:觀察大豆苷元（daidzein,DD）對大鼠心室肌細胞鈉通道、瞬時外向鉀通道、L型鈣通道的電流及動力學特征的影響,探討其對心肌細胞保護作用的機制。方法:MTT法檢測DD的毒性;Langendorff主動脈逆行灌流和單酶解法分離大鼠單個心肌細胞;通過全細胞膜片鉗技術,在電壓鉗模式下觀察、記錄、分析DD不同劑量組低（1μmol/L）、中（3μmol/L）、高（10μmol/L）)給藥前、后大鼠心肌細胞離子通道電流及其動力學特征的變化。結(jié)果:1.DD對乳鼠心肌細胞活力的影響:SD乳鼠心肌組織經(jīng)0.25%的胰酶液4次消化,獲得心肌細胞。后接種于培養(yǎng)皿中,隔24～48 h換液。待倒置顯微鏡下觀察心肌細胞充斥視野80-90%時,在乳鼠心肌培養(yǎng)細胞液中加入不同濃度DD（0.1、0.3、1、3、10、30、100）μmol/L,再繼續(xù)培養(yǎng)24 h后,隨著藥物濃度增加而降低,細胞的存活率也不斷下降。其中,當所加入的DD終濃度為30～100 μmol/L時,心肌細胞活力的降低最明顯,與給藥前相比,差異具有顯著性（p<0.05）。因此,我們選取DD終濃度為1、3、10μmol/L作為后續(xù)膜片鉗實... 

【文章來源】：揚州大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２?ＤＵ對乳鼠心室肌細胞活力的影響（＾土?ｓ，?ｎ＝６）??

穩(wěn)態(tài)激活程序可引發(fā)快速激活內(nèi)向電流。此電流可被１５?＾ｍｏｌ／ＬＴＴＸ（高特異性鈉通道??阻滯劑）近乎阻斷，所引電流即為ＩＮａ。待電流趨于穩(wěn)定后，使用細胞外液洗脫后，１＆接近??恢復到給藥前水平（圖４Ａ），提示ＤＤ對ＩＮａ的作用是可逆的。用細胞累積加藥法，ＤＤ（０．１??ｐｍｏｌ／Ｌ）對?ＩＮａ影響微弱，而?ＤＤ（０．３、１、３、ｌＯｐｍｏｌ／Ｌ）使得大鼠心室肌細胞?ＩＮａ：?（－５３．９±６．３５）??ｐＡ／ｐＦ（〇ｎｍｏｌ／Ｌ）分別降至（－３３．７８±３．２４）ｐＡ／ｐＦ、（－２５．１６±４．２４）ｐＡ／ｐＦ、（－２２．２８±３．５４）ｐＡ／ｐＦ?和??（－１７．９６土４．５６）?ｐＡ／ｐＦ?（＾＜０．０１）（圖４Ｂ）。提示ＤＤ以濃度依賴性抑制ＩＮａ，濃度越高，抑制作??用愈強。??Ａ?Ｂ??ＩＴ＂—?Ｓ．２°．ｌ＿?Ｗ驟??Ｉｆ￣？?０．３?ｕｎｗＷ－?〇〇?�。ⅲ穿枴瘒�?＿?＊＊??Ｈ￣￣？ｗａｓｈｍ?｜?甲琴??＾?＾?Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＩｎＡ?ｇ?？￥〇－丄??Ｉ?？??Ｉ?ｗ?－納，Ｋ０ｍＶ??，〇ｍＳ?－８０?——，——，——，——，——ｒ—??Ｄｒｕｇ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｊｉｉｎｏｌ／Ｌ??圖４ＤＤ對心室肌細胞ＩＮａ的影響（Ａ：單刺激；Ｂ：?ＤＤＯ－ｌ〇Ｍｍｏｌ／Ｌ）。（５±ｓ

??Ｆｉｇｕｒｅ?３?Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ?Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ａｃｕｔｅ?Ｉｓｏｌａｔｅｄ?Ｒａｔ?Ｃａｒｄｉａｃ?Ｍｙｏｃｙｔｅｓ（２００?Ｘ）．（Ａ：?Ａｃｕｔｅ?ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ；Ｂ：??Ｃａｒｄｉａｃ?ｍｙｏｃｙｔｅｓ?ｐｒｅｓｅｒｖｅｄ?ｉｎ?ＫＢ?ｓｏｌｕｔｉｏｎ?ｗｅｒｅ?ｒｅｃａｌｃｉｆｉｅｄ）．??３．３?ＤＤ對大鼠心室肌細胞鈉通道的影響??３．３．１?ＤＤ對心室肌細胞ＩＮａ的影響??穩(wěn)態(tài)激活程序可引發(fā)快速激活內(nèi)向電流。此電流可被１５?＾ｍｏｌ／ＬＴＴＸ（高特異性鈉通道??阻滯劑）近乎阻斷，所引電流即為ＩＮａ。待電流趨于穩(wěn)定后，使用細胞外液洗脫后，１＆接近??恢復到給藥前水平（圖４Ａ），提示ＤＤ對ＩＮａ的作用是可逆的。用細胞累積加藥法，ＤＤ（０．１??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]中國心血管疾病防治研究:機遇與挑戰(zhàn)[J]. 陳義漢.  中國循環(huán)雜志. 2019(01)
[2]從心律失常與心衰并發(fā)癥的最新臨床進展解析中醫(yī)治療“脈結(jié)代,心動悸”的科學內(nèi)涵[J]. 解微微,高佳明,石羨茹,王泰一,崔英,朱彥.  中草藥. 2018(22)
[3]中藥治療心房纖顫研究進展及人參皂苷治療心房纖顫的生物分子網(wǎng)絡分析[J]. 朱寶琛,張菀桐,陸洋,白潔,李鵬躍,杜守穎.  中草藥. 2018(12)
[4]中醫(yī)藥干預心肌梗死合并高脂血癥患者的隊列研究[J]. 高武霖,戴國華,吳彬,管慧,宋超,畢冬雪.  中華中醫(yī)藥雜志. 2018(05)
[5]橙皮素對異丙基腎上腺素誘導大鼠心衰的保護作用[J]. 曹靜,呂吉元,張明升,師銳贊,馮巧愛.  中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志. 2017(18)
[6]薯蕷皂苷現(xiàn)代藥理學研究進展[J]. 王淑榮,凌霜,張慶光,許錦文.  中國藥理學通報. 2017(02)
[7]心臟NAv1.5通道蛋白與心律失常關系研究進展[J]. 張帥,周立君,趙繼義.  中國心血管雜志. 2016(05)
[8]晚鈉電流阻滯劑與心律失常治療[J]. 歐陽松,侯月梅.  臨床心血管病雜志. 2016(09)
[9]蛇床子素對大鼠心室肌細胞鈉通道的影響[J]. 許正新,鄭雪,朱磊.  實用臨床醫(yī)藥雜志. 2016(07)
[10]紅景天苷體外灌流對大鼠心肌細胞膜鈉通道電流的影響[J]. 黃媛恒,謝劍,黃創(chuàng)明,韋仙琴,林心媚,劉芳銘,李映新.  山東醫(yī)藥. 2016(07)



本文編號：3000592