發(fā)布時間：2021-01-13 11:53

　　原發(fā)性肝癌（Primary liver cancer,PLC）是我國常見的惡性腫瘤之一,發(fā)病率和死亡率高,具有高轉(zhuǎn)移性和高復發(fā)性,治療困難、預后較差。慢性炎癥和抑癌基因的失活是導致肝癌發(fā)生發(fā)展的重要因素。近期研究發(fā)現(xiàn)一些抑癌基因在免疫細胞內(nèi)同樣能表達,這就引發(fā)了進一步的思考:是否能篩選出一些兼具抑炎抑癌雙重功能的基因,通過靶向免疫細胞和腫瘤細胞內(nèi)相同的信號通路分子,進而影響癌癥特別是炎癥相關癌癥的發(fā)生發(fā)展。臨床研究發(fā)現(xiàn),肝癌患者外周血中的巨噬細胞內(nèi)低水平的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶4（serine/threonine-protein kinase 4,STK4）與高水平的白介素-1受體相關激酶1（IL-1 receptor associated kinase 1,IRAK1）呈負相關,且腫瘤組織內(nèi)有大量的巨噬細胞浸潤。IRAK1抑制劑可以明顯降低由于STK4缺失導致的慢性炎癥和肝癌的發(fā)生發(fā)展。因此STK4-IRAK1可以作為阻斷炎性肝癌發(fā)生的新靶點。本論文主要研究了柴胡皂苷（saikosapoins,SS）-b2是否通過調(diào)控STK4/IRAK1/核因子-κB（Nuclear factor-... 

【文章來源】：河南科技大學河南省

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 緒論
    1.1 炎癥與原發(fā)性肝癌的相關研究
    1.2 炎癥相關通路與原發(fā)性肝癌
        1.2.1 JAK-STAT信號通路與癌癥
        1.2.2 NF-κB信號通路與癌癥
        1.2.3 Toll樣受體信號通路與癌癥
    1.3 STK4/IRAK1/NF-κB相關通路與原發(fā)性肝癌
        1.3.1 STK4與肝癌
        1.3.2 IRAK1與肝癌
    1.4 柴胡皂苷-b2抗癌作用及保肝作用研究
第2章 前言
第3章 柴胡皂苷-b2對DEN誘導的小鼠原發(fā)性肝癌的抑制作用
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗動物
        3.1.2 實驗藥品
        3.1.3 實驗儀器
        3.1.4 實驗試劑
        3.1.5 主要試劑配制
    3.2 試驗方法
        3.2.1 模型制備與分組給藥
        3.2.2 取材和計算臟器指數(shù)
        3.2.3 血液指標檢測
        3.2.4 肝臟組織病理學檢測
        3.2.5 免疫組織化學法檢測肝臟組織內(nèi)Ki67、STK4和IRAK1的表達情況
        3.2.6 qPCR檢測外周血巨噬細胞中STK4和IRAK1的mRNA表達水平
        3.2.7 qPCR檢測肝臟組織中IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表達水平
        3.2.8 Western blot法檢測STK4、IRAK1和NF-κB蛋白的表達變化
    3.3 統(tǒng)計學方法
    3.4 結果
        3.4.1 DEN誘導小鼠4周后對肝臟形態(tài)學和血清學水平的影響
        3.4.2 柴胡皂苷-b2對DEN誘導小鼠12周后肝纖維化的影響
        3.4.3 柴胡皂苷-b2對DEN誘導小鼠19周后肝臟表面觀及血清學指標的影響
        3.4.4 柴胡皂苷-b2對DEN誘導小鼠19周后體質(zhì)量、肝功能和免疫功能的影響
        3.4.5 柴胡皂苷-b2對DEN誘導小鼠19周后肝臟組織病理學的影響
        3.4.6 柴胡皂苷-b2對DEN誘導小鼠19周后肝臟組織STK4和IRAK1表達的影響
        3.4.7 柴胡皂苷-b2對DEN誘導小鼠19周后外周血巨噬細胞內(nèi)STK4和IRAK1 mRNA表達水平的影響
        3.4.8 柴胡皂苷-b2對DEN誘導小鼠19周后肝臟組織中IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表達水平的影響
        3.4.9 柴胡皂苷-b2對DEN誘導小鼠19周后肝臟組織內(nèi)STK4、IRAK1和NF-κB蛋白表達的影響
    3.5 討論
        3.5.1 柴胡皂苷-b2對原發(fā)性肝癌發(fā)生發(fā)展的影響
        3.5.2 柴胡皂苷-b2通過STK4/IRAK1/NF-κB通路對原發(fā)性肝癌的作用
第4章 柴胡皂苷-b2對LPS刺激RAW264.7巨噬細胞STK4/IRAK1/NF-κB通路的調(diào)控作用
    4.1 實驗材料
        4.1.1 細胞株
        4.1.2 實驗藥品
        4.1.3 實驗儀器
        4.1.4 實驗試劑
        4.1.5 主要試劑配制
    4.2 實驗方法
        4.2.1 細胞培養(yǎng)
        4.2.2 MTT法檢測細胞活性
        4.2.3 Griess法測定RAW264.7巨噬細胞上清中的NO分泌量
        4.2.4 qPCR法檢測細胞內(nèi)IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表達水平
        4.2.5 光學顯微鏡對RAW264.7巨噬細胞的形態(tài)學觀察
        4.2.6 Western blot法檢測細胞內(nèi)STK4、IRAK1和NF-κB蛋白的表達變化
    4.3 統(tǒng)計學方法
    4.4 結果
        4.4.1 NO標準曲線
        4.4.2 LPS刺激RAW264.7巨噬細胞的劑量篩選
        4.4.3 柴胡皂苷-b2對LPS刺激的RAW264.7巨噬細胞治療劑量篩選
        4.4.4 地塞米松對LPS刺激的RAW264.7巨噬細胞治療劑量篩選
        4.4.5 柴胡皂苷-b2對LPS刺激的RAW264.7巨噬細胞內(nèi)IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表達水平的影響
        4.4.6 柴胡皂苷-b2對LPS刺激的RAW264.7巨噬細胞形態(tài)學的影響
        4.4.7 柴胡皂苷-b2對LPS刺激的RAW264.7巨噬細胞內(nèi)STK4、IRAK1和NF-κB蛋白表達的影響
    4.5 討論
第5章 結論
參考文獻
縮略語詞匯表
致謝
攻讀學位期間的研究成果


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2974827