以土茯苓6種黃酮類成分為底物,研究了不同孵育時間、不同CYP3A4酶濃度對6種成分代謝的影響。通過土茯苓6種黃酮類成分的酶促動力學(xué),得到米氏常數(shù)（K_m）、最大反應(yīng)速度(V_max)和代謝清除率(Cl_int)。結(jié)果表明,以表兒茶素、新落新婦苷、落新婦苷、異落新婦苷、黃杞苷、白藜蘆醇為底物時,K_m分別為1.39,1.38,2.37,1.59,0.79,2.01μmol/L; V_max分別為0.02,0.01,0.02,0.02,0.01,0.02μmol/（L·min）; Clint分別為（1.14,0.96,0.90,0.99,1.42,0.97）×10^-2min^-1。 

【文章來源】：分析試驗室. 2020,39(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

空白組(a)，對照組(b)及樣品組(c)孵育后的高效液相色譜圖

在質(zhì)量濃度為2.5 mg/m L的CYP3A4酶中分別加入濃度為10μmol/L的6種黃酮類成分，于30℃恒溫箱中孵育30,60,90,120,180 min。結(jié)果如圖2所示:土茯苓6種黃酮類成分在30～90 min內(nèi)呈線性消除的趨勢明顯，孵化120 min后土茯苓6種黃酮類成分剩余百分數(shù)不高于20%，確定最佳孵化時間120 min。在質(zhì)量濃度為1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 mg/m L的CYP3A4酶中分別加入濃度為10μmol/L的6種黃酮類成分，于30℃恒溫箱中孵育120 min。蛋白質(zhì)量濃度-代謝消失率的關(guān)系如圖3所示。結(jié)果表明隨著CYP3A4酶濃度的增加，土茯苓6種黃酮類成分消失率有增加的趨勢，當CYP3A4酶濃度為2.5 mg/m L，代謝消除率幾乎不變，故選擇2.5 mg/m L為最佳CYP3A4酶濃度。

在質(zhì)量濃度為2.5 mg/mL的CYP3A4酶中，分別加入質(zhì)量濃度為0.625,1.25,2.5,5,10μmol/L的6種黃酮類成分在NADPH再生反應(yīng)系統(tǒng)中，30℃恒溫箱中孵化120 min，底物質(zhì)量濃度與代謝消失率的關(guān)系如圖4所示。結(jié)果表明土茯苓6種黃酮類成分質(zhì)量濃度大于5μmol/L時，其代謝速率并未隨土茯苓6種黃酮類成分質(zhì)量濃度的增加而呈線性增加，表現(xiàn)出明顯的代謝飽和特性，確定最佳底物質(zhì)量濃度為5μmol/L。圖4 底物濃度對土茯苓6種黃酮類成分代謝的影響

【參考文獻】：
期刊論文
[1]UHPLC-MS-MS同時測定化橘紅中3個影響PXR-CYP3A4調(diào)控血脂成分[J]. 陳昭,張靖年,陳偉韜,胥愛麗,畢曉黎.  遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報. 2020(01)
[2]人參、甘草與附子配伍調(diào)控CYP450系統(tǒng)減輕肝毒性研究[J]. 李晗,張廣平,馬夢,蘇萍,楊依霏,陳騰飛,葉祖光.  中國新藥雜志. 2019(24)
[3]白及有效成分Militarine在肝微粒體中的體外代謝途徑及其酶促動力學(xué)特征[J]. 夏濤,王昌權(quán),陳浩,鄭林,鞏仔鵬,李月婷,李勇軍,黃勇,潘潔.  中國藥房. 2019(10)
[4]二氫楊梅素的肝病藥理機制研究進展[J]. 李杜,王曉玲,葉(目亭)杰,閆曉風,胡旭東.  中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志. 2019(02)
[5]采用UPLC-MS/MS法研究辣薄荷基厚樸酚在不同種屬肝微粒體中的代謝特征[J]. 鄧星,羅莉婭,茍立平,溫倩雯,湯明海,萬麗.  中國藥房. 2019(02)
[6]土茯苓藥學(xué)研究概述[J]. 范九梅,馬卓.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(08)
[7]UPLC-TSQ-Endure質(zhì)譜分析Rg3對2型糖尿病大鼠P450酶活性的影響[J]. 劉尚,戴雨霖,于珊珊,喬夢丹,郭云龍,鄭飛,越皓.  分析試驗室. 2018(01)
[8]斑蝥酸鈉維生素B6和復(fù)方苦參注射液對人肝微粒體細胞色素P450酶活性的抑制作用[J]. 蔡小軍,黃凱,宋惠珠,溫浩,洪遠.  中國臨床藥理學(xué)雜志. 2017(21)
[9]白藜蘆醇對藥物轉(zhuǎn)運體和代謝酶影響的研究進展[J]. 賈永明,劉志浩,劉克辛.  藥學(xué)學(xué)報. 2016(06)



本文編號：2972603