我國是乙型肝炎高地方性流行區(qū),并且每年死于肝硬化和肝細胞癌等乙型肝炎相關(guān)疾病的患者在不斷增多,肝纖維化是慢性乙型肝炎發(fā)展到肝硬化的必經(jīng)階段,如何防治乙肝已經(jīng)成為現(xiàn)代醫(yī)學的重要問題。慢性乙型肝炎患者大多數(shù)合并有肝鐵代謝紊亂,過量的鐵在肝臟中沉積,加重肝臟功能損害,從而加快慢性乙型肝炎肝纖維化向肝硬化、肝癌轉(zhuǎn)化的進程。如果能有效地抑制這個過程,也就延緩了患者病情惡化的進程,以此達到提高患者生活質(zhì)量,延長患者生命的目的。芪珠方是臨床驗方,用于治療慢性乙型肝炎具有良好的療效,但其治療慢性乙型肝炎的機制尚不明確。有文獻報道芪珠方對慢性肝病抗肝纖維化作用機理之一可能在于通過減輕肝細胞損傷,保護肝細胞,減輕炎癥反應(yīng),從而減少了肝纖維化的激發(fā)因素,抑制了膠原合成。本文選取方中重要組成成分黃芪的有效成分黃芪甲苷,分別對芪珠方和黃芪甲苷進行研究,以鐵右旋糖苷作為誘導劑,建立肝鐵超載小鼠模型和細胞模型,研究芪珠方及黃芪甲苷對鐵超載所致肝細胞損傷的保護作用。在小鼠體內(nèi)模型中,給予芪珠方組與陽性對照相比較,總鐵結(jié)合力上升,血清轉(zhuǎn)鐵蛋白及ALT、AST下降,芪珠方可抑制肝臟中鐵含量的升高,緩解由鐵超載引起的肝臟鐵聚積現(xiàn)象,鐵超載導致肝損傷可能跟脂質(zhì)過氧化、蛋白質(zhì)硝化密切相關(guān)而芪珠方表現(xiàn)出良好的抗氧化及抗硝化作用,從而有效地逆轉(zhuǎn)鐵超載引起的肝損傷。體外細胞實驗中,給予芪珠方后,GSH水平隨著芪珠方劑量的增加而顯著升高;ALT、AST、MDA水平隨著芪珠方劑量的增加而顯著降低;說明芪珠方可有效抑制鐵超載引起的脂質(zhì)過氧化。T-BIL水平隨著芪珠方劑量的增加而顯著降低;結(jié)果說明鐵含量過多會造成肝細胞損傷,而芪珠方可改善鐵超載引起的肝細胞損傷。最后再利用黃芪甲苷作用于鐵超載所致肝損傷小鼠模型,鐵超載模型組小鼠血清中AST、ALT的含量均顯著高于空白對照組,血清鐵含量較鐵超載模型組顯著降低,而TIBC顯著升高;MDA大幅上升,GSH明顯降低,說明鐵超載的肝臟組織有嚴重的脂質(zhì)過氧化損傷;不同劑量黃芪甲苷組的肝臟中MDA的濃度有不同程度的下降,而GSH的活性則顯著升高,可初步推斷肝臟的脂質(zhì)過氧化損傷減輕。說明不同濃度的黃芪甲苷對于鐵超載引起的脂質(zhì)過氧化損傷的緩解作用呈現(xiàn)一定的劑量趨勢,據(jù)此推測黃芪甲苷的保肝作用機制很可能與其抗氧化作用有關(guān)。
【學位單位】：江蘇大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

芪珠方及其有效單體黃芪甲苷抗乙肝肝纖維化鐵代謝紊亂機制研究點，沒有出現(xiàn)纖維結(jié)蹄組織，也未觀察到水樣變性或者脂肪變性的現(xiàn)象，無組織增生以及細胞浸潤。在注射不同劑量的右旋糖酐鐵之后，可以觀察到不同程度上的肝細胞紊亂現(xiàn)象，出現(xiàn)變形或者壞死等情況，這說明鐵的代謝紊亂成功的導致了小鼠的纖維化模型。芪珠方給藥組可明顯改善上述病理改變，結(jié)果見圖 1。

Table 2 Determination of iron content in liver of mice in each group對照組 150-Fe 組 300-Fe 組 500-Fe Ironontent(μg/g)206.66±85.04443.33±40.41963.87±127.32**1433.60102.73*LBa 組 MBa 組 HBa 組Ironntent(μg/g)900.45±110.12&&703.33±134.28&&450.16±75.49&&&：與對照組相比，**P<0.01；***P<0.001；與模型組（500-Fe）相比，&P<0.&P<0.01，&&&P<0.001。

芪珠方及其有效單體黃芪甲苷抗乙肝肝纖維化鐵代謝紊亂機制研究2.4.4 免疫組化法檢測蛋白硝化的表達如下圖所示，采用化學方法對小鼠的肝臟組織進行檢測，如圖 3 所示，圖中血管膜周圍棕黃色顆粒即為 3-NT，模型組中 3-NT 的含量明顯較正常組顯著增加，檢測結(jié)果說明鐵超載的現(xiàn)象會導致體內(nèi)的蛋白出現(xiàn)硝化的情況，給與芪珠方之后，硝化程度明顯下降。結(jié)果說明了鐵超載會導致肝臟內(nèi)部的蛋白硝化，而芪珠方可以改善這種癥狀。
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本文編號：2888890