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羅布麻葉的HPLC指紋圖譜及抗氧化活性譜效關(guān)系研究

發(fā)布時(shí)間:2020-11-17 13:42
   目的建立羅布麻葉的指紋圖譜并考察其體外抗氧化活性的譜效關(guān)系,為揭示其抗氧化活性物質(zhì)基礎(chǔ)提供參考。方法采用HPLC法建立20批羅布麻葉的指紋圖譜,不同產(chǎn)地羅布麻葉體外抗氧化活性的測(cè)試采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)自由基清除法,利用灰色關(guān)聯(lián)度分析(GRA)法和雙變量相關(guān)性分析(BCA)法對(duì)譜效關(guān)系進(jìn)行探討。結(jié)果建立了20批羅布麻葉HPLC指紋圖譜,確定了18個(gè)共有峰,相似度在0.883~0.989范圍內(nèi)。運(yùn)用對(duì)照品比對(duì)法鑒定了其中7個(gè)峰:X_2為綠原酸,X_7為蘆丁,X_8為金絲桃苷,X_9為異槲皮苷,X_(12)為紫云英苷,X_(17)為槲皮素,X_(18)為山柰酚。對(duì)樣品的指紋圖譜進(jìn)行聚類分析,結(jié)果顯示可聚為4類。20批羅布麻葉均有不同程度的清除自由基活性。GRA法分析結(jié)果顯示,18個(gè)共有峰與清除自由基的關(guān)聯(lián)度在0.691 7~0.959 3范圍內(nèi),大小依次為X_2X_9X_8X_(17)X_(18)X_(12)X_(11)X_7X_(13)X_(15)X_(14)X_1X_(10)X_3X_5X_6X_(16)X_4。BCA法分析結(jié)果顯示,2號(hào)峰(綠原酸)、8號(hào)峰(金絲桃苷)、9號(hào)峰(異槲皮苷)、17號(hào)峰(槲皮素)和18號(hào)峰(山柰酚)的含量變化與DPPH·自由基清除活性大小密切相關(guān)。結(jié)論市售不同產(chǎn)地羅布麻葉的化學(xué)成分基本一致,但不同產(chǎn)地的藥材質(zhì)量有一定差異,羅布麻葉抗氧化作用是多成分共同起效的結(jié)果。通過(guò)建立HPLC指紋圖譜及分析譜效關(guān)系探尋羅布麻葉抗氧化物質(zhì)基礎(chǔ),可為該藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供參考。
【部分圖文】:

羅布麻葉的HPLC指紋圖譜及抗氧化活性譜效關(guān)系研究


HPLC圖

指紋圖譜,指紋圖譜,相似度,圖譜


將各批羅布麻葉藥材的HPLC譜圖轉(zhuǎn)換成AIA格式,導(dǎo)入中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004 A版軟件,做相似度評(píng)價(jià),參照譜為S1的樣品圖譜,參照文獻(xiàn)[22]方法和步驟,得到各批藥材與對(duì)照?qǐng)D譜的相似度在0.883~0.989范圍內(nèi)。生成的對(duì)照?qǐng)D譜與各樣品圖譜的相似度結(jié)果見表2,20批樣品的HPLC指紋圖譜見圖2。2.5.3 聚類分析

聚類分析,樣品,羅布麻葉,面積


通過(guò)SPSS Statistics 19.0軟件,實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品指紋圖譜的系統(tǒng)聚類分析,采用組間連接法,變量為羅布麻葉18個(gè)共有峰峰面積,將歐式距離作為樣品的測(cè)度,聚類分析結(jié)果見圖3。由圖3可知,20份樣品可分成4類,S10、S18、S4和S11為第1類,S13、S19、S2、S17、S20、S3、S15、S6、S1、S16、S12、S14和S9為第2類,S7和S8為第3類,S5為第4類,未發(fā)現(xiàn)藥材產(chǎn)地與聚類分析結(jié)果有明顯相關(guān)性。第1類樣品中,2號(hào)(綠原酸)、8號(hào)(金絲桃苷)、9號(hào)(異槲皮苷)和11號(hào)峰的峰面積均較大,其峰面積總和也相對(duì)較大,因此聚為第1類;第2類、第3類和第4類樣品中,以上4個(gè)主要色譜峰峰面積總和呈依次減小的趨勢(shì),第4類樣品中除16,17和18號(hào)峰外,其余各色譜峰峰面積均較小。推測(cè)這可能與樣品的采收時(shí)間、生長(zhǎng)環(huán)境和氣候條件等因素有關(guān)。2.6 DPPH·自由基清除法測(cè)定各批羅布麻葉藥材的抗氧化作用
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