目的基于質(zhì)量標志物(Q-marker)理論,分析具有抗腫瘤活性的葒草醋酸乙酯提取物的成分,研究其質(zhì)量控制方法。方法首先使用UPLC-ESI-HRMS對該提取物進行成分鑒定;再使用HPLC進行成分的定量測定,同時建立其定量測定方法,并對鑒定出的化合物進行藥理作用分析,初步預測Q-marker;最后采用人非小細胞肺癌A549細胞模型,研究葒草醋酸乙酯提取物及6種候選成分混合物對A549腫瘤細胞生長及遷移的影響。結果通過UPLC-ESI-HRMS結果指認出12個化合物,其中,HPLC未檢出原兒茶酸、兒茶素、山柰素和芹菜素,異牡荊素和木犀草素質(zhì)量分數(shù)低于0.01mg/g,不納入Q-marker候選物之列。結合藥理作用分析,最終選擇了6種成分沒食子酸、異葒草苷、葒草苷、牡荊素、木犀草苷和槲皮苷作為其潛在Q-marker。各樣品中均能檢測出這6個成分,且6個成分總量超過10%。葒草醋酸乙酯提取物及等劑量6成分混合物均能顯著抑制A549細胞的增殖與遷移,并誘導其凋亡,且兩組之間效果無顯著性差異。結論沒食子酸、異葒草苷、葒草苷、牡荊素、木犀草苷和槲皮苷作為具有抗腫瘤活性的葒草醋酸乙酯提取物中的潛在Q-marker具有科學合理性;建立的葒草醋酸乙酯提取物的HPLC定量測定方法準確、穩(wěn)定。
【部分圖文】：

UPLC-ESI-HRMS鑒定發(fā)現(xiàn)POEa中含有沒食子酸、原兒茶酸、兒茶素、牡荊素、槲皮苷、山柰素、木犀草素、芹菜素、異葒草苷、葒草苷、異牡荊素、木犀草苷12種成分，見圖1和表1。以葒草苷為例，該化合物在供試品中的保留時間為12.64 min，一級質(zhì)譜信息顯示其在負離子模式下響應較正離子好，并得到m/z 447.093 0的準分子離子峰[M-H]-，經(jīng)Xcalibar軟件擬合后推測其分子式為C21H20O11，該化合物的二級離子碎片信息主要有m/z 357.061 7、m/z 327.051 1、分別對應[M-H-C3H6O3]-、[M-H-C4H8O4]-；推測其裂解途徑符合黃酮類化合物的裂解規(guī)律，結合文獻分析[15]，最終確定該化合物為葒草苷。

沒食子酸、異葒草苷、葒草苷、牡荊素、木犀草苷及槲皮苷質(zhì)量分數(shù)RSD分別為0.8%、1.3%、0.9%、1.0%、0.7%、0.8%，表明該方法重復性良好。3.2.6 加樣回收率試驗結果

本研究應用劉昌孝院士[11]提出的“質(zhì)量標志物”（Q-marker）的理論，通過UPLC-ESI-HRMS結合對照品指認了12種成分；再通過化合物與抗腫圖4 POEa和混合物對A549細胞凋亡率的影響
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