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葛根素對(duì)臂叢根性撕脫傷大鼠脊髓前角GFAP、iNOS、CGRP蛋白表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-11-15 11:43
   目的:探討中藥葛根提取物葛根素對(duì)大鼠臂叢神經(jīng)根性撕脫傷(brachial plexus root avulsion injury,BPRAI)脊髓前角GFAP、iNOS、CGRP蛋白表達(dá)及血清iNOS表達(dá)的影響。方法:50只成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、葛根素低、中、高劑量治療組,每組10只。采用椎管內(nèi)撕脫大鼠右側(cè)脊髓C_5-C_7脊神經(jīng)前根、同時(shí)剪斷C_5-C_7后根的方法進(jìn)行BPRAI造模。術(shù)后低、中、高劑量治療組進(jìn)行葛根素腹腔注射給藥,劑量分別為50 mg·kg~(-1)·d~(-1)、100 mg·kg~(-1)·d~(-1)、200 mg·kg~(-1)·d~(-1),正常組、模型組注射等體積生理鹽水,連續(xù)給藥4w。尼氏染色法檢測(cè)大鼠脊髓前角α-運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元(α-motorneurons,α-MNs)的存活率,免疫熒光化學(xué)方法檢測(cè)脊髓前角GFAP、p-Akt1/2/3蛋白表達(dá),比色法測(cè)定血清iNOS和總NOS的含量,免疫印跡方法檢測(cè)損傷側(cè)脊髓GFAP、iNOS、CGRP的蛋白表達(dá)。結(jié)果:1.尼氏染色結(jié)果顯示:與正常組相比,模型組損傷側(cè)脊髓前角α-MNs存活率顯著降低(P0.01);與模型組比較,中、高劑量的葛根素治療可顯著提高α-MNs的存活率(P0.01)。2.免疫熒光化學(xué)結(jié)果顯示:與正常組相比,模型組損傷側(cè)脊髓前角GFAP蛋白表達(dá)升高(P0.01);與模型組相比,中、高劑量葛根素治療組GFAP蛋白表達(dá)降低(P0.01);與低劑量組相比,中、高劑量葛根素治療組GFAP蛋白表達(dá)降低(P0.05或P0.01)。與正常組相比,模型組損傷側(cè)脊髓前角膠質(zhì)細(xì)胞大量表達(dá)p-Akt1/2/3(P0.01);與模型組相比,低、中、高劑量葛根素均可抑制膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)p-Akt1/2/3(P0.05或P0.01);與低劑量組相比,高劑量葛根素均可抑制膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)p-Akt1/2/3(P0.05)。3.血清生化檢測(cè)結(jié)果顯示:與模型組相比,低、中劑量組的iNOS、總NOS表達(dá)升高(P0.05或P0.01);與低劑量組相比,高劑量組的總NOS表達(dá)下降(P0.05)。4.免疫印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與模型組相比,高劑量組損傷側(cè)脊髓iNOS蛋白表達(dá)下降(P0.05);與低劑量組相比,高劑量組損傷側(cè)脊髓iNOS蛋白表達(dá)下降(P0.05)。與正常組相比,模型組GFAP蛋白表達(dá)增加(P0.05);與模型組相比,低、中、高劑量組GFAP蛋白表達(dá)均下降(P0.05)。與正常組相比,模型組CGRP蛋白表達(dá)下降(P0.05);與模型組相比,高劑量組CGRP蛋白表達(dá)上升(P0.05)。結(jié)論:葛根素可提高臂叢根性撕脫后脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的存活率,其機(jī)制可能與其抑制脊髓前角星形膠質(zhì)細(xì)胞活化以及iNOS、GFAP蛋白表達(dá),促進(jìn)CGRP蛋白表達(dá)有關(guān),并且可能有p-Akt信號(hào)通路的參與。此外,其治療作用呈現(xiàn)劑量依賴性,中、高劑量療效最優(yōu)。
【學(xué)位單位】:湖北民族大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:R285.5
【部分圖文】:

形態(tài)圖,肢體,形態(tài),過(guò)程


俯臥位置于小動(dòng)物簡(jiǎn)易固定臺(tái),碘伏消毒(所用器械均已高壓滅菌)。(1)手術(shù)刀于后頸部縱行切開皮膚2.0cm,分離筋膜、肌肉,暴露脊柱椎板,以胸2棘突作為骨性標(biāo)志確定脊柱節(jié)段(見圖2-1A)。使用椎板咬骨鉗進(jìn)行右側(cè)半椎板切除術(shù),打開C4-T1節(jié)段脊髓以暴露C5-C7脊神經(jīng),解剖顯微鏡下打開硬脊膜,使用眼科剪剪斷右側(cè)C5-C7的后根,彎鉤撕脫相應(yīng)的前根(見圖2-1B),過(guò)程中可觀察到腦脊液從撕脫處流出,并切除撕脫遠(yuǎn)端2mm以防止神經(jīng)再生(見圖2-1C)。使用2.5%慶大霉素沖洗手術(shù)部位,并紗布蘸干,蠶絲線逐層縫合頸后肌群、皮膚

葛根素對(duì)臂叢根性撕脫傷大鼠脊髓前角GFAP、iNOS、CGRP蛋白表達(dá)的影響


Terzis梳理實(shí)驗(yàn)圖示

脊髓前角,尼氏染色,時(shí)損,統(tǒng)計(jì)學(xué)意義


脊髓前角 -MNs 大量減少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與模型組相比,葛根素中、高劑量組損傷側(cè)脊髓前角 -MNs 數(shù)量顯著增加,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(見圖 2-3)。
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本文編號(hào):2884719

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