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腸復(fù)方對腸癌腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞及趨化因子2、白介素10表達的影響

發(fā)布時間:2020-11-15 05:05
   目的研究腸復(fù)方對裸鼠腸癌原位移植瘤不同部位腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumor-associated macrophages,TAM)及相關(guān)因子的影響。方法復(fù)制裸鼠腸癌原位移植瘤模型,將模型復(fù)制成功的28只裸鼠隨機分為腸復(fù)方高(72 g·kg~(-1))、中(36 g·kg~(-1))、低(18 g·kg~(-1))劑量組和蒸餾水組,每組7只。模型復(fù)制成功次日為第1天,于第14天開始給予相應(yīng)藥物干預(yù),共干預(yù)3周。干預(yù)結(jié)束后處死裸鼠,剝離腫瘤標(biāo)本,稱質(zhì)量計算抑瘤率;采用HE染色觀察各組腸癌腫塊不同部位標(biāo)本細(xì)胞學(xué)形態(tài);流式細(xì)胞學(xué)法檢測各組標(biāo)本M1型、M2型TAM含量;Western Blot及RT-PCR法檢測各組標(biāo)本中趨化因子2(C-C motif ligand 2,CCL2)及白介素10(Interleukin 10,IL~(-1)0)的蛋白及mRNA表達水平。結(jié)果與蒸餾水組比較,腸復(fù)方藥物組腫瘤質(zhì)量明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),腸復(fù)方高、中、低劑量組抑瘤率分別為36.01%、20.01%、18.00%。無藥物干預(yù)的蒸餾水組中,M1型、M2型腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAM)含量分布趨勢一致:癌中心癌浸潤前緣癌旁組織,與癌旁組織比,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。與蒸餾水組相應(yīng)部位比,腸復(fù)方高、中、低劑量組癌浸潤前緣及癌中心M1型TAM含量均下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01,P0.05);腸復(fù)方高、中劑量組M2型TAM含量明顯下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),腸復(fù)方低劑量組M2型TAM雖有下降趨勢,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。無藥物干預(yù)的蒸餾水組中:CCL2、IL~(-1)0蛋白及mRNA表達一致:癌中心癌浸潤前緣癌旁組織,與癌旁組織比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。與蒸餾水組相應(yīng)部位比較,腸復(fù)方各組癌中心CCL2、IL~(-1)0蛋白及mRNA表達均明顯下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);腸復(fù)方各組癌浸潤前緣CCL2、IL~(-1)0蛋白表達均明顯下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);腸復(fù)方各組癌浸潤前緣CCL2 mRNA(P0.01)、IL~(-1)0 mRNA(P0.05,P0.01)表達均有所下降。結(jié)論癌組織(癌中心、癌浸潤前緣)中M1、M2型TAM含量及CCL2、IL~(-1)0表達均高于癌旁組織,癌中心尤甚。腸復(fù)方可降低TAM的含量,抑制裸鼠腸癌原位移植瘤中CCL2、IL~(-1)0蛋白及mRNA的表達,可能為其抑瘤作用的機制之一。
【部分圖文】:

均勻分布,腸癌,部位,腫瘤細(xì)胞


見圖1。HE染色結(jié)果顯示:蒸餾水組中癌旁組織可見排列整齊的腸壁絨毛組織及均勻分布的杯狀細(xì)胞,未見明顯異形細(xì)胞,染色較淺;與癌旁組織相比,癌中心腫瘤細(xì)胞豐富,瘤細(xì)胞核漿比例大,染色深,核分裂象多見;癌浸潤前緣組織腫瘤細(xì)胞較豐富,瘤細(xì)胞核漿比例較大,較淺,核分裂象較多。與蒸餾水組相比,各藥物干預(yù)組的癌旁組織細(xì)胞學(xué)形態(tài)無明顯差異;腸復(fù)方高、中劑量組的癌中心腫瘤細(xì)胞較少,瘤細(xì)胞核漿比例較小,可見部分結(jié)締組織及空泡狀組織,細(xì)胞核染色較淺;腸復(fù)方高、中劑量組的癌浸潤前緣組織中可見散在腫瘤細(xì)胞,核漿比例較小,核分裂較少,染色淺,見空泡狀結(jié)構(gòu)及結(jié)締組織。2.4 各組原位移植瘤裸鼠瘤體各部位M1、M2型TAM含量比較

電泳圖,蛋白,印跡,原位


應(yīng)用蛋白印跡法檢測各組CCL2、IL-10蛋白表達情況。電泳圖(圖2)顯示,蒸餾水組中,各部位CCL2、IL-10蛋白表達為:癌中心>癌浸潤前緣>癌旁組織。癌旁組織中,腸復(fù)方各組與蒸餾水組CCL2、IL-10的表達大致相同;各組癌中心及癌浸潤前緣CCL2及IL-10蛋白表達含量為:高劑量組<中劑量組<低劑量組<蒸餾水組。各組各部位條帶灰度值統(tǒng)計結(jié)果分析(圖3)顯示,蒸餾水組中,與癌旁組織比較,癌浸潤前緣及癌中心中CCL2、IL-10蛋白含量均明顯升高(P<0.01)。癌旁組織中,各藥物組與蒸餾水組比較CCL2、IL-10蛋白表達趨勢同電泳圖,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);癌浸潤前緣及癌中心中,與蒸餾水組比較,腸復(fù)方高、中、低劑量組CCL2、IL-10蛋白表達含量明顯降低(P<0.01)。圖3 各組原位移植瘤不同部位CCL2、IL-10 Western Blot灰度值比較結(jié)果(±s,n=7)

原位,部位,印跡,灰度值


各組原位移植瘤不同部位CCL2、IL-10 Western Blot灰度值比較結(jié)果(±s,n=7)
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本文編號:2884375

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