目的:檢測丹皮酚對于大鼠心肌缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)的保護作用并探究其作用機制。方法:使用Sprague Dawley (SD)大鼠建立心肌缺血再灌注損傷模型。Western blot檢測大鼠心肌組織中沉默信息調(diào)控因子1(sirtuin1,SIRT1)表達水平。2',7'-二氯熒光黃雙乙酸鹽(DCFDA)試劑盒檢測大鼠心肌組織中活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量。ELISA法檢測大鼠心肌組織氧化應(yīng)激標志物丙二醛(malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)表達水平及大鼠血漿中心肌損傷標志物乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)含量。超聲心動系統(tǒng)檢測大鼠心臟功能和心室重構(gòu)情況。結(jié)果:丹皮酚顯著減少了大鼠心臟組織中活性氧的含量,下調(diào)了MDA、LDH和CK的表達,并上調(diào)了SOD的表達水平。此外,超聲心動圖的結(jié)果說明丹皮酚還具有提高大鼠心臟功能和逆轉(zhuǎn)大鼠心室重構(gòu)的作用。丹皮酚的預(yù)處理顯著增強了大鼠心肌組織中SIRT1的表達水平。進一步的研究表明,下調(diào)SIRT1逆轉(zhuǎn)了上述所有丹皮酚的作用。結(jié)論:丹皮酚通過上調(diào)SIRT1的表達,減輕了缺血再灌注導(dǎo)致的大鼠心肌組織氧化應(yīng)激和心肌損傷,并因此改善了心臟功能和心室重構(gòu)情況。
【部分圖文】：

通過western blot，首先檢測了大鼠心臟組織中SIRT1的表達情況。我們發(fā)現(xiàn)I/R損傷導(dǎo)致了SIRT1表達的顯著下調(diào)，丹皮酚則顯著增強了SIRT1的表達，SIRT1敲低組中SIRT1表達水平確實顯著降低了(圖1)。2.2 丹皮酚減輕了大鼠心肌氧化應(yīng)激和心肌損傷:

我們初步探究了丹皮酚對受到缺血再灌注損傷的SD大鼠心臟的作用。DCFDA試劑盒的檢測結(jié)果顯示，與假手術(shù)組相比，I/R組大鼠心肌組織中ROS水平明顯增8.8mm。80.4mm(+69.2mm,96.2mm)〗高，丹皮酚則下調(diào)了ROS的含量(圖1A)。通過ELISA，我們進一步檢測了大鼠心肌組織中氧化應(yīng)激標志物和心肌損傷標志物含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在I/R處理后，MDA表達水平顯著增高，SOD則顯著減少，丹皮酚的預(yù)處理逆轉(zhuǎn)了I/R的作用(圖1B,C)。此外，心肌損傷標志物LDH和CK也因I/R處理而顯著增多，并同樣可以被丹皮酚預(yù)處理逆轉(zhuǎn)(圖1D,E)。此外，與丹皮酚組相比，SIRT1組大鼠心肌組織中氧化應(yīng)激反應(yīng)更強、心臟受損更嚴重(圖1A-E)。我們的發(fā)現(xiàn)提示丹皮酚顯著抑制了缺血再灌注后發(fā)生的氧化應(yīng)激和心肌損傷，且至少在一定程度上是通過SIRT1發(fā)揮作用的。2.3丹皮酚改善了大鼠心臟重塑、提高了心臟功能:

我們通過超聲心動圖進一步檢測了丹皮酚對于大鼠心臟功能的影響。我們觀察到與I/R組相比，丹皮酚組中大鼠心臟左室縮短分數(shù)(FS)、左室射血分數(shù)(EF)和左室收縮壓(LVSP)顯著增高(圖3A-C)，左室舒張末期壓(LVEDP)則顯著降低(圖3D)。在敲低SIRT1后，與丹皮酚組相比，雖然FS無顯著性差異，但EF和LVSP顯著降低，LVEDP顯著升高(圖3A-D)。結(jié)合前文的實驗結(jié)果，我們認為丹皮酚至少在一定程度上通過上調(diào)SIRT1增強了大鼠心肌缺血再灌注后的心臟功能，顯著改善了心室重構(gòu)情況。3討論

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