目的:檢測丹皮酚對于大鼠心肌缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)的保護作用并探究其作用機制。方法:使用Sprague Dawley (SD)大鼠建立心肌缺血再灌注損傷模型。Western blot檢測大鼠心肌組織中沉默信息調控因子1(sirtuin1,SIRT1)表達水平。2',7'-二氯熒光黃雙乙酸鹽(DCFDA)試劑盒檢測大鼠心肌組織中活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量。ELISA法檢測大鼠心肌組織氧化應激標志物丙二醛(malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)表達水平及大鼠血漿中心肌損傷標志物乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)含量。超聲心動系統檢測大鼠心臟功能和心室重構情況。結果:丹皮酚顯著減少了大鼠心臟組織中活性氧的含量,下調了MDA、LDH和CK的表達,并上調了SOD的表達水平。此外,超聲心動圖的結果說明丹皮酚還具有提高大鼠心臟功能和逆轉大鼠心室重構的作用。丹皮酚的預處理顯著增強了大鼠心肌組織中SIRT1的表達水平。進一步的研究表明,下調SIRT1逆轉了上述所有丹皮酚的作用。結論:丹皮酚通過上調SIRT1的表達,減輕了缺血再灌注導致的大鼠心肌組織氧化應激和心肌損傷,并因此改善了心臟功能和心室重構情況。
【部分圖文】：

通過western blot，首先檢測了大鼠心臟組織中SIRT1的表達情況。我們發(fā)現I/R損傷導致了SIRT1表達的顯著下調，丹皮酚則顯著增強了SIRT1的表達，SIRT1敲低組中SIRT1表達水平確實顯著降低了(圖1)。2.2 丹皮酚減輕了大鼠心肌氧化應激和心肌損傷:

我們初步探究了丹皮酚對受到缺血再灌注損傷的SD大鼠心臟的作用。DCFDA試劑盒的檢測結果顯示，與假手術組相比，I/R組大鼠心肌組織中ROS水平明顯增8.8mm。80.4mm(+69.2mm,96.2mm)〗高，丹皮酚則下調了ROS的含量(圖1A)。通過ELISA，我們進一步檢測了大鼠心肌組織中氧化應激標志物和心肌損傷標志物含量，結果發(fā)現，在I/R處理后，MDA表達水平顯著增高，SOD則顯著減少，丹皮酚的預處理逆轉了I/R的作用(圖1B,C)。此外，心肌損傷標志物LDH和CK也因I/R處理而顯著增多，并同樣可以被丹皮酚預處理逆轉(圖1D,E)。此外，與丹皮酚組相比，SIRT1組大鼠心肌組織中氧化應激反應更強、心臟受損更嚴重(圖1A-E)。我們的發(fā)現提示丹皮酚顯著抑制了缺血再灌注后發(fā)生的氧化應激和心肌損傷，且至少在一定程度上是通過SIRT1發(fā)揮作用的。2.3丹皮酚改善了大鼠心臟重塑、提高了心臟功能:

我們通過超聲心動圖進一步檢測了丹皮酚對于大鼠心臟功能的影響。我們觀察到與I/R組相比，丹皮酚組中大鼠心臟左室縮短分數(FS)、左室射血分數(EF)和左室收縮壓(LVSP)顯著增高(圖3A-C)，左室舒張末期壓(LVEDP)則顯著降低(圖3D)。在敲低SIRT1后，與丹皮酚組相比，雖然FS無顯著性差異，但EF和LVSP顯著降低，LVEDP顯著升高(圖3A-D)。結合前文的實驗結果，我們認為丹皮酚至少在一定程度上通過上調SIRT1增強了大鼠心肌缺血再灌注后的心臟功能，顯著改善了心室重構情況。3討論

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