香菇(Lentinus edodes)是食藥兩用真菌,具有抗菌抗腫瘤增強免疫活性等功能,且含多種氨基酸、維生素、糖類及礦物質(zhì),具有藥用及滋補養(yǎng)生作用,是一種值得開發(fā)利用的保健食品和功能性食品。本研究以香菇子實體為研究對象,首先基于響應面設計對傳統(tǒng)熱水浸提法進行工藝優(yōu)化,得到了熱水浸提香菇多糖的最佳工藝條件。通過熱水浸提法、超聲輔助提取法、酶提輔助法、微波輔助提取法4種方法提取香菇多糖,并對其糖含量、蛋白含量、單糖組成及其結(jié)構(gòu)特征進行對比分析,得到香菇多糖的最佳提取方法為微波輔助提取法。在單因素實驗基礎上,運用正交的方法比較了H_2O_2、殼聚糖、活性炭脫色后的多糖保留率和脫色率,鹽酸法、三氯乙酸法、Sevage法脫蛋白后的多糖保留率和蛋白脫除率。綜合考慮,活性炭法為所研究方法中最優(yōu)脫色方法,鹽酸法為最優(yōu)脫蛋白方法。將最優(yōu)純化方法純化后的多糖進行酒精分級,對各組分進行結(jié)構(gòu)分析和活性鑒定,選出最優(yōu)活性部位。對香菇醇提物提取進行響應面工藝優(yōu)化,比較醇提物不同極性部位的抗氧化活性。本研究主要結(jié)論如下:熱水浸提法提取香菇多糖最佳工藝條件:料液比1:41.39(g/mL),時間2.60 h,溫度92.86℃,實際提取率為4.91%,模型預測值5.03%,誤差為2.38%。對香菇多糖糖含量、蛋白含量、單糖組成及其結(jié)構(gòu)特征進行對比分析,微波輔助提取法的粗多糖提取率及糖含量最高,分別為9.48%、43.17%。熱水浸提法粗多糖提取率及糖含量僅為4.76%、18.13%。較熱水浸提法而言,糖含量顯著提高,且微波輔助法所提多糖有較強的抗氧化活性。綜合考慮,微波輔助提取法為香菇多糖理想提取方法�；钚蕴棵撋蕿�70.24%,多糖保留率為73.15%,與未脫色的水提粗多糖進行對比,發(fā)現(xiàn)活性炭法有較高的脫色率和多糖保留率,綜合考慮,活性炭法為所研究方法中最優(yōu)脫色方法。鹽酸法蛋白脫除率為70.61%,多糖保留率為50.39%,綜合評分60.50。三氯乙酸法蛋白脫除率為34.92%,多糖保留率為63.69%,綜合評分49.31;Sevage法蛋白脫除率為56.89%,多糖保留率為57.71%,綜合評分57.30;鹽酸法具有較高的蛋白脫除率和多糖保留率。相比粗多糖,鹽酸法脫蛋白后多糖其DPPH自由基清除力和羥自由基清除力顯著增強,故選擇鹽酸法脫蛋白。發(fā)現(xiàn)抗氧化活性與糖含量呈正相關,糖含量越高,活性越強。多糖含量LEP_(60)(72.33%)LEP_(80)(40.60%)LEP_(30)(38.51%)。DPPH自由基清除能力順序為:LEP_(60)LEP_(80)LEP_(30),羥自由基清除能力順序為LEP_(30)LEP_(80)LEP_(60),總還原力順序為:LEP_(60)LEP_(30)LEP_(80)。綜合考慮,LEP_(60)為香菇多糖中抗氧化活性較強的部分,值得進一步研究開發(fā)。香菇醇提物最佳提取工藝條件:料液比1:9(g/mL),時間2.23 h,溫度40℃,酒精濃度51.50%。提取得率實際值為16.79%,模型預測值為17.54%,誤差為4.27%。表明模型擬合度較好,能有效優(yōu)化香菇多糖的提取條件。經(jīng)測定發(fā)現(xiàn)4種不同極性醇提物均具有較高的抗氧化活性,非常接近于抗壞血酸和香菇多糖的活性,且醇提物提取率為16.79%,明顯高于香菇多糖提取得率,值得進一步開發(fā)利用。
【學位單位】：聊城大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5;R284.2
【部分圖文】：

20.22%、18.13%。微波輔助提取法的多糖提取率、總糖含量及多糖含量最高，分別為 9.48%、44.79、43.17%。而酶提輔助法的多糖提取率為 7.43%，雖有所提高，但總糖含量及多糖含量與普通水提法相比有所降低，分別為 15.37%、13.28%，較普通水提沒有明顯的提取優(yōu)勢。表 1 M-LEP、H-LEP、E-LEP、U-LEP 的得率及糖含量比較Table 1 Yield and sugar content of M-LEP, H-LEP, E-LEP and U-LEPM-LEP H-LEP E-LEP U-LEP提取得率（%） 9.48 4.76 7.43 9.54總糖含量（%） 44.79 20.22 15.37 25.76還原糖含量（%） 1.62 2.09 2.09 1.86多糖含量（%） 43.17 18.13 13.28 23.9蛋白含量（%） 3.31 5.90 8.48 7.97

17圖 3 11 種單糖標準品及 3 種樣品的 HPAEC-PAD 色譜圖(1-巖藻糖, 2-鼠李糖, 3-阿拉伯糖, 4-氨基葡萄糖, 5-半乳糖, 6-葡萄糖, 7-木糖, 8-甘露糖, 9-果糖, 10-半乳糖, 11-葡萄糖醛酸)Fig.3 The spectra of HPAEC-PAD of 11 standard monosaccharides and 3 samplesPeaks: (1) fucose, (2) rhamnose, (3) arabinose, (4) glucosamine, (5) galactose, (6) glucose, (7) xylose,(8) mannose, (9) fructose, (10) GalA and (11) gluA.

19圖 4 四種提取方式所得香菇多糖抗氧化活性Fig.4 The antioxidant properties of L. edodes polysaccharide in four differmethods
【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 孫亞杰;徐靈;;超聲高溫熱水香菇多糖提取工藝優(yōu)化[J];安徽農(nóng)業(yè)科學;2015年36期

2 丁園;;枸杞多糖降血糖作用的體外細胞實驗研究[J];海峽藥學;2015年10期

3 李莉;張賽;何強;胡學斌;;響應面法在試驗設計與優(yōu)化中的應用[J];實驗室研究與探索;2015年08期

4 侯愛萍;張樹梅;;香菇多糖抗菌抗病毒普適性研究[J];藥學研究;2015年04期

5 李曉旭;王利卿;陸若欣;張洋;劉志遠;劉曉慶;;胰蛋白酶水解膠原蛋白[J];遼寧化工;2015年03期

6 龔受基;雷鵬;白法睿;段小群;杜澤鄉(xiāng);;復方蓮麥多糖降血糖作用及其機制研究[J];中成藥;2015年02期

7 萬閱;齊計英;曾紅;韓陽;韓靜;;響應面法優(yōu)化香菇多糖的超聲輔助提取工藝[J];生物技術通報;2015年01期

8 劉建濤;;香菇硒多糖協(xié)同化療對胃癌細胞分化、凋亡的影響[J];工企醫(yī)刊;2014年04期

9 王萌;童軍茂;魏長慶;楊麗;王軍;劉文玉;;響應面法優(yōu)化棉籽殼木聚糖酶解液活性炭脫色工藝[J];食品工業(yè);2014年06期

10 王春景;胡小梅;張鼎;胡愛武;;雞眼草抗氧化活性部位的篩選及其黃酮和總酚含量[J];中藥材;2014年05期

相關碩士學位論文 前3條

1 何發(fā)梅;響應面分析法優(yōu)化提取葫蘆巴的有效成分[D];華中科技大學;2014年

2 柳迎華;香菇多糖的輻射防護作用及其機制研究[D];青島大學;2012年

3 曾智平;高純度香菇多糖的分離提取及其分級研究[D];西安建筑科技大學;2007年

本文編號：2863202