目的 探討黑參、黑蒜及其混合物提取物對人肝癌HepG-2細(xì)胞的凋亡作用及其機(jī)制。方法 培養(yǎng)肝癌HepG-2細(xì)胞48h,實(shí)驗(yàn)分為對照組、黑參組、黑蒜組和黑參黑蒜混合組,各因素作用48h后用MTT方法篩選黑參、黑蒜及混合物作用于肝癌細(xì)胞的最佳濃度;用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化;用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的凋亡率以及細(xì)胞周期的變化;用Western Blot方法檢測細(xì)胞內(nèi)凋亡相關(guān)蛋白 Caspase-3、Bcl-2、Bax 的表達(dá)情況。結(jié)果 1.MTT檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)黑參濃度7.5～15g/L時(shí),細(xì)胞抑制率80%左右,黑蒜濃度為10～15g/L時(shí),細(xì)胞抑制率80%以上,黑參黑蒜混合濃度為30g/L(黑參:黑蒜=1:2)時(shí),細(xì)胞抑制率達(dá)到85.26%,與對照組比較,各組細(xì)胞生長抑制率有顯著差異(P0.05);2.細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)黑參、黑蒜及其混合物干預(yù)細(xì)胞腫脹變圓、邊界不清,細(xì)胞漂浮較多;3.流式細(xì)胞儀凋亡率檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)黑參、黑蒜及其混合物作用于肝癌細(xì)胞可以增加細(xì)胞的早期和中晚期凋亡率(P0.05);4.細(xì)胞周期檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)黑參干預(yù)后阻滯細(xì)胞在G1期,黑蒜及混合物作用發(fā)現(xiàn)細(xì)胞G1期和G2期阻滯。5.Western Blot檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),黑參、黑蒜及其混合物干預(yù)HepG-2細(xì)胞可以使細(xì)胞的Caspase-3蛋白過表達(dá),與對照組比較各組蛋白表達(dá)有顯著差異(P0.05),此外,與對照組比較,黑參、黑蒜高劑量組及混合作用組可以提高Bax/Bcl-2,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其他組無顯著性差異(P0.05)。結(jié)論 黑參、黑蒜單獨(dú)作用組及混合組肝癌HepG-2細(xì)胞增殖受到顯著抑制;單獨(dú)作用的細(xì)胞早期凋亡率增加,混合作用細(xì)胞早期及晚期凋亡率均有增加;單獨(dú)及混合作用細(xì)胞主要阻滯在G1期,細(xì)胞Caspase-3蛋白、Bax/Bcl-2表達(dá)上調(diào),凋亡作用增加。
【學(xué)位單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

注：與對照組比較，＊Ｐ＜０．０５。??４．２黑參、黑蒜其及混合物干預(yù)肝癌ＨｅｐＧ－２細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察??２００倍倒置顯微鏡進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，由圖３可知，正常人肝癌細(xì)胞ＨｅｐＧ－２??為梭形或不規(guī)則三角形，若鏡下出現(xiàn)細(xì)胞變圓、鏡下觀察顏色變深，邊緣皺縮者??為狀態(tài)不好細(xì)胞或死細(xì)胞。結(jié)果可以看出，對照組人肝癌細(xì)胞ＨｅｐＧ－２經(jīng)過４８ｈ??培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)有較少的細(xì)胞漂浮或死亡，細(xì)胞生長狀態(tài)良好；黑參、黑蒜提取物對??ＨｅｐＧ－２細(xì)胞進(jìn)行千預(yù)４８ｈ后，發(fā)現(xiàn)黑參組細(xì)胞變圓皺縮，細(xì)胞有的漂浮或死亡，??生長狀態(tài)不好，黑蒜組細(xì)胞也有漂浮，較黑參組少，黑參、黑蒜混合組有的細(xì)胞??壁出現(xiàn)破裂，細(xì)胞顏色較深，皺縮呈圓形，細(xì)胞生長狀態(tài)不好。當(dāng)黑參濃度為??７．５ｇ／Ｌ、１０ｇ／Ｌ時(shí)，黑蒜濃度為１０ｇ／Ｌ、１２＿５ｇ／Ｌ時(shí)，黑參、黑蒜混合作用濃度Ｍ：??３０ｇ／Ｌ?（黑參：黑蒜＝１：?２）

注:人:

由表７結(jié)果可知，黑蒜千預(yù)肝癌細(xì)胞ＨｅｐＧ－２，主要增加細(xì)胞的早期凋亡率??及中晚期凋亡率，主要增加的是早期凋亡率（Ｐ＜〇．〇５），細(xì)胞總凋亡率９０％以??上。由圖５結(jié)果可知黑蒜干預(yù)ＨｅｐＧ－２肝癌細(xì)胞，與對照組比較，蒜液１０?ｇ／Ｌ干??預(yù)肝癌細(xì)胞早期凋亡率由６．３％變?yōu)椋罚梗?#176;／。，中晚期凋亡率由０．５％變?yōu)椋保担梗ィ??主要增加了細(xì)胞的早期凋亡率，參液１２．５?ｇ／Ｌ時(shí)，早期凋亡率變?yōu)椋福罚福�，中�??期凋亡率為２．３％，與黑蒜低劑量組比較，黑蒜高劑量組肝癌細(xì)胞的早期凋亡率??明顯增加，中晚期凋亡率略有下降。與黑參組比較，黑蒜組干預(yù)細(xì)胞的早期凋亡??率不如黑參組。??表７黑蒜對人肝癌細(xì)胞ＨｅｐＧ－２的凋亡率影響（；±ｓ，ｎ＝３）??組別（ｇ／Ｌ）?早期凋亡率（％）?晚期凋亡率（％）?總凋亡率（％）??對照組?０?３．３３±０．８０?０．３３±０．１５?３．６３±０．７６??黑蒜組?１０?７９．２０±０．６０＊?１５．５±０．４０＊?９４．７０±１．００＊??黑蒜組丨?２．５?８８．１５±０．３５，?２．２０±０．１０，?９０．３５±０．４１＇??注：與對照組比較
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 金頭峰;全貞玉;;2000年與2010年延吉市居民惡性腫瘤死因比較分析[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2015年19期

本文編號(hào)：2862809