【摘要】：目的:明確健脾軟肝方對肝纖維化大鼠α-SMA及其mRNA表達(dá)的影響,初步探討健脾軟肝方防治肝纖維化的作用機(jī)制,為肝纖維化的中醫(yī)臨床治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:選取Wistar雄性大鼠72只,隨機(jī)分為正常組、模型組、扶正化瘀膠囊組、健脾軟肝方高、中、低劑量組。模型組利用CCl4對大鼠進(jìn)行腹腔注射,按0.2 m L/100 g腹腔注射30%CCl4與70%橄欖油混合溶液,正常組注射等量生理鹽水,2次/周,4周后復(fù)制大鼠肝纖維化動物模型,該實(shí)驗(yàn)采用免疫組化ABC法檢測肝纖維化大鼠α-SMA蛋白的表達(dá)水平,采用Real-time PCR法檢測肝纖維化大鼠α-SMA mRNA的表達(dá)水平,采用H-E染色和Mallory染色觀察大鼠肝纖維化的病變程度。結(jié)果:模型組α-SMA蛋白表達(dá)顯著上升(P0.05);健脾軟肝方高、中、低劑量組組與模型組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其中高、中、低劑量組之間α-SMA蛋白陽性表達(dá)逐漸升高,可以呈一定的藥物依賴關(guān)系。模型組α-SMA mRNA表達(dá)顯著上升(P0.05);健脾軟肝方高、中、低劑量組組與模型組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且高、中、低劑量組之間α-SMA mRNA表達(dá)水平逐漸升高,呈一定的藥物依賴關(guān)系。結(jié)論:健脾軟肝方抗肝纖維化的作用機(jī)制可能與抑制大鼠肝臟內(nèi)α-SMA及其mRNA的表達(dá)有關(guān)。
【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 動物
        1.1.2 藥物
        1.1.3 試劑與儀器
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 動物的分組與模型制備
        1.2.2 動物給藥劑量及方法
        1.2.3 檢測指標(biāo)與方法
            1.2.3. 1 病理組織學(xué)檢查
            1.2.3. 2 肝纖維化分級
            1.2.3. 3 免疫組化ABC法檢測大鼠肝組織中α-SMA的蛋白表達(dá)
            1.2.3. 4 采用Real-time PCR法檢測c DNA樣本中α-SMA基因相對含量
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 大鼠大體形態(tài)和大鼠肝臟觀察
    2.2 大鼠肝臟病理組織學(xué)觀察
    2.3 肝纖維化的分級程度
    2.4 各組大鼠肝組織α-SMA蛋白的表達(dá)的觀察
    2.5 各組大鼠肝組織α-SMA mRNA的表達(dá)
3 討論

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