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基于DNA條形碼技術(shù)的重樓藥材疑似偽品基原鑒定

發(fā)布時間:2020-10-23 07:56
   目的:基于DNA條形碼技術(shù)鑒定重樓藥材疑似偽品的基原。方法:通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)對重樓的內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)2(ITS2)序列進(jìn)行擴(kuò)增;通過與GenBank數(shù)據(jù)庫進(jìn)行Blast比對,以及利用建樹法推斷重樓藥材疑似偽品的基原。結(jié)果:重樓藥材疑似偽品經(jīng)Blast比對,結(jié)果顯示為狹葉重樓(變種)和黑籽重樓(原變種),一致率均達(dá)到99%;通過與前期研究的重樓ITS2序列進(jìn)行NJ聚類分析,可以判定待鑒定樣品的基原與西藏延齡草較為接近;通過將重樓藥材疑似偽品與收集的吉林延齡草標(biāo)本、西藏延齡草標(biāo)本、寬瓣重樓標(biāo)本、華重樓標(biāo)本的ITS2序列進(jìn)行NJ聚類分析,推斷重樓藥材疑似偽品的基原為吉林延齡草。結(jié)論:確定重樓藥材疑似偽品為非2015年版《中華人民共和國藥典》收載物種,并推斷其基原為吉林延齡草,通過DNA條形碼技術(shù)為鑒別藥材正偽品開辟了一條新途徑。
【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 植物總DNA的提取
    1.3 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
    1.4 擴(kuò)增產(chǎn)物測序
    1.5 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果
    2.1 Genbank比對
    2.2 參考前期重樓樣品數(shù)據(jù)庫鑒定
    2.3 NJ樹聚類分析
3 討論與分析

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