發(fā)布時間：2020-10-19 21:24

　　 鐵皮石斛作為一種天然藥食同源的食品,具有優(yōu)良的保健作用,受到廣大人們的關(guān)注。國內(nèi)外有關(guān)鐵皮石斛的化學(xué)成分和功效作用的文獻、報道較多,但對鐵皮石斛的抑菌作用研究較少。本研究以云南的鐵皮石斛干品(鐵皮楓斗)為原料,研究了同時蒸餾萃取法和索氏提取法提取鐵皮石斛揮發(fā)性成分的工藝,對鐵皮石斛同時蒸餾萃取法提取的揮發(fā)性成分和索氏提取法提取的粗提物進行了GC-MS成分分析,并進行了抑菌試驗,旨在探討和分析鐵皮石斛揮發(fā)性成分的抑菌效果,為鐵皮石斛的開發(fā)利用提供科學(xué)的依據(jù)和技術(shù)支撐。主要研究結(jié)果如下:1.鐵皮石斛揮發(fā)性成分提取工藝研究選取同時蒸餾萃取法提取的鐵皮石斛揮發(fā)性成分,以索氏提取法提取的鐵皮石斛粗提物作為對照試驗。兩者均以水浴溫度、料液比、提取時間為條件,進行單因素及L_9(3~4)正交試驗。試驗結(jié)果表明,同時蒸餾萃取法提取鐵皮石斛揮發(fā)性成分優(yōu)化工藝條件為水浴溫度50℃,料液比1:25g/mL,提取時間3.5h,鐵皮石斛揮發(fā)性成分的提取率達到1.63%。各因素的影響順序為:提取時間料液比水浴溫度。索氏提取法提取鐵皮石斛粗提物的優(yōu)化工藝條件為水浴溫度45℃,料液比1:45 g/mL,提取時間4h,提取鐵皮石斛粗提物的提取率達到3.98%。各因素的影響順序為:提取時間水浴溫度料液比。2.鐵皮石斛揮發(fā)性成分的GC-MS分析對同時蒸餾萃取法提取鐵皮石斛揮發(fā)性成分和索氏提取法提取鐵皮石斛粗提物進行GC-MS成分分析與鑒定。試驗結(jié)果表明,在同時蒸餾萃取法提取的鐵皮石斛揮發(fā)性成分中共鑒定出51個化合物,其主要成分包括:植物甾醇(21.79%)、2,6-二叔丁基對甲酚(10.13%)、豆甾醇(8.57%)、天然維生素E(8.38%)、丁香酚(6.46%)、生育酚乙酸酯(5.26%)、菜油甾醇(4.89%)、反-2-己烯醛(2.98%)、芳樟醇(1.95%)、松油醇(1.92%)、苯酚(0.32%)。索氏提取法中鐵皮石斛粗提物鑒定出44個化合物。其主要成分為:鄰苯二甲酸二丁酯(53.01%)、植物甾醇(20.20%)、2,6-二叔丁基對甲酚(13.09%)、甘菊藍(2.41%)、丁香酚(1.21%)。分析了兩種提取方法得到的鐵皮石斛提取物的主要成分種類及其相對含量。3.鐵皮石斛揮發(fā)性成分的抑菌效果及抑菌成分分析選取革蘭氏陽性菌:金黃色葡萄球菌,革蘭氏陰性菌:大腸埃希氏菌、鼠傷寒沙門氏菌和阪崎腸桿菌四種致病菌作為本試驗的供試菌。采用濾紙片法,根據(jù)抑菌圈直徑大小分別得出兩種方法提取的鐵皮石斛揮發(fā)性成分及粗提物對四種菌的抑制效果。試驗結(jié)果表明,同時蒸餾萃取法提取的鐵皮石斛揮發(fā)性成分和索氏提取法提取的鐵皮石斛粗提物對四種供試菌的抑制作用大小順序均為:金黃色葡萄球菌?阪崎腸桿菌?大腸埃希氏菌?鼠傷寒沙門氏菌。采用倍比稀釋法測定兩種方法提取的鐵皮石斛揮發(fā)性成分及粗提物對供試菌的最低抑菌濃度,結(jié)果表明,兩種提取方法提取的鐵皮石斛揮發(fā)性成分及粗提物對大腸埃希氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、阪崎腸桿菌、金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度分別為10mg/mL、10mg/mL、5mg/mL、2.5 mg/mL。金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度最低。同時蒸餾萃取法中鐵皮石斛揮發(fā)性成分的抑菌作用強于索氏提取法中鐵皮石斛粗提物的抑菌作用。鐵皮石斛揮發(fā)性成分及粗提物均對革蘭氏陽性菌的抑制作用更強。由試驗結(jié)果可知,鐵皮石斛揮發(fā)性成分中的主要抑菌物質(zhì)有:植物甾醇類、丁香酚、2,6二叔丁基對甲酚(BHT)、松油醇、芳樟醇、反-2-己烯醛、苯酚等。
【學(xué)位單位】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R284.2;R285.5
【部分圖文】：

稱其質(zhì)量，并按照下列公式計算樣品提取率。每個試驗設(shè)三個平行。鐵皮石斛揮發(fā)性成分提取率（%）=[提取物質(zhì)量(g)/樣品質(zhì)量(g)]×100圖2-1 同時蒸餾萃取法裝置示意圖Figure 2-1 The picture of Simultaneous Distillation-Extraction device1.3.2.1同時蒸餾萃取法的單因素試驗設(shè)計（1）水浴溫度對鐵皮石斛揮發(fā)性成分提取率影響的研究 準(zhǔn)確稱取 5g 鐵皮石斛樣品，用蒸餾水浸泡樣品 3h 后, 加入同時蒸餾萃取法裝置中, 按料液比為 1:40 添加乙醚溶劑(g/mL),在水浴溫度 45℃、50℃、55℃、60℃、65℃的條件下，恒溫加熱回流提取 2h，提取結(jié)束后得到鐵皮石斛揮發(fā)性成分，計算其提取率。設(shè)三個平行取平均提取

圖 2-2 索氏提取器裝置示意圖 2-2 The picture of Soxhlet Extraction dev試驗設(shè)計斛粗提物提取率影響的研究 準(zhǔn)確，按料液比為 1:40 添加石油醚溶55℃的條件下，恒溫提取 2h，提取個平行取平均提取率得到鐵皮石斛提取率的影響。斛粗提物提取率影響的研究 準(zhǔn)確稱，按料液比 1:20、1:30、1:40、1:5條件下，恒溫提取 2h，提取結(jié)束后取平均提取率得到鐵皮石斛粗提物影響。石斛粗提物提取率影響的研究 準(zhǔn)

（Sterile water） I 10mg/mL 土霉素（10mg/m對照和陽性對照：無菌水、10mg/mL 土霉素對金黃色葡萄球菌的ative control and positive control: Result of bacteriostatic experimentconcentration of 10mg/mL oxytetracycline on Staphylococcus aureu法提取的鐵皮石斛提取物抑菌作用的定性試驗結(jié)果同時蒸餾萃取法提取的鐵皮石斛揮發(fā)性成分和索氏提取 40、20、10、5、2.5、1.25mg/mL 的濃度下對四種供試希氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、阪崎腸桿菌的抑菌圈直徑大小石斛提取物的抑菌作用強弱。
【參考文獻】

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本文編號：2847745