發(fā)布時間：2020-10-16 04:50

　　 目的本文研究了不同類型清熱中藥的抑菌作用特點(diǎn)的異同,進(jìn)一步獲得清熱中藥的分類的現(xiàn)代數(shù)據(jù),并開展清熱中藥作為抗生素增效劑和益生菌促生長因子的應(yīng)用開發(fā),旨在為清熱藥的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)參考。方法1以金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、嗜酸乳桿菌為實(shí)驗(yàn)菌株,采用比濁法測定不同類型清熱中藥的對3株細(xì)菌體外的增殖率大小。2采用比濁法測定不同類型清熱中藥對大腸桿桿菌與金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度(MIC)。分別繪制清熱解毒中藥與清熱燥濕中藥對金黃色葡萄球菌的生長曲線及分別建立了清熱解毒中藥與清熱燥濕中藥對金黃色葡萄球菌生長曲線的一級、二級生長模型。3采用棋盤法測定清熱復(fù)方與頭孢拉定、左氧氟沙星、阿莫西林、慶大霉素聯(lián)用對金黃色葡萄球菌的抑菌作用。利用細(xì)胞膜滲透性、糖代謝、磷代謝、AKP的含量測定、SDS-PAGE電泳等方法,來闡述清熱復(fù)方的抑菌機(jī)理。4以清熱中藥蒲公英作為促生長因子,采用正交法優(yōu)化嗜酸乳桿菌的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。結(jié)果1清熱燥濕中藥黃芩、黃連、黃柏抑制金黃色葡萄球菌的增殖,與對照組比較,有顯著性差異(P0.05)。清熱燥濕中藥黃連、黃柏、黃芩能抑制大腸桿菌的增殖,與對照組比較,具有顯著性差異(P0.05)。清熱解毒中藥穿心蓮、連翹、板藍(lán)根、菊花、魚腥草、敗醬草、金銀花對大腸桿菌無增殖作用,與對照組比較,無顯著性差異(P0.05)。清熱燥濕中藥黃連、黃芩、黃柏對嗜酸乳桿菌有明顯抑制作用。其中黃連、黃芩、黃柏與對照組比較,具有顯著性差異(P0.05)。清熱解毒中藥蒲公英、金銀花、穿心蓮、魚腥草、敗醬草、板藍(lán)根、連翹對嗜酸乳桿菌有明顯的增殖作用,與對照組比較,具有顯著性差異(P0.05)。2清熱燥濕中藥黃芩、黃連對金黃色葡萄球菌具有較強(qiáng)的抑菌作用(≤7.81mg/m L),清熱燥濕中藥黃柏與清熱解毒中藥金銀花、連翹、蒲公英、板藍(lán)根、穿心蓮、敗醬草對金黃色葡萄球菌具有中等抑菌作用(15.63~62.5 mg/m L)。清熱解毒中藥黃芩、黃連對大腸桿菌具有較強(qiáng)抑菌作用(≤7.81 mg/m L)。在Gompertz生長預(yù)測模型的基礎(chǔ)上,建立了在7.81~125 mg/m L條件下金黃色葡萄球菌的μm與質(zhì)量濃度的有效二級模型。3清熱復(fù)方分別與頭孢拉定、阿莫西林、慶大霉素和左氧氟沙星聯(lián)用對金黃色葡萄球菌的FIC為0.125、1.00、0.531和0.531。清熱解毒復(fù)方液作用于菌體6 h后,給藥組的電導(dǎo)率比對照組增加了4.88%(P0.05)。清熱復(fù)方提取液孵育0~8h,各實(shí)驗(yàn)節(jié)點(diǎn)的吸光度差異均小于0.47%(P0.05)。清熱解毒復(fù)方與菌液作用0~10 h時,培養(yǎng)液糖濃度與對照組的培養(yǎng)液中糖濃度隨作用時間一直降低。在0~12h時,試驗(yàn)組與對照組磷的濃度一直在降低。清熱復(fù)方液作用于菌體在0~6 h胞外可檢測的磷酸酶含量明顯增加,且顯著高于對照組。清熱復(fù)方提取液反應(yīng)16 h后,實(shí)驗(yàn)組的可溶性蛋白含量比對照組有明顯變化。95000Da處,與對照組相比清熱復(fù)方組明顯增加一條蛋白條帶;130000~95000Da之間,對照組比清熱復(fù)方組明顯消失了一條蛋白條帶。4采用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化嗜酸乳的增菌培養(yǎng)基,得出培養(yǎng)基優(yōu)化的最優(yōu)組合為:硫酸鎂0.58g/L,硫酸錳0.25g/L,酵浸母粉20g/L,磷酸氫二鉀2g/L,檸檬酸氫二銨2g/L,番茄汁150ml/L,乙酸鈉15g/L,葡萄糖2 g/L,蒲公英粉1.0g/L,p H6.4,加入蒸餾水1000 m L。結(jié)論1革蘭氏陽性菌比革蘭氏陰性菌對清熱中藥敏感度高。2清熱燥濕藥主要影響金黃色葡萄球菌的最大比生長速率,清熱解毒藥主要影響金黃色葡萄球菌的滯后期λ。3清熱復(fù)方與頭孢拉定、慶大霉素、左氧氟沙星、阿莫西林聯(lián)用可通過協(xié)同/相加作用而提高抗菌藥的抑菌效果。清熱解毒復(fù)方抑制金黃色葡萄球菌的生長作用機(jī)理主要是清熱解毒復(fù)方破壞金黃色葡萄球菌的細(xì)胞壁、干擾其正常蛋白質(zhì)表達(dá)。4采用正交設(shè)計實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了嗜酸乳桿菌的增菌培養(yǎng)基,得出增殖培養(yǎng)基的最優(yōu)組合。
【學(xué)位單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R285
【部分圖文】：

金黃色葡萄球菌濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線

大腸桿菌濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線

嗜酸乳桿菌濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線
【參考文獻(xiàn)】

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1 帥麗華;姜登釗;劉懷;汪紅;荀春華;周會祥;;黃連-左氧氟沙星聯(lián)合用藥對多重耐藥大腸埃希菌的體外抗菌活性研究[J];中國醫(yī)院藥學(xué)雜志;2017年05期

2 宋劍武;吳永繼;孫燕杰;劉增援;趙雨川;胡梅;夏娟;黃凱;司紅彬;;救必應(yīng)水提取物對產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的抑菌機(jī)理研究[J];中國畜牧獸醫(yī);2016年06期

3 李婷;楊舒然;陳敏;宋麗雅;何聰芬;;姜厚樸水提物對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌機(jī)理研究[J];現(xiàn)代食品科技;2016年02期

4 馮瀾;李紹民;代立娟;李春媚;李巖;武菲;于蓮;馬婷;馬淑霞;;馬齒莧多糖對潰瘍性結(jié)腸炎小鼠腸黏膜細(xì)胞因子及腸道菌群的影響[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2015年02期

5 賴章林;李柏林;歐杰;嚴(yán)維凌;;攪打奶油中金黃色葡萄球菌生長預(yù)測模型的建立[J];山東農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2015年03期

6 汪慧春;黃和;劉亞;蔣志紅;勵建榮;;面包蝦中金黃色葡萄球菌生長預(yù)測模型的建立[J];廣東農(nóng)業(yè)科學(xué);2014年22期

7 黃忠民;李媛媛;艾志錄;王娜;潘治利;謝新華;范會平;索標(biāo);;甜菜堿對金黃色葡萄球菌生長的影響及其抑制模型的建立[J];中國食品學(xué)報;2014年10期

8 劉爽;謝鯤鵬;鄒丹;周磊;謝明杰;;秦皮素對大腸埃希菌作用機(jī)制的初步研究[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2014年10期

9 鄭翠萍;權(quán)美平;康莉娜;馬婷婷;趙佩;田呈瑞;;茜草丙酮提取物抑菌活性及機(jī)制的研究[J];食品工業(yè)科技;2015年09期

10 姚小華;唐立;高菲;李衛(wèi)華;張國斌;劉銀輝;李華軍;李明;郭艷杰;袁杰力;盧行安;文姝;;山銀花對小鼠腸道菌群失衡的調(diào)節(jié)作用[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2014年08期

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1 王唯霖;中草藥提取物的抑菌機(jī)理及對大腸桿菌的耐藥性研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

2 徐君;黃芩—黃連藥對與腸道菌群的相互作用研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2014年

3 周磊;秦皮素對大腸桿菌的抑菌作用機(jī)制[D];遼寧師范大學(xué);2013年

4 馬馳;不同中藥對3種細(xì)菌耐藥質(zhì)粒的消除作用研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

5 王海濤;大豆異黃酮的抑菌活性及其機(jī)制的研究[D];遼寧師范大學(xué);2009年

本文編號：2842784