目的:建立大鼠變態(tài)反應(yīng)性接觸性皮炎(Allergic contact dermatitis,ACD)模型,探討零樓清利丸治療變態(tài)反應(yīng)性接觸性皮炎的作用機(jī)理及作用靶點(diǎn)。方法:1將40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為四組,每組各10只,設(shè)空白對(duì)照組(僅在背部脫毛兩處)、模型組(僅建立ACD模型)、治療組(采用芩樓清利丸灌胃),陽性對(duì)照組(采用鹽酸西替利嗪片灌胃)。在甲乙脫毛處各外涂0.1%的二硝基氯苯溶液(Dinitrochlorobenzene,DNCB)致敏建立ACD模型,第二次激發(fā)后以藥物灌胃治療。治療組將芩樓清利丸溶于純凈水中灌胃給藥,每天2次,陽性對(duì)照組將鹽酸西替利嗪片溶于純凈水中灌胃給藥,每天2次。2兩周后取材前評(píng)估皮損療效;取材后,通過HE染色觀察各組大鼠皮膚的病理變化;采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)檢測各大鼠血清中白介素-4(interleukin-4,IL-4)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及皮損組織中白細(xì)胞三烯B4(LeukotrienesB4,LTB4)水平;采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR法)檢測皮損中白細(xì)胞三烯受體1(Leukotrienes B4 Receptor 1,BLT1)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-14(Caspase-1 4)表達(dá)情況。結(jié)果:1大鼠治療組和陽性對(duì)照組皮損紅斑、水腫、丘疹、表皮剝脫、苔蘚化程度均明顯減輕,總有效率為90%,與模型組相比有顯著性差異;2 HE染色提示:模型組大鼠背部皮膚輕度角化過度,表皮層、真皮層內(nèi)有大量炎癥細(xì)胞浸潤;陽性對(duì)照組及治療組角質(zhì)層變薄,表皮層、真皮層內(nèi)輕度炎癥細(xì)胞浸潤,較模型組明顯減少;3LTB4、BLT1含量比較:模型組LTB4的表達(dá)水平較空白組顯著上升(P0.01),治療組和陽性對(duì)照組大鼠LTB4的表達(dá)水平較模型組大鼠的表達(dá)顯著下降,治療組P0.01,陽性對(duì)照組P0.05;模型組大鼠皮膚BLT1mRNA的表達(dá)水平較空白組顯著降低(P0.01),治療組和陽性對(duì)照組大鼠BLT1mRNA的表達(dá)水平較模型組大鼠的表達(dá)明顯上升,但治療組和陽性對(duì)照組與模型組之間差異均無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05);4 TNF-α、IL-4含量比較:ELISA結(jié)果提示各組大鼠血清中IL-4水平無明顯差異(P0.05);模型組TNF-α的表達(dá)水平較空白組顯著上升(P0.01),治療組和陽性對(duì)照組大鼠TNF-α的表達(dá)水平較模型組大鼠的表達(dá)顯著下降,其中陽性對(duì)照組P0.01,治療組P0.05,這兩組之間相比差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);5Caspase-14mRNA含量提示:模型組Caspase-14mRNA的表達(dá)水平較空白組顯著上升(P0.05),治療組和陽性對(duì)照組大鼠Caspase-14mRNA的表達(dá)水平較模型組大鼠的表達(dá)顯著下降,其中陽性對(duì)照組P0.01,治療組P0.05,這兩組之間差異相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1芩樓清利丸能夠降低皮損中LTB4的濃度,一定程度上干預(yù)了 LTB4-BLT1炎癥通路,對(duì)ACD炎癥具有抑制作用;2芩樓清利丸可以降低ACD大鼠血清中TNF-α的含量;3 Caspase-14是角質(zhì)形成細(xì)胞特有的成分,主要參與細(xì)胞終末分化,形成完整角質(zhì)層,對(duì)維護(hù)皮膚屏障的穩(wěn)態(tài)、增殖及分化起重要作用,皮膚受損后Caspase-14的表達(dá)增高。芩樓清利丸使治療組Caspase-14的表達(dá)水平較模型組大鼠的表達(dá)顯著下降,由此推測芩樓清利丸對(duì)ACD皮膚屏障恢復(fù)可能具有積極作用。
【學(xué)位單位】:北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2017
【中圖分類】:R285.5
【文章目錄】:摘要
ABSTRACT
符號(hào)說明
第一部分 綜述
綜述一 中藥治療變態(tài)反應(yīng)性接觸性皮炎的實(shí)驗(yàn)研究概況
參考文獻(xiàn)
綜述二 T細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞免疫與變態(tài)反應(yīng)性接觸性皮炎發(fā)病的研究進(jìn)展
參考文獻(xiàn)
前言
第二部分 研究報(bào)告
實(shí)驗(yàn)一 芩樓清利丸對(duì)ACD大鼠皮損作用及病理變化的研究
材料與方法
結(jié)果
小結(jié)
討論
實(shí)驗(yàn)二 芩樓清利丸對(duì)ACD大鼠皮損LTB4、BLT1、Caspase-14表達(dá)的影響
材料與方法
結(jié)果
小結(jié)
討論
實(shí)驗(yàn)三 芩樓清利丸對(duì)ACD大鼠模型血清中TNF-α、IL-4表達(dá)水平的影響
材料與方法
結(jié)果
小結(jié)
討論
結(jié)語
參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間主要研究成果
個(gè)人簡介
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):
2842069
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