紫菀為常用中藥,是菊科多年生草本植物紫菀(Aster tataricus L.f.)的干燥根及根莖,別名青菀、還魂草等,生于低山陰坡濕地、山頂和低山草地及沼澤地,海拔400-2000米。具有潤(rùn)肺下氣,消痰止咳的功效,常用于痰多咳喘,新久咳嗽,老嗽咳血。紫菀分布于河北、黑龍江、吉林、遼寧和山西等地。河北省安國(guó)及安徽省亳州等地有大量栽培,為河北省道地藥材。本研究旨在利用代謝組學(xué)技術(shù),建立高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法對(duì)紫菀藥材進(jìn)行化學(xué)成分定量分析、超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法對(duì)不同采收期的紫菀、不同部位的紫菀及不同炮制品的紫菀進(jìn)行化學(xué)成分差異分析。第一部分HPLC-MS/MS法同時(shí)測(cè)定紫菀中9種化學(xué)成分目的:建立HPLC-MS/MS法同時(shí)測(cè)定紫菀中山柰酚、槲皮素、木犀草素、異鼠李素、東莨菪內(nèi)酯、傘形花內(nèi)酯、阿魏酸、咖啡酸和綠原酸9種化學(xué)成分的方法。方法:采用Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流動(dòng)相為水(0.05%甲酸)-乙腈(0.05%甲酸),梯度洗脫,體積流量0.8 mL/min,進(jìn)樣量10μL,柱溫30℃;采用電噴霧離子源進(jìn)行負(fù)離子模式監(jiān)測(cè),多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式(MRM)用于定量分析,源噴射電壓為-4500 V,離子源溫度為650℃。結(jié)果:山柰酚、槲皮素、木犀草素、異鼠李素、東莨菪內(nèi)酯、傘形花內(nèi)酯、阿魏酸、咖啡酸和綠原酸分別在0.970-30.30μg/mL(r=0.9987)、0.498-15.55μg/mL(r=0.9996)、0.014-0.438μg/mL(r=0.9995)、0.022-21.95μg/mL(r=0.9985)、0.011-1.100μg/mL(r=0.9995)、0.008-0.247μg/mL(r=0.9998)、0.194-6.050μg/mL(r=0.9996)、0.197-6.150μg/mL(r=0.9995)和1.459-45.609μg/mL(r=0.9990)線性關(guān)系良好;平均回收率在97.43%-103.87%,精密度RSD值為1.95%-3.09%。結(jié)論:本法簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高、專屬性好,可用于紫菀中9種化學(xué)成分的同時(shí)測(cè)定。第二部分基于uplc-q-tof-ms技術(shù)分析不同采收期紫菀的成分變化目的:運(yùn)用uplc-q-tof-ms技術(shù)對(duì)不同采收期的紫菀進(jìn)行化學(xué)成分差異研究。方法:采用uplc-q-tof-ms技術(shù)對(duì)3個(gè)不同采收期的紫菀進(jìn)行檢測(cè),利用agilentporoshell120ec-c18色譜柱(100mm×2.1mm,2.6μm)、0.1%甲酸水-0.1%乙腈溶液為流動(dòng)相梯度洗脫、在esi源正離子模式下進(jìn)行數(shù)據(jù)采集,利用markerview對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行pca分析,尋找不同采收期紫菀的化學(xué)成分差異。結(jié)果:不同采收期的紫菀化學(xué)成分明顯不同,根據(jù)對(duì)照品和化合物質(zhì)譜圖庫(kù),鑒定出4個(gè)差異代謝物,分別為槲皮素、山奈酚、槲皮苷和白樺脂醇,其中采收期為2月份時(shí),槲皮素、山奈酚和白樺脂醇的含量較高,采收期為11月份時(shí),槲皮苷的含量較高。結(jié)論:從代謝組學(xué)整體角度來(lái)看,不同采收期的紫菀化學(xué)成分差異明顯,該方法為紫菀的采收及其臨床應(yīng)用提供了一定的科學(xué)依據(jù)。第三部分基于代謝組學(xué)技術(shù)的紫菀不同部位和不同炮制品的化學(xué)成分研究目的:運(yùn)用gc-tof-ms的植物代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)紫菀不同部位和不同炮制品進(jìn)行化學(xué)成分差異研究。方法:采用氣相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜(gc-tof-ms)技術(shù)分別對(duì)8個(gè)批次的紫菀地上和地下部分、生紫菀和蜜紫菀進(jìn)行檢測(cè),利用umea公司的simca14.1軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行pca分析及opls-da分析,用opls-da模型第一主成分的vip值,并結(jié)合t檢驗(yàn)(t-test)的p值來(lái)尋找差異性表達(dá)代謝物。結(jié)果:紫菀地上部分和地下部分的化學(xué)成分明顯不同,鑒定出的差異化合物92個(gè),地下部分的紫菀中氨基酸和有機(jī)酸的含量明顯高于地上部分。生紫菀和蜜紫菀的化學(xué)成分明顯不同,鑒定出的差異化合物74個(gè),生紫菀中氨基酸和有機(jī)酸的含量普遍偏高,炮制成蜜紫菀后,糖類成分含量明顯升高。另外還有一些氨基酸類成分、糖胺類成分和糖醇類成分的含量也有所不同。結(jié)論:從代謝組學(xué)整體角度來(lái)看,紫菀地上部分和地下部分、生紫菀和蜜紫菀化學(xué)差異明顯,不同部位用藥可導(dǎo)致其功效各有不同。
【學(xué)位單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R284.1
【部分圖文】：

圖 3 紫菀不同采收期的 PCA 載荷圖ig.3 PCA-loadings of Aster tataricus in different collectionABCD

28圖 4 正離子模式下紫菀不同采收期的選擇離子趨勢(shì)圖：（1）2 月、（2）6月、（3）11 月A. 槲皮素 B. 山奈酚 C. 槲皮苷 D. 白樺脂醇Fig.4 Selected ion intensity trend plots of Aster tataricus in differentcollection time: (1) February, (2) June, (3) NovemberA. Quercetin B. Kaempferol C. Quercitrin D. Betulin

36圖 2 b 組對(duì) a 組的 PCA 得分散點(diǎn)圖a: 地上部分 b: 地下部分Fig. 2 Score scatter plot of PCA model for group b vs. aa: aerial part b: underground part
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2840727