目的:探討光甘草定對宮頸癌Hela細(xì)胞增殖、侵襲和凋亡的影響及其機(jī)制。方法:以0、1、2.5、5、10和20μmol/L光甘草定作用于體外培養(yǎng)的Hela細(xì)胞24 h后,采用細(xì)胞計(jì)數(shù)(CCK-8)法檢測細(xì)胞存活率并計(jì)算出光甘草定的半抑制濃度。將體外培養(yǎng)的Hela細(xì)胞分別以0、2.5和5μmol/L光甘草定處理后,采用Transwell小室檢測細(xì)胞侵襲變化,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡和周期變化,免疫印跡法檢測細(xì)胞中Wnt/β-連環(huán)蛋白(β-catenin)信號(hào)通路相關(guān)蛋白Wnt1、β-catenin、細(xì)胞周期蛋白D1 (CyclinD1)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)和生存素(Survivin)的表達(dá)情況。結(jié)果:與對照(0μmol/L)組相比,1、2.5、5、10和20μmol/L光甘草定處理組細(xì)胞存活率均明顯降低(P0.05),且呈濃度依賴性;同時(shí),光甘草定對Hela細(xì)胞的半抑制濃度為4.56μmol/L。與對照(0μmol/L)組相比,2.5和5μmol/L光甘草定處理組中侵襲細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞在S期與G_2/M期的百分比以及細(xì)胞中Wnt1、β-catenin、CyclinD1、MMP-2、Survivin蛋白的表達(dá)水平均明顯減少,而細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞在G_0/G_1期百分比明顯升高(P0.05),且5μmol/L光甘草定處理組細(xì)胞的變化更為顯著。結(jié)論:光甘草定可抑制Hela細(xì)胞增殖、侵襲并促進(jìn)其凋亡,其作用機(jī)制可能與抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路的活化有關(guān)。
【部分圖文】：

流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果(表4)顯示,與對照(0 μmol/L)組相比,2.5和5 μmol/L光甘草定處理后Hela細(xì)胞在G0/G1期百分比明顯升高,而在S期和G2/M期的百分比明顯降低(P<0.05),且隨著光甘草定濃度的升高,細(xì)胞在不同時(shí)相的變化越明顯。表2 各組中侵襲細(xì)胞數(shù)的比較Tab.2 Comparison of number of invasive cells in each group Concentration(μmol/L) Number of invasive cells ( x ˉ ±s) 0 96.85±8.13 2.5 72.36±5.05* 5 50.28±3.35* F 47.500 P 0.000 注:與0 μmol/L相比,*P<0.05。Note:Compared with 0 μmol/L,*P<0.05.

免疫 印跡法檢測結(jié)果(圖3和表5)顯示,與對照( 0 μmol/L)組相比,2.5和5 μmol/L光甘草定處理組細(xì)胞中Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)蛋白Wnt1、β-catenin以及下游靶蛋白CyclinD1、 MMP-2和Survivin的表達(dá)水平均明顯降低(P<0.05),且5 μmol/L光甘草 定的作用效果較2.5 μmol/L更明顯。表3 各組細(xì)胞凋亡率的比較Tab.3 Comparison of apoptosis rate in each group Concentration(μmol/L) Apoptosis rate (%, x ˉ ±s) 0 5.48±0.36 2.5 21.15±2.28* 5 32.42±2.75* F 127.806 P 0.000 注:與0 μmol/L相比,*P<0.05。Note:Compared with 0 μmol/L,*P<0.05.

我國宮頸癌的發(fā)病率占女性惡性腫瘤的第七位,死亡率占第八位,且呈上升和年輕化趨勢,嚴(yán)重威脅著女性的身體健康和生活質(zhì)量[8];多數(shù)宮頸癌患者就診時(shí)已為晚期,錯(cuò)失了手術(shù)根治性治療的最佳時(shí)期,盡管放化療在宮頸癌治療方面取得了較為肯定的臨床效果,但也存在著一些脫發(fā)、神經(jīng)損傷和腎毒性等不良反應(yīng),極大地限制了其臨床應(yīng)用[9,10]。長期以來,中藥廉價(jià)、低毒、高效等優(yōu)勢使其在腫瘤防治過程中占有重要地位,越來越多的中藥提取物、中藥單體成分和中藥復(fù)方等被證實(shí)可通過抑制腫瘤細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥等發(fā)揮抗宮頸癌作用,在臨床治療中具有良好的應(yīng)用價(jià)值[11]。因此,不斷尋找新的、有效的中藥抗宮頸癌成分對臨床防治宮頸癌具有重要意義。表5 各組細(xì)胞中Wnt1、β-catenin、Survivin、MMP-2和CyclinD1蛋白表達(dá)水平的比較 ( x ˉ ±s) Tab.5 Comparison of Wnt1,β-catenin,Survivin,MMP-2 and CyclinD1 protein expression levels in each group ( x ˉ ±s) Concentration(μmol/L) Wnt1 β-catenin Survivin MMP-2 CyclinD1 0 0.68±0.04 0.77±0.05 0.92±0.06 0.73±0.03 0.85±0.06 2.5 0.29±0.02* 0.36±0.03* 0.52±0.04* 0.41±0.03* 0.48±0.03* 5 0.08±0.02* 0.15±0.02* 0.11±0.02* 0.13±0.02* 0.22±0.03* F 347.625 235.500 263.625 368.727 167.056 P 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 注:與0 μmol/L相比,*P<0.05。Note:Compared with 0 μmol/L,*P<0.05.
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10 于有江;彭建明;葉記林;蘇蘭娣;羅雪;;蛇床子素對宮頸癌Hela細(xì)胞凋亡的作用研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2017年07期

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8 汪俊穎;蝙蝠葛活性成分對Hela細(xì)胞增殖、凋亡及其相關(guān)蛋白表達(dá)的研究[D];延邊大學(xué);2009年

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10 李美;野胡蘿卜揮發(fā)油對Hela細(xì)胞凋亡與壞死的影響[D];浙江師范大學(xué);2012年

本文編號(hào)：2839656