霍山石斛,屬蘭科植物,藥用價值極高。主要含有多糖、氨基酸、多酚、生物堿、黃酮等活性成分。現(xiàn)代藥理學(xué)研究結(jié)果證明,霍山石斛多糖有著提高機體免疫力、預(yù)防治療糖尿病、抗氧化、抗病毒、抗腫瘤、抗菌消炎等功能。本論文通過對霍山石斛多糖分離純化得到了3種主要多糖組分,研究了其對乳酸菌生理活性的影響,得到了促進乳酸菌生長效果最顯著的組分DHP1-2,并對其結(jié)構(gòu)組成方面進行了分析研究,后期對多糖組分DHP1-2益生活性進行了進一步的實驗研究。主要研究內(nèi)容如下:1.霍山石斛多糖的分離純化霍山石斛干粉經(jīng)水提、醇沉、脫蛋白、脫色得到粗多糖,然后經(jīng)DEAE-52纖維素陰離子交換柱和瓊脂糖CL-6B凝膠柱進一步純化得到了三種主要多糖組分,分別命名為DHP1-2、DHP2-1和DHP2-2。DHP1-2的回收率為98.3%,DHP2-1的回收率為25.43%、DHP2-2的回收率為70.3%。對得到的DHP1-2、DHP2-1和DHP2-2三種主要多糖組分的益生活性進行了初步的研究,實驗結(jié)果表明,DHP1-2對嗜酸乳桿菌的生長促進效果最為明顯。初步判定DHP1-2的益生效果最好的組分。2.DHP1-2的組成結(jié)構(gòu)研究通過紫外光譜檢測發(fā)現(xiàn)多糖組分DHP1-2在260～280nm沒有吸收峰,說明DHP1-2中不含核酸和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。通過紅外檢測發(fā)現(xiàn),DHP1-2里含有O-H、C-H、C=O、C-O-C和C-O-H等化學(xué)鍵,且含有β-構(gòu)型的甘露化吡喃糖昔鍵。通過高效凝膠過濾色譜法(GPC)檢測得到DHP1-2的分子量為1080Da,屬于分子量較小的多糖。通過液相色譜進行的單糖成分分析顯示多糖組分DHP1-2主要由葡萄糖、半乳糖、甘露糖和阿拉伯糖組成,分別占多糖組分DHP1-2的95.37%、1.78%、0.8%、0.6%。核磁圖譜分析得到DHP1-2主要由β構(gòu)型的糖苷鍵連接而成。3.DHP1-2對乳酸菌生理活性的影響研究了DHP1-2對嗜酸乳桿菌和干酪乳桿菌兩種乳酸菌的生物量、還原糖利用、蛋白質(zhì)合成、產(chǎn)酸能力以及合成胞外多糖能力的影響,結(jié)果顯示,DHP1-2可以促進乳酸菌增殖,提高益生菌對碳源的利用效率,促進細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的合成,提高乳酸菌產(chǎn)酸以及合成胞外多糖的能力。模擬胃液的抗消化實驗顯示,DHP1-2的最大水解率僅為3.12%,α-淀粉酶水解實驗顯示,DHP1-2的最大水解率僅為4.91%,表明DHP1-2的抗消化能力較強,可以較好的進入腸道中供益生菌利用。DHP1-2對ABTS自由基和DPPH自由基的清除率分別為73.5%和75%,結(jié)果顯示出DHP1-2有著較好的抗氧化能力。
【學(xué)位單位】：安徽工程大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R284.2
【部分圖文】：

，—，?，?，＿，＿??１２?３?４?５??脫蛋白次數(shù)??圖２－１?Ｓｅｖａｇ法脫蛋白??Ｆｉｇ．２－１?Ｄｅｐｒｏｔｅｉｎｉｚａｔｉｏｎ?ｂｙ?Ｓｅｖａｇ?ｍｅｔｈｏｄ??糖的脫色??孔樹脂和活性炭脫色的原理都是吸附作用，是物理脫色的方法，單，最主要的是對霍山石斛多糖的結(jié)構(gòu)不會造成破壞，對霍山石性也不會造成影響。本章實驗中選取了活性炭和ＬＸＤ－７６２型大多糖多糖進行了脫色方面的比較。以脫色率以及多糖的損失率為如圖２－２所示，活性炭的脫色率和多糖損失率分別為８４．８４％和１６２型大孔樹脂的脫色率和多糖損失率分別為６５．５２％和１３．２６％。，活性炭的脫色效果要遠遠高于ＬＸＤ－７６２大孔樹脂，活性炭脫色樹脂脫色對霍山石斛多糖的損失率要大，不過兩種脫色方法對差較小。綜合考慮后認為使用活性炭對霍山石斛多糖進行脫色較

２．４．５三種組份多糖益生實驗對比??三種組分多糖對嗜酸乳桿菌的益生實驗對比如圖２－６所示，在三組多糖組分??添加濃度一致的情況下，添加了?ＤＨＰ１－２和ＤＨＰ２－２的兩組對嗜酸乳桿菌生長都??起到促進作用，且添加了?ＤＨＰ１－２的實驗組促進嗜酸乳桿菌生長效果最為顯著，??添加了?ＤＨＰ２－１的實驗組對促進嗜酸乳桿菌生長影響不大。由此次實驗初步判定??了霍山石斛多糖組分中益生最好的組分是ＤＨＰ１－２。??１７??

２．４．５三種組份多糖益生實驗對比??三種組分多糖對嗜酸乳桿菌的益生實驗對比如圖２－６所示，在三組多糖組分??添加濃度一致的情況下，添加了?ＤＨＰ１－２和ＤＨＰ２－２的兩組對嗜酸乳桿菌生長都??起到促進作用，且添加了?ＤＨＰ１－２的實驗組促進嗜酸乳桿菌生長效果最為顯著，??添加了?ＤＨＰ２－１的實驗組對促進嗜酸乳桿菌生長影響不大。由此次實驗初步判定??了霍山石斛多糖組分中益生最好的組分是ＤＨＰ１－２。??１７??
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本文編號：2839689