發(fā)布時(shí)間：2020-10-13 06:47

　　 熊膽為熊科動(dòng)物黑熊Ursus thibetanus的干燥膽,是我國(guó)傳統(tǒng)名貴動(dòng)物藥材,有1300多年的醫(yī)藥學(xué)應(yīng)用歷史,歷代中醫(yī)古籍中含熊膽的方劑多達(dá)396首。本品為不規(guī)則碎片、顆粒和粉末,黃色至深棕色,有的呈深綠色或淡紅色,半透明,有玻璃樣光澤,質(zhì)脆,易吸潮,氣清香微腥,味極苦微回甜,有清涼感。熊膽初次記載于《新修本草》,氣味苦寒、無毒,入肝膽心經(jīng),具有清熱、平肝、明目功能,常用于驚風(fēng)抽搐、目赤腫痛、咽喉腫痛等病癥。熊膽的資源極其短缺,其研究和應(yīng)用受到嚴(yán)重障礙。因此,尋找熊膽替代品中藥材新資源,開展其臨床前研究具有重要的社會(huì)、經(jīng)濟(jì)及生態(tài)意義�？紤]熊膽粉來源性質(zhì),其可能替代品首先考慮動(dòng)物膽類中藥。貉是皮毛動(dòng)物養(yǎng)殖品種中最容易飼養(yǎng)的品種,貉養(yǎng)殖規(guī)模較大。打皮完成后,大部分貉膽被丟棄,能否將貉膽變廢為寶代替熊膽,有待于進(jìn)一步研究。本文通過來源鑒定、性狀鑒定、顯微鑒定、理化鑒定、紅外光譜、UPLC-MS/MS等方法對(duì)貉膽進(jìn)行鑒別,比較貉膽和熊膽之間的異同點(diǎn);通過對(duì)比分析貉膽粉和熊膽粉活性成分的異同,對(duì)比分析貉膽粉和熊膽粉抗炎抑菌藥理作用的異同,為貉膽粉是否有代替熊膽粉的可行性提供依據(jù)和參考。具體結(jié)果如下:1.本文通過來源鑒定、性狀鑒定、顯微鑒定、理化鑒定、IR、UPLC-MS/MS等方法對(duì)貉膽進(jìn)行鑒別。發(fā)現(xiàn)貉膽粉極容易獲取,來源于犬科動(dòng)物貉。貉膽膽仁脆,半透明,表面有光澤,斷面光滑,光澤明顯,粉末黃色、黃綠色,有腥氣。顯微鏡下可觀察到貉膽粉末有無色或黃色的透明或半透明晶體存在,棱角分明,有明顯條紋。紫外光下可觀察到貉膽粉末有明亮黃綠色熒光。通過TLC實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)貉膽粉可在對(duì)應(yīng)膽酸和鵝去氧膽酸標(biāo)準(zhǔn)品位置找到對(duì)應(yīng)斑點(diǎn);通過UPLC-MS/MS實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)貉膽粉可在對(duì)應(yīng)膽酸和鵝去氧膽酸標(biāo)準(zhǔn)品位置找到膽酸的6種離子碎片以及鵝去氧膽酸的5種離子碎片,確定貉膽粉具有膽酸和鵝去氧膽酸兩種成分。通過IR實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)貉膽粉共有圖譜特征吸收峰如下:1070cm~(-1)、1669cm~(-1)、2924cm~(-1)、2997cm~(-1),和熊膽粉紅外光譜一致,說明貉膽粉和熊膽粉中物質(zhì)成分的化學(xué)鍵以及官能團(tuán)組成相似。2.本文采用紫外可見分光光度計(jì),對(duì)貉膽粉總膽酸含量測(cè)定,發(fā)現(xiàn)貉膽粉中的總膽酸含量遠(yuǎn)高于熊膽粉的。以膽酸和熊去氧膽酸含量計(jì)總膽酸,貉膽粉總膽酸含量分別為39.80%、36.06%,熊膽粉總膽酸含量分別是14.00%、14.73%。3.本文采用HPLC法對(duì)貉膽粉中21種氨基酸進(jìn)行測(cè)定,發(fā)現(xiàn)貉膽粉共有16種氨基酸,熊膽粉中共有14種氨基酸。其中貉膽粉有7種人體必需氨基酸,熊膽粉中有6種人體必需氨基酸。貉膽粉中有藥用氨基酸9種,熊膽粉中有8種藥用氨基酸。二者共有的14種氨基酸中,貉膽粉中天冬氨酸、谷氨酸、組氨酸、絲氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸和亮氨酸的含量均高于熊膽粉中對(duì)應(yīng)氨基酸的含量。4.本文采用ICP-MS對(duì)貉膽粉和熊膽粉中65種無機(jī)元素含量進(jìn)行測(cè)定,發(fā)現(xiàn)貉膽粉和熊膽粉共有的64種無機(jī)元素,其中貉膽粉中有44種元素含量不低于熊膽粉中的含量。貉膽粉中不含鎳元素。5.本文通過藥理實(shí)驗(yàn)證明貉膽粉具有顯著抑制二甲苯誘發(fā)的小鼠耳腫脹的作用。貉膽粉和熊膽粉實(shí)驗(yàn)組中,發(fā)現(xiàn)抗炎效果隨兩種膽粉藥液濃度的增加而增加。高、中劑量的貉膽粉和熊膽粉抗炎作用顯著,同劑量間無顯著差異。濃度為0.14g/ml的貉膽粉對(duì)沙門氏菌、大腸桿菌以及金黃色葡萄球菌無明顯體外抑制作用,抑菌作用達(dá)不到熊膽粉的效果。
【學(xué)位單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R285;R284
【部分圖文】：

1.3.2.1 貉膽膽囊性狀鑒定貉膽膽囊干燥后呈扁卵形，上部狹細(xì)，下部膨大呈囊狀，中部半透明，呈黃棕色，下部顏色逐漸加深，黃棕色至黑色不透明，有光澤，褶皺，囊皮較薄、質(zhì)堅(jiān)。干燥膽囊長(zhǎng)2.9-5.5cm，寬 1.3-2.1cm，重 0.9-2.3g，單個(gè)膽含膽汁 3-5mL，個(gè)別可達(dá) 10mL。如圖 1-1。

22圖 1-3 水試實(shí)驗(yàn)（左：貉膽膽仁，右：熊膽膽仁g.1-3 Water test (Left: Raccoon Dog bile kernel, Right: Bea果與分析察到：貉膽粉末有結(jié)晶存在，多呈無色或黃色，紋，少數(shù)為黑色不透明，粉末聚集處有團(tuán)塊，可能，團(tuán)塊減少。熊膽粉末多呈黃棕色半透明晶體或圖 1-4。

圖 1-2 膽粉（左：貉膽粉末，右：熊膽粉末）Fig.1-2 Bile powder (Left: Raccoon Dog bile powder, Right: Bear bile powder)圖 1-3 水試實(shí)驗(yàn)（左：貉膽膽仁，右：熊膽膽仁）
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