本課題首先對我國主要分布區(qū)內(nèi)的中藥材祖師麻原植物的資源現(xiàn)狀進行調(diào)查與分析,在此基礎(chǔ)上對所調(diào)查的祖師麻原植物進行種質(zhì)鑒定和主要化學(xué)成分的含量測定,以完善其藥材質(zhì)量評價體系,同時分析了祖師麻藥材中的主要化學(xué)成分與生態(tài)因子和土壤因子的相關(guān)性。研究結(jié)果對祖師麻野生藥材資源的合理利用與保護,質(zhì)量評價體系的完善,規(guī)劃祖師麻原植物的最佳栽培產(chǎn)區(qū)和規(guī)范其現(xiàn)代化的栽培生產(chǎn)具有重要的理論指導(dǎo)意義。本研究首先在文獻調(diào)查的基礎(chǔ)上,采取走訪與現(xiàn)地樣方相結(jié)合的調(diào)查方法以及線路樣方法和植被+土壤類型圖面積結(jié)合的估算法對陜西、甘肅、四川和青海四個省區(qū)23個縣的祖師麻野生資源進行了調(diào)查,并對其生態(tài)群落進行了分析。在資源調(diào)查的基礎(chǔ)上,首先運用藥材粉末顯微鑒定方法的方法來鑒別不同種的祖師麻,然后再運用基于ITS序列的DNA條形碼技術(shù)、HPLC指紋圖譜技術(shù)和含量測定技術(shù)對不同種和不同分布區(qū)的祖師麻原植物進行種質(zhì)鑒定和品質(zhì)評價。同時,通過對ITS序列的特異位點分析,NJ聚類樹分析,對HPLC指紋圖譜的相似度分析,聚類分析,主成分分析和主要成分含量的方差分析,來更加全面和準(zhǔn)確地鑒定和評價采自不同分布區(qū)和不同種的祖師麻藥材,從基因和化學(xué)層面解析他們的相似性和差異。最后,本課題研究了祖師麻藥材主要化學(xué)成分與生態(tài)因子和土壤因子的相關(guān)性,運用相關(guān)分析和逐步回歸分析來篩選影響祖師麻化學(xué)成分積累的主要環(huán)境因子,為其人工栽培種植提供理論基礎(chǔ)。本課題取得了如下研究成果:(1)陜西、甘肅、青海和四川4省23個縣野生祖師麻的總蘊藏量約583.62t,其中黃瑞香蘊藏量約97.64t,占比16.7%;凹葉瑞香蘊藏量約93.32t,占比16%;唐古特瑞香蘊藏量約392.66t,占比67.3%。根據(jù)調(diào)查樣點植被類型和土壤類型特征,推斷出非調(diào)查樣點相同植被類型和土壤類型的地區(qū)也可能有祖師麻分布,用各省區(qū)單位面積祖師麻藥材蘊藏量的均值乘以該省所有適宜祖師麻原植物生長的地區(qū)面積之和,進而估算整個省區(qū)祖師麻的蘊藏量。按照這個估算方法,4個省祖師麻野生藥材的總蘊藏量約8429.23 t,黃瑞香蘊藏量約為1407.68t,唐古特瑞香蘊藏量約為5672.87t,凹葉瑞香蘊藏量約為1348.68t。本次調(diào)查僅在甘肅省隴南康縣楊河壩村海拔2800m左右的山地發(fā)現(xiàn)了人工栽培的祖師麻,種植面積3.3公頃,種苗來源為野生唐古特瑞香幼苗。移栽后沒有澆水、施肥等其他精細栽培措施。栽培兩年高約40cm,年生長高度不足10cm,生長緩慢,目前沒有形成藥材商品。(2)藥材粉末顯微鑒定不能有效地鑒別出不同種的祖師麻,基于ITS序列的DNA條形碼相似度分析表明黃瑞香與唐古特瑞香的一致性在93%左右;黃瑞香與凹葉瑞香的一致性在92%左右;唐古特瑞香與凹葉瑞香的一致性為99%。雖然唐古特瑞香與凹葉瑞香序列一致性較高,但是在序列59bp和155bp處有差異,在59bp處唐古特瑞香基因型為C而凹葉瑞香的基因型為A,155bp處唐古特瑞香基因型為G而凹葉瑞香的基因型為A,所以通過這兩個特異位點,也能將唐古特瑞香和凹葉瑞香鑒別開。NJ-聚類樹分析、HPLC聚類分析和主成分分析具有較高的一致性,能夠?qū)⒉煌a(chǎn)地和不同種的祖師麻進行鑒定和分組。(3)HPLC含量測定結(jié)果表明祖師麻甲素、紫丁香苷和7-羥基-香豆素在不同種的祖師麻藥材中具有一定的差異,不同分布區(qū)的祖師麻藥材中這3種化學(xué)成分也有一定的差異,但就祖師麻甲素1個成分的含量而言,青海樂都、甘肅天祝這兩個地方的祖師麻藥材質(zhì)量最好。(4)祖師麻藥材主要成分與生態(tài)因子的相關(guān)性分析結(jié)果表明,祖師麻化學(xué)成分與多數(shù)生態(tài)因子都具有相關(guān)性,其中對其化學(xué)成分影響最大的是其生境的經(jīng)度、年均相對濕度等;逐步回歸方程表明影響祖師麻化學(xué)成分的主導(dǎo)生態(tài)因子為經(jīng)度、年均降雨量和年均日照強度。祖師麻藥材主要成分與土壤因子的相關(guān)分析和逐步回歸分析結(jié)果表明,祖師麻化學(xué)成分與土壤因子相關(guān)性不顯著,土壤中的有機質(zhì)、氮磷鉀等養(yǎng)分與其化學(xué)成分的含量沒有顯著的相關(guān)性,但是土壤類型對其化學(xué)成分的含量具有一定的相關(guān)性。野生祖師麻藥材的蘊藏量在不斷的減少,政府部門應(yīng)該制定相應(yīng)的保護措施。同時,應(yīng)該加強祖師麻原植物人工栽培的研究,實現(xiàn)祖師麻藥材的可持續(xù)利用。DNA條形碼技術(shù)、HPLC指紋圖譜和祖師麻藥材中主要成分的含量測定,這3種方法聯(lián)合運用,能夠成功的鑒定出不同種的祖師麻,并且能夠較為全面和準(zhǔn)確地對不同種和不同產(chǎn)地的祖師麻藥材進行質(zhì)量評價。從提高祖師麻甲素及其他化學(xué)成分含量的角度來看,祖師麻人工種植的理想?yún)^(qū)域為我國青海、甘肅和四川的西部地區(qū),這些地區(qū)經(jīng)度低、海拔高、氣候相對干旱、日照強度較強、晝夜溫差較大,土壤類型多為黑鈣土和栗鈣土,還有少量的林溶土。滿足這些條件的地區(qū)有甘肅省天祝,青海省的樂都、大通、化隆,四川省的康定,其中甘肅省的天祝縣是最佳選地。當(dāng)然,提高其化學(xué)成分含量的前體是保證植物的正常生長,因此在人工栽培種植中要精細管理,滿足祖師麻原植物自然生長必須的水分等因素,找到生物量和化學(xué)成分含量均能得到提高的平衡點,使祖師麻資源能更好的服務(wù)于醫(yī)藥行業(yè)。
【學(xué)位單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R282.71
【部分圖文】：

２．３樣方調(diào)查??２．３．１樣方設(shè)計??在線路調(diào)查基礎(chǔ)上，每個縣隨機設(shè)置５－６個樣方，樣方間距離至少為５００ｍ，見圖２。??樣方面積根據(jù)祖師麻分布的疏密程度確定，其中分布密集（約５株／ｍ２）的選用２ｍＸ２ｍ??樣方，中密度（約１．２５株／ｍ２）的采用４ｍＸ４ｍ、較稀疏（約０．２株／ｍ２）的采用１０ｍＸ??１０ｍ樣方，對于特別稀疏的（零星分布）則用ＧＰＳ劃定更大的樣方。樣方確定后觀察??記錄群落特征［２］，重點記錄樣方內(nèi)祖師麻的株數(shù)，單株鮮重，樣方面積，海拔高度、經(jīng)??緯度，生境。??ｉ?ｉ賽賽賽??轉(zhuǎn)?敘?泠?／＾＾￥彡－廠篆樣ｓｉ６??Ｌ?丨樣?丨賽考多??＾?＇?賽滅ｔ??｜?＼）＾?拿爭??ｉ???圖２線路樣方示意圖??為了記錄簡單且容易識別，樣地代號由：種名一省區(qū)名一縣名一鄉(xiāng)名一編號５個部??分組成。其中：種名（黃瑞香縮寫為Ｈ；唐古特瑞香縮寫為ＴＧＴ；凹葉瑞香縮寫為ＡＹ）；??地名的記錄均采用中文名拼音首字母表示；每個采集樣點的編號分別從０１開始編號，??具體示例如下：??①?ＴＧＴ—ＧＳ—ＬＸ—ＱＳ—０１??２７??

▼?’?■四川??２７．０２％??圖４調(diào)查樣點３種瑞香野生資源蘊藏量和四省調(diào)查樣點野生祖師麻藥材資源蘊藏量比例??通過表２、圖３和圖４可知，上述四個省２３個縣（２７個縣中有４個由于時間限制??沒有找到祖師麻），野生祖師麻的總分布面積約６９４６９．０６ｋｍ２，總蘊藏量約５８３．６２ｔ，甘??肅省康縣的蘊藏量最小，青海省門源的蘊藏量最大。其中黃瑞香蘊藏量約９７．６４ｔ，占比??１６．７％，在甘肅省臨夏、迭部、宕昌以及陜西省太白這幾個樣點有分布；凹葉瑞香蘊藏??量約９３．３２ｔ，占比１６％，本次調(diào)查僅在四川省的康定、馬爾康、金川見到其分布；唐古??特瑞香蘊藏量約３９２．６６ｔ，占比６７．３％，是本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)分布最廣蘊藏量最多的瑞香，除??了黃瑞香和凹葉瑞香分布之外的所有調(diào)查樣點都發(fā)現(xiàn)了唐古特瑞香。祖師麻在陜西三個??縣的分布面積約７１６７．６５ｋｍ２，蘊藏量約６５．３１ｔ，占比１１．１９％；甘肅省的分布面積約??１９１５５．６６?ｋｍ２，蘊藏量約１３７．２６?ｔ，占比２３．５２％；四川省的分布面積約２８?６３４．３８ｋｍ２，??蘊藏量約１５７．６７?ｔ

圖６棕黃色木栓細胞??（３）韌皮纖維成束、成層、或散在，見圖７??
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本文編號：2838969