目的:本課題從巨噬細(xì)胞極化和泡沫化入手,從分子水平探討景虎通脈方(原“活血通脈方”)及紅景天苷防治動脈粥樣硬化可能的作用靶點和機(jī)制,從而為中醫(yī)藥方向治療動脈粥樣硬化病變提供有力的理論依據(jù)。方法:成年清潔雄性SD大鼠10只,體重(300±50)g,6-8周齡。以臨床等效劑量8倍的景虎通脈方灌胃制備景虎通脈方含藥血清,并對含藥血清中的中藥活性成份進(jìn)行檢測。檢測ox-ldl、景虎通脈方含藥血清及紅景天苷對細(xì)胞活力的影響;將RAW264.7細(xì)胞分組后予以不同濃度的景虎通脈方含藥血清及紅景天苷處理,收集細(xì)胞上清液及細(xì)胞,Griss法測定細(xì)胞上清中NO水平;ELISA法檢測上清液中M1型細(xì)胞因子IL-6、TNF-α及IL-1β的表達(dá);油紅染色檢測細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積情況;流式細(xì)胞術(shù)檢測巨噬細(xì)胞CD36、CD204水平。結(jié)果:(1)Griess法測定NO水平:與正常對照組比較,模型組細(xì)胞NO含量明顯增高,具有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異。而與模型組相比,景虎通脈方含藥血清及紅景天苷各濃度組均不同程度的減少了NO的水平。(2)油紅染色檢測細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積:與正常對照組相比,模型組中細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)脂質(zhì)沉積明顯,且著色強。而景虎通脈方含藥血清組及紅景天苷各濃度組較模型對照組比較,胞內(nèi)紅色脂質(zhì)均不同程度減少。(2)ELISA檢測IL-6、TNF-α及IL-1β的表達(dá):與正常對照組比較,模型組中IL-6、TNF-α、IL-1β含量顯著升高,與模型組比較,景虎通脈方含藥血清1%組及紅景天苷各濃度組的IL-6水平均有不同程度的降低;景虎通脈方含藥血清2%、0.5%濃度組及紅景天苷各濃度組TNF-α表達(dá)水平均呈不同程度的抑制;景虎通脈方含藥血清及紅景天苷各濃度組均明顯抑制了IL-1β的分泌。(3)流式細(xì)胞術(shù)檢測CD36、CD204水平:CD36各組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義,但藥物干預(yù)后,景虎通脈方含藥血清及紅景天苷各濃度陽性率均低于模型組的陽性細(xì)胞率。與正常對照組相比,模型組的CD204陽性率比例為22.9%;與模型組相比,景虎通脈方含藥血清1%濃度組和紅景天苷各濃度組陽性率均低于模型組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:在體外細(xì)胞培養(yǎng)過程中,景虎通脈方含藥血清及紅景天苷可以減少巨噬細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的沉積,抑制泡沫細(xì)胞的形成;通過抑制炎性介質(zhì)NO,M1型細(xì)胞因子IL-6、TNF-α及IL-1β的分泌,抑制巨噬細(xì)胞向M1型極化;且可能是通過抑制CD204的表達(dá)來減少泡沫細(xì)胞的形成,從而延緩動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展。
【學(xué)位單位】：云南中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R285.5
【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
中英文縮略詞對照表
前言
材料和方法
    1、實驗細(xì)胞
    2、實驗動物
    3、藥物制備
    4、儀器與試劑
    5、實驗方法與步驟
    6、統(tǒng)計學(xué)方法
    7、技術(shù)路線
實驗結(jié)果
    1、景虎通脈方含藥血清質(zhì)控
    2、氧化低密度脂蛋白對RAW264.7細(xì)胞活力的影響
    3、景虎通脈方含藥血清及紅景天苷對RAW264.7細(xì)胞活力的影響
    4、景虎通脈方含藥血清及紅景天苷對ox-ldl誘導(dǎo)的RAW264.7 細(xì)胞泡沫化的影響
    5、景虎通脈方含藥血清及紅景天苷對NO含量的影響
    6、景虎通脈方含藥血清及紅景天苷對RAW264.7 細(xì)胞IL-6、TNF-α、IL-1β表達(dá)的影響
    7、景虎通脈方含藥血清及紅景天苷對RAW264.7 細(xì)胞CD36、CD204水平的影響
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2838685