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桃核承氣湯對慢性腎衰竭大鼠腎組織中Axin調控機制的研究

發(fā)布時間:2020-10-12 18:15
   目的:通過觀察桃核承氣湯對慢性腎衰竭大鼠血常規(guī)、腎功能、腎臟病理學形態(tài)、Wnt/β-catenin信號通路中的Axin影響,探討該方延緩慢性腎衰竭的作用機理,從而為臨床上治療慢性腎衰竭提供思路和客觀的實驗依據。方法:采用5/6腎切除大鼠慢性腎衰動物模型作為研究對象,將125只7周齡成年雄性Wistar大鼠喂養(yǎng)1周后,隨機分為空白組、假手術組、模型組、尿毒清組、桃核承氣湯組。其中模型組、尿毒清組、桃核承氣湯這三組大鼠運用5/6腎切除法復制慢性腎衰竭的模型,在腹腔水合氯醛注射麻醉后,切除大鼠左腎2/3腎組織并在一周以后切除大鼠右側腎臟;假手術組大鼠僅用鑷子剝除兩腎被膜。術后1-3天連續(xù)使用青霉素腹腔注射預防感染。這5組均在造模完成后,每天上午9點對每組大鼠分別給予不同藥物:空白、假手術和模型這三組大鼠使用等量的生理鹽水灌胃;尿毒清組大鼠運用尿毒清顆;鞈乙哼M行灌胃;桃核承氣湯組用桃核承氣湯飲片煎熬濃縮后進行灌胃,連續(xù)灌胃56天后麻醉后處死,其間使用采血針在腹主動脈取血用于大鼠紅細胞、血紅蛋白、血肌酐、尿素氮檢測;并取左腎組織的一部分放置于凍存管中,進行Western Blot法檢測左腎組織Wnt1、Axin、β-catenin的蛋白含量;實時熒光定量PCR檢測Wnt1、Axin、β-catenin的mRNA表達情況;另一部分存放于多聚甲醛中,經HE染色后用光鏡觀察五組腎組織病理變化。結果:(1)桃核承氣湯組與模型組對比,RBC、Hb的含量均有不同程度的升高(P0.05)。(2)血清Scr、BUN較模型組和尿毒清組降低(P0.05),其結果具有統(tǒng)計學意義。(3)Western Blot結果顯示,桃核承氣湯組相比模型組,左腎組織Wnt1、β-catenin的蛋白表達下降(P0.05),Axin表達水平上調(P0.05)。(4)實時熒光定量qPCR示桃核承氣湯組相比模型組與尿毒清組,Wnt1、β-catenin表達下調(P0.05),Axin表達水平上調(P0.05)。(5)腎組織HE染色顯示:空白組與假手術組左腎組織結構正常;模型組左腎組織結構紊亂,腎小球固縮,基膜增厚、腎間質纖維增生,可見炎性細胞浸潤;桃核承氣湯較尿毒清組與模型組腎纖維化程度有明顯改善。結論:(1)桃核承氣湯通過運用化瘀瀉濁的治法可以明顯改善慢性腎衰竭大鼠貧血狀態(tài)和腎功能,能減輕大鼠腎臟病理損傷。(2)桃核承氣湯能通過抑制5/6腎切除大鼠模型中Wnt/β-catenin信號,下調Wnt1、β-catenin和上調Axin表達,減慢腎纖維化的發(fā)展,從而延緩慢性腎衰竭進程。
【學位單位】:福建中醫(yī)藥大學
【學位級別】:碩士
【學位年份】:2019
【中圖分類】:R285.5
【文章目錄】:
英文縮略詞中英文對照表
中文摘要
Abstract
引言
第一部分 實驗部分
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 實驗藥品
        1.3 主要實驗試劑
        1.4 主要實驗設備
    2 實驗方法
        2.1 分組與造模
        2.2 藥物配制與灌胃給藥
        2.3 觀察內容
        2.4 標本采集
        2.5 檢測方法
        2.6 統(tǒng)計方法
    3 實驗結果
        3.1 一般情況觀察
        3.2 腎臟的肉眼觀察
        3.3 實驗室檢測指標
        3.4 Western blot檢測結果
        3.5 實時熒光定量PCR結果
        3.6 左腎組織HE染色觀察結果
第二部分 理論部分
    1 現代醫(yī)學對CRF的認識
        1.1 CRF發(fā)生的病理機制
        1.2 CRF與腎纖維化
        1.3 Wnt/β-catenin信號通路與腎纖維化關系
        1.4 慢性腎衰竭分期
        1.5 慢性腎衰竭西醫(yī)治療措施
    2 從中醫(yī)角度探討慢性腎衰竭
        2.1 CRF的中醫(yī)病名
        2.2 CRF的基本病因
        2.3 CRF的基本病機
        2.4 桃核承氣湯方藥分析
        2.5 臨證加減
        2.6 桃核承氣湯治療慢性腎衰竭機理
第三部分 分析與討論
    1 桃核承氣湯治療CRF的立法依據
    2 CRF大鼠常見造模方法的優(yōu)缺點比較
    3 實驗對照組的選擇
    4 實驗結果分析及意義
    5 實驗的不足與展望
結論
參考文獻
附錄
文獻綜述
    參考文獻
致謝
作者簡歷

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本文編號:2838101

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