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枸杞多糖對(duì)去卵巢大鼠肝臟脂質(zhì)代謝的影響及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2020-10-10 20:33
   目的:通過觀察枸杞多糖對(duì)去卵巢大鼠血清中血脂水平及肝臟中HMGCR、L-FABP及LPL蛋白和mRNA表達(dá)的影響,探討枸杞多糖對(duì)去卵巢大鼠脂類代謝的作用機(jī)制,從而為圍絕經(jīng)期女性脂代謝異常所導(dǎo)致的冠心病的預(yù)防與治療提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。材料與方法:30只SPF級(jí)健康雌性SD大鼠自由攝食飲水,適應(yīng)性飼養(yǎng),術(shù)后隨機(jī)平均分為5組,其中6只作為空白對(duì)照組(沒有切除雙側(cè)卵巢,只將腹腔內(nèi)子宮周圍少量脂肪組織切除),即假手術(shù)組,余下4組皆去除雙側(cè)卵巢,分別為去卵巢組、補(bǔ)佳樂組、枸杞多糖高劑量組及枸杞多糖低劑量組,術(shù)后給予每組大鼠青霉素肌肉注射3天,以防止感染。假手術(shù)組和去卵巢組給予等量生理鹽水灌胃治療,補(bǔ)佳樂組給予戊酸雌二醇灌胃治療,枸杞多糖高劑量組和低劑量組分別給予高低不同劑量的枸杞多糖治療。經(jīng)過12周治療之后,全自動(dòng)生化分析儀檢測大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,HE染色觀測各組大鼠肝臟組織形態(tài)學(xué)變化,Western Blot方法檢測肝臟中HMGCR、L-FABP及LPL蛋白表達(dá)。RT-PCR技術(shù)檢測肝臟中HMGCR mRNA、L-FABP mRNA及LPL mRNA基因表達(dá)。結(jié)果:1.血脂檢測發(fā)現(xiàn),以假手術(shù)組作為參考,去卵巢組大鼠血清TC、LDL-C水平顯著升高、HDL-C水平顯著下降(P0.01);以去卵巢組作為參考,補(bǔ)佳樂組與枸杞多糖高劑量組TC水平顯著下降(P0.01),補(bǔ)加樂組與枸杞多糖高、低劑量組LDL-C水平顯著下降(P0.01 or P0.05)。2.HE染色發(fā)現(xiàn),以假手術(shù)組為參考,去卵巢組可見散在的脂肪空泡,枸杞多糖高劑量組經(jīng)治療后脂肪空泡明顯減少,枸杞多糖低劑量組經(jīng)治療后脂肪空泡仍然可見。3.Western Blot檢測各組大鼠肝臟中蛋白結(jié)果顯示,以假手術(shù)組為參考,去卵巢組大鼠肝臟HMGCR、L-FABP蛋白表達(dá)顯著升高(P0.01),LPL蛋白表達(dá)也顯著降低(P0.01)。以去卵巢組作為參考,補(bǔ)佳樂組HMGCR蛋白表達(dá)量降低(P0.05),LPL蛋白表達(dá)量顯著升高(P0.01);枸杞多糖高劑量組HMGCR與L-FABP蛋白表達(dá)量顯著降低,LPL蛋白表達(dá)呈相反趨勢,顯著升高(P0.01);枸杞多糖低劑量組各蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.RT-PCR檢測各組大鼠肝臟中mRNA結(jié)果顯示,以假手術(shù)組為參考,去卵巢組大鼠肝臟HMGCR mRNA與L-FABP mRNA水平明顯上升(P0.01),LPL mRNA水平明顯下降(P0.01)。以去卵巢組作為參考,補(bǔ)佳樂組大鼠肝臟HMGCR mRNA與L-FABP mRNA水平下降(P0.05),LPL mRNA水平顯著上升(P0.01);枸杞多糖高劑量組HMGCR mRNA水平下降(P0.05),L-FABP mRNA水平顯著下降(P0.01),LPL mRNA水平顯著上升(P0.01);枸杞多糖低劑量組各mRNA表達(dá)結(jié)果差異無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1.枸杞多糖能有效改善去卵巢大鼠脂質(zhì)代謝紊亂。2.枸杞多糖可能通過下調(diào)肝臟中HMGCR與L-FABP蛋白,上調(diào)LPL蛋白表達(dá)以改善去卵巢大鼠脂質(zhì)代謝紊亂,并且存在量效關(guān)系。
【學(xué)位單位】:遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:R285.5
【部分圖文】:

情況,枸杞多糖,參考標(biāo)準(zhǔn),水平檢測


實(shí)驗(yàn)結(jié)果鼠血清 TC、TG、HDL 及 LDL 水平變化水平檢測結(jié)果顯示:以假手術(shù)組為參考標(biāo)準(zhǔn),血清 TC、LDL-C 水升高較為明顯、而 HDL-C 水平卻呈反向趨勢(P<0.01),TG 水平卵巢組為參考標(biāo)準(zhǔn),補(bǔ)佳樂組 TC 水平同枸杞多糖高劑量組皆),TG 水平并無明顯變化,LDL-C 水平在補(bǔ)佳樂組、枸杞多糖高劑量組中都表現(xiàn)為下降趨勢,尤以補(bǔ)佳樂組和枸杞多糖高劑量組下P<0.01 or P<0.05)。見圖 1。

HE染色,枸杞多糖,去卵巢,蛋白表達(dá)


圖 2 各組大鼠肝臟 HE 染色的比較注:a 假手術(shù)組;b 去卵巢組c 補(bǔ)佳樂組;d 枸杞多糖高劑量組;e 枸杞多糖低劑量組3. Western blot 檢測蛋白表達(dá)結(jié)果3.1 肝臟 HMGCR 蛋白表達(dá)情況Western blot 檢測各組大鼠肝臟 HMGCR 蛋白表達(dá)結(jié)果顯示:以假手術(shù)組為參考,HMGCR 蛋白在去卵巢組大鼠肝臟中表達(dá)量顯著升高(P<0.01);以去卵巢組為參考,補(bǔ)佳樂組大鼠肝臟中 HMGCR 蛋白表達(dá)量降低(P<0.05),枸杞多糖高劑量組 HMGCR蛋白表達(dá)量顯著降低(P<0.01),而 HMGCR 蛋白在枸杞多糖低劑量組大鼠肝臟中表達(dá)結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見圖 3。

蛋白表達(dá),枸杞多糖,去卵巢,枸杞


圖 2 各組大鼠肝臟 HE 染色的比較注:a 假手術(shù)組;b 去卵巢組佳樂組;d 枸杞多糖高劑量組;e 枸杞多糖低劑蛋白表達(dá)結(jié)果白表達(dá)情況測各組大鼠肝臟 HMGCR 蛋白表達(dá)結(jié)果顯示:巢組大鼠肝臟中表達(dá)量顯著升高(P<0.01); HMGCR 蛋白表達(dá)量降低(P<0.05),枸杞多(P<0.01),而 HMGCR 蛋白在枸杞多糖低劑義。見圖 3。
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