黃檗是一種集藥用、經(jīng)濟用材、改善環(huán)境等于一身的多年生木本植物。其內(nèi)皮加工炮制成的中藥材黃柏更是不可或缺的一味良藥,具有抗菌、清熱燥濕、瀉火除蒸、解毒療瘡、黃疸等多重功效。也有一些研究表明黃檗提取物具有抗氧化功效,但對于具體不同部位的不同提取層抗氧化效果比較未見詳細報道。隨著經(jīng)濟條件的改善、生活品質(zhì)的提高,養(yǎng)生保健越來越受到人們的重視,抗氧化劑的種類也隨之層出不窮。人工合成的抗氧化劑經(jīng)濟高效,但有損健康的負面新聞也屢見報道,天然抗氧化劑越來越受到人們的青睞。為進一步合理開發(fā)利用黃檗資源的抗氧化功能,本試驗進行了黃檗種子、葉子、皮不同提取層抗氧化效果比較。本論文選取黃檗作為研究對象,以自由基清除能力作為體外抗氧化能力大小的評價標準,篩選粗分離了黃檗種子、葉子、皮的抗氧化物質(zhì),以期將黃檗抗氧化活性的研究成果應用到天然抗氧化劑、衰老的延緩、疾病的防治等藥物研發(fā)上。本研究主要成果如下:1、采用超聲輔助提取技術(shù),用乙醇水溶液對黃檗種子進行了浸提,對提取次數(shù)、浸提液乙醇濃度、浸提料液比、浸提溫度、超聲時間等條件對黃檗抗氧化活性物質(zhì)提取的影響,進行考察,采用了 4因素3水平的正交試驗法對黃檗進行最優(yōu)化提取工藝的測定,得出的最佳浸提工藝條件為:浸提次數(shù)兩次、乙醇濃度為70%、浸提料液比為1:25 g/mL、浸提溫度為40℃C、超聲時間為2h。2、對黃檗種子、葉子、皮的粗提取物,即水提物與醇提物進行測定,結(jié)果表明水提物與醇提物均具有一定的抗氧化能力,而且是醇提物的抗氧化能力強于水提物。3、利用不同有機溶劑極性不同原理,依次用有機溶劑石油醚、乙酸乙酯、正丁醇對黃檗的粗提物進行液—液萃取分離,分別得到石油醚萃取相、乙酸乙酯萃取相、正丁醇萃取相及水相。結(jié)合體外抗氧化實驗(清除DPPH自由基的能力、清除羥基自由基的能力、FRAP法測定、清除ABTS自由基的能力)分析,結(jié)果表明各個萃取層均具有一定的抗氧化能力,綜合比較:乙酸乙酯相的清除能力強于正丁醇相、強于水相,石油醚相清除自由基能力最弱。
【學位單位】：東北林業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R285;R284
【部分圖文】：

圖３－３黃檗皮醇提各相提取物對ＤＰＰＨ的清除能力逡逑Ｆｉｇ．邋３－３邋ｔｈｅ邋ｒｅｍｏｖａｌ邋ａｂｉｌｉｔｙ邋ｏｆ邋ｔｈｅ邋ｅｘｔｒａｃｔ邋ｏｆ邋ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ邋ｅｘｔｒａｃｔ邋ｏｎ邋ＤＰＰＨ．逡逑黃檗皮醇提物各相提取物對ＤＰＰＨ自由基的清除活性結(jié)果見圖３－３，其中在低濃度逡逑條件下，石油醚相清除效果最弱，與其他提取相呈顯著量效關(guān)系。隨著溶劑濃度的增逡逑大，石油醚相對ＤＰＰＨ自由基的清除能力增加，且增加效果顯著；而乙酸乙酯相、正丁逡逑醇相和水相雖有增加趨勢，但在０．５？２．０邋ｍｇ／ｍＬ濃度范圍內(nèi)增大趨于緩慢。黃檗皮醇提逡逑物不同提取相抗氧化活性大�。阂宜嵋阴ハ啵惧逭〈枷啵惧逅噱澹惧迨兔严唷ｅ义希常矗保擦u自由基ＯＯＨ）清除能力的測定逡逑１、黃檗皮水提物的各不同極性萃取相清除作用逡逑３０邋＇邐■＾石油醚相逡逑ｔ邋２５邋＾邋ｆ乙酸乙酯相邐？逡逑Ｓ．逡逑Ｓ邐正丁醇相逡逑－）0邋＿逡逑Ｉ邐—一邋水相逡逑１邋５－逡逑０邋邐！邐；邐；邐逡逑０．２５邐０．５邐１邐２逡逑濃度（ｍｇ／ｍＬ）邋／Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ逡逑圖３－４黃檗皮水提物各萃取層清除羥自由基能力逡逑Ｆｉｇ．邋３－４邋ｒｅｍｏｖａｌ邋ｏｆ邋ｈｙｄｒｏｘｙｌ邋ｒａｄｉｃａｌｓ邋ｉｎ邋ｔｈｅ邋ｅｘｔｒａｃｔｉｖｅ邋ｌａｙｅｒ邋ｏｆ邋ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ邋ｗａｔｅｒ邋ｅｘｔｒａｃｔ．逡逑由圖３－４可知，在實驗所選的濃度范圍內(nèi)，黃檗皮水提物各相萃取層對ＯＨ自由基逡逑？１１－逡逑

邋２逡逑濃度（ｍｇ／ｍＬ）邋／Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ逡逑圖３－９黃檗葉醇提各相提取物對ＤＰＰＨ的清除能力逡逑Ｆｉｇ．邋３－９邋ｔｈｅ邋ｒｅｍｏｖａｌ邋ａｂｉｌｉｔｙ邋ｏｆ邋ｔｈｅ邋ｅｘｔｒａｃｔｓ邋ｏｆ邋ｂｅｒｂｅｒｉｓ邋ｆｒｏｍ邋ｅａｃｈ邋ｐｈａｓｅ邋ｏｆ邋ＤＰＰＨ逡逑從圖３－９中數(shù)據(jù)可以看出，黃檗葉醇提物４個不同萃取相對ＤＰＰＨ均有清除能力，逡逑且呈顯著量效關(guān)系。不同萃取相的清除ＤＰＰＨ自由基能力存在差異，同種萃取相隨著濃逡逑度的增大抗氧化能力有所提升，相同濃度下石油醚對ＤＰＰＨ的清除率最小，其次是水提逡逑取物，正丁醇提取物，乙酸乙酯提取物清除率最大。在濃度為１．０邋ｍｇ／ｍＬ時，石油醚、逡逑乙酸乙酯、正丁醇和水相提取物對ＤＰＰＨ的清除率分別是６５．１％、８１．３１％、７６．５９％和逡逑７０．２６％，且差異不顯著（ｐ＞０．０５）。ＩＣ５０值（清除率達到５０％時的相應濃度）也與清除逡逑率相一致，石油醚提取物最大，乙酸乙酯提取物的最小。４個溶液提取物的ＩＣ５０值分別逡逑為邋０．８０邋ｍｇ／ｍＬ、０．１１邋ｍｇ／ｍＬ、０．１４邋ｍｇ／ｍＬ邋和邋０．３８邋ｍｇ／ｍＬ0逡逑３．４．２．２羥自由基ＯＯＨ）清除能力的測定逡逑１、黃檗葉水提物的各不同極性萃取相清除作用逡逑５０邋－逡逑？ｆ邋４５邋－邐＋石油醚相邐７逡逑｜４０＿邐一乙酸乙酯相逡逑＆邋３５－邐＋正丁醇相逡逑＇｜３０邋＂邐一ｘ—水相邐，逡逑ｌｒ逡逑0邐°＝￣＂．．．；邐…邐：邐

邋２逡逑濃度（ｍｇ／ｍＬ）邋／Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ逡逑圖３－１３黃檗葉醇提取物各萃取層對ＡＢＴＳ＋？自由基清除作用逡逑Ｆｉｇ邋３－１３邋ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ｔｈｅ邋ｅｘｔｒａｃｔｓ邋ｏｆ邋ｂｅｒｂｅｒｉｓ邋ｅｘｔｒａｃｔ邋ｆｒｏｍ邋ｔｈｅ邋ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ邋ｌａｙｅｒ邋ｏｆ邋ＡＢＴＳ＋＊邋ｆｒｅｅ逡逑ｒａｄｉｃａｌ邋ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ逡逑從圖３－１３中可以看出，黃檗葉各相提取物對ＡＢＴＳ＋？均表現(xiàn)出不同程度的清除能逡逑力，并且都具有明顯的劑量關(guān)系。在濃度較低的情況下，各相提取對ＡＢＴＳ＋？的清除逡逑能力相對較低，并且差異不顯著（ｐ＜０．０５）。隨著濃度升高，逐漸表現(xiàn)差異性，在濃度逡逑為２．０邋ｍｇ／ｍＬ時，乙酸乙酯相與正丁醇相對ＡＢＴＳ＋？的清除能力最好，其次為水相提逡逑取物，石油醚的清除率最小，并且表現(xiàn)出顯著性差異（ｐ＜０．０５）。在濃度為１．０邋ｍｇ／ｍＬ逡逑時

【參考文獻】

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本文編號：2831877