目的:探究苯甲酰新烏頭原堿(BMA)對骨髓瘤細胞RPMI8226(RPMI8226)增殖及凋亡的影響.方法:將對數(shù)期生長RPMI8226細胞隨機分為空白對照組、BMA(0. 1、0. 5、1、10、100μmo L)組,24 h后用CCK8測定各組光密度(A),根據(jù)A值計算出半數(shù)抑制質(zhì)量濃度(IC50);根據(jù)所測IC50將對數(shù)期生長RPMI8226細胞分為空白對照組、陰性對照組、BMA(4、6、8μmo L)各組,作用12～48 h,用CCK8測定不同作用時間下各組RPMI8226細胞A值,計算出各組增殖抑制率;根據(jù)BMA對RMPI8226增殖抑制率的影響規(guī)律再設(shè)空白對照組、BMA(4、8μmo L)組,作用24、48 h,用Annexin V/PI雙染色流式細胞術(shù)檢測各組細胞凋亡率.結(jié)果:作用24 h后,各組BMA換算成質(zhì)量濃度,在13～13 000 ng/m L(即1～10μmo L)質(zhì)量濃度,各組A值隨藥物質(zhì)量濃度的增加而減少,P 0. 05,其IC50質(zhì)量濃度為1 040 ng/m L;作用12～48 h,各組細胞增殖抑制率隨加入的BMA的增加、作用時間的增加而增加,各組P 0. 05;作用24、48 h后各組細胞凋亡率隨加入BMA的增加、作用的增加而增大,各組P 0. 05.結(jié)論:BMA能抑制RPMI8226增殖并使其凋亡.
【部分圖文】：

圖324h空白對照組細胞凋亡率Fig．3Ratioofapoptosisinblankcontrolgroupof24h圖424h4μmoL組細胞凋亡率Fig．4Ratioofapoptosisin4μmoLgroupof24h圖524h8μmoL組細胞凋亡率Fig．5Ratioofapoptosisin8μmoLgroupof24h圖648h空白對照組細胞凋亡率Fig．6Ratioofapoptosisinblankcontrolgroupof48h圖748h4μmoL組細胞凋亡率Fig．7Ratioofapoptosisin4μmoLgroupof48h圖848h8μmoL組細胞凋亡率Fig．8Ratioofapoptosisin8μmoLgroupof48h3討論BMA主要見于烏頭、附子等中藥煎煮后的湯液中，烏頭附子在未經(jīng)充分蒸煮前所含的主要成分為毒性較強的雙酯型生物堿如烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿等，而在蒸煮40min過程中逐漸變成單酯型生物堿如苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰新烏頭原堿以及苯甲酰次烏頭原堿，其中以苯甲酰新烏頭原堿上升幅度及最終質(zhì)量分?jǐn)?shù)最大，約為1022.57mg/kg［14］．藥物動力學(xué)及毒理學(xué)表明，烏頭堿的中毒劑量低于半數(shù)有效治療劑量，但水解后的烏頭堿的毒性只有原烏頭堿的1/2000，第6期馬鳳鳴，等:苯甲酰新烏頭原堿對骨髓瘤細胞RPMI8226增殖及凋亡的影響584

圖324h空白對照組細胞凋亡率Fig．3Ratioofapoptosisinblankcontrolgroupof24h圖424h4μmoL組細胞凋亡率Fig．4Ratioofapoptosisin4μmoLgroupof24h圖524h8μmoL組細胞凋亡率Fig．5Ratioofapoptosisin8μmoLgroupof24h圖648h空白對照組細胞凋亡率Fig．6Ratioofapoptosisinblankcontrolgroupof48h圖748h4μmoL組細胞凋亡率Fig．7Ratioofapoptosisin4μmoLgroupof48h圖848h8μmoL組細胞凋亡率Fig．8Ratioofapoptosisin8μmoLgroupof48h3討論BMA主要見于烏頭、附子等中藥煎煮后的湯液中，烏頭附子在未經(jīng)充分蒸煮前所含的主要成分為毒性較強的雙酯型生物堿如烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿等，而在蒸煮40min過程中逐漸變成單酯型生物堿如苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰新烏頭原堿以及苯甲酰次烏頭原堿，其中以苯甲酰新烏頭原堿上升幅度及最終質(zhì)量分?jǐn)?shù)最大，約為1022.57mg/kg［14］．藥物動力學(xué)及毒理學(xué)表明，烏頭堿的中毒劑量低于半數(shù)有效治療劑量，但水解后的烏頭堿的毒性只有原烏頭堿的1/2000，第6期馬鳳鳴，等:苯甲酰新烏頭原堿對骨髓瘤細胞RPMI8226增殖及凋亡的影響584

圖324h空白對照組細胞凋亡率Fig．3Ratioofapoptosisinblankcontrolgroupof24h圖424h4μmoL組細胞凋亡率Fig．4Ratioofapoptosisin4μmoLgroupof24h圖524h8μmoL組細胞凋亡率Fig．5Ratioofapoptosisin8μmoLgroupof24h圖648h空白對照組細胞凋亡率Fig．6Ratioofapoptosisinblankcontrolgroupof48h圖748h4μmoL組細胞凋亡率Fig．7Ratioofapoptosisin4μmoLgroupof48h圖848h8μmoL組細胞凋亡率Fig．8Ratioofapoptosisin8μmoLgroupof48h3討論BMA主要見于烏頭、附子等中藥煎煮后的湯液中，烏頭附子在未經(jīng)充分蒸煮前所含的主要成分為毒性較強的雙酯型生物堿如烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿等，而在蒸煮40min過程中逐漸變成單酯型生物堿如苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰新烏頭原堿以及苯甲酰次烏頭原堿，其中以苯甲酰新烏頭原堿上升幅度及最終質(zhì)量分?jǐn)?shù)最大，約為1022.57mg/kg［14］．藥物動力學(xué)及毒理學(xué)表明，烏頭堿的中毒劑量低于半數(shù)有效治療劑量，但水解后的烏頭堿的毒性只有原烏頭堿的1/2000，第6期馬鳳鳴，等:苯甲酰新烏頭原堿對骨髓瘤細胞RPMI8226增殖及凋亡的影響584

【參考文獻】

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1 關(guān)心;楊同華;張愛玲;蘇勉誠;趙仁彬;張超然;賀利利;;附子中的新烏頭堿對K562細胞增殖和凋亡的影響[J];北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2015年07期

2 張霞;陳迎平;;HPLC同時測定人血漿中新烏頭堿、烏頭堿、次烏頭堿和苯甲酰新烏頭原堿的含量[J];中藥材;2014年08期

3 黃智莉;陳志雄;于天啟;戴Z

本文編號：2831459