本文主要分為兩部分,第一部分為理論探析,具體研究內(nèi)容如下:目的:研究脾和腦之間的聯(lián)系,發(fā)現(xiàn)其相關(guān)性,探討腦病從脾論治的理論性、科學(xué)性和臨床應(yīng)用的合理性,為健脾益氣法治療腦缺血再灌注的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù),也為腦血管病的臨床防治提供新思路和新方法。方法:通過研究《內(nèi)經(jīng)》中對(duì)脾與腦的認(rèn)識(shí)以及后世醫(yī)家對(duì)脾、腦的研究,挖掘脾和腦之間的聯(lián)系,并在此基礎(chǔ)上提出“脾腦相關(guān)”思想,進(jìn)一步提出“腦病從脾論治”這一新理念。結(jié)果:脾與腦生理上密切相關(guān),脾與腦病理上也密切相關(guān)。結(jié)論:從《內(nèi)經(jīng)》以及后世醫(yī)家對(duì)“脾腦相關(guān)”“腦病從脾論治”的認(rèn)識(shí),可以推斷出健脾益氣法治療中風(fēng)具有有力的辨證性、獨(dú)特性與可行性。從脾論治腦病也為現(xiàn)代諸多腦病的治療展現(xiàn)出了新的思路與方法。對(duì)于有效改善腦病的治愈率和提高患者的生存質(zhì)量有著較為深遠(yuǎn)的影響。第二部分為實(shí)驗(yàn)研究,具體研究內(nèi)容如下:目的:觀察健脾益氣方大鼠腦缺血再灌注(I/R)損傷后腦組織神經(jīng)細(xì)胞外基質(zhì)Fibulin-5、P-Akt、P-BAD及凋亡因子Bcl-2、caspase-3表達(dá)情況的影響,探討健脾益氣法組方對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后神經(jīng)細(xì)胞凋亡的干預(yù)機(jī)理。方法:將120只雄性SD大鼠隨機(jī)分為Sham組(假手術(shù)組)24只、MCAO組(模型制備組)96只。采用線栓法制備MCAO模型,造模成功后按大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分進(jìn)行隨機(jī)分層,根據(jù)分層結(jié)果隨機(jī)分為MCAO組、陽性藥物組(依達(dá)拉奉組)、健脾益氣方高劑量組、低劑量組4組。分3天、7天后分批處死大鼠,處死前進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評(píng)分,運(yùn)用HE染色法進(jìn)行病理組織學(xué)觀察,免疫組化法檢測腦組織神經(jīng)細(xì)胞外基質(zhì)Fibulin-5、P-Akt、P-BAD及凋亡因子Bcl-2、caspase-3的表達(dá),采用Tunel染色法檢測凋亡的神經(jīng)細(xì)胞。結(jié)果:3天組:與Sham組相比,MCAO組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分明顯增加(P0.01),神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)明顯升高,Fibulin-5蛋白表達(dá)減少,caspase-3蛋白表達(dá)顯著增加,P-Akt、P-BAD、Bcl-2蛋白表達(dá)明顯減少,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01);與MCAO組相比,陽性藥物組和健脾益氣方各劑量組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分無明顯降低(P0.05),神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)無降低。陽性藥物組和健脾益氣方各劑量組腦組織Fibulin-5,P-Akt,Bcl-2蛋白表達(dá)無明顯增高,caspase-3蛋白表達(dá)無明顯減少,差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同MCAO組比較,依達(dá)拉奉和健脾益氣方各劑量組腦組織P-BAD蛋白含量明顯增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。7天組:與Sham組相比,MCAO組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分明顯增加(P0.01),神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)明顯升高,Fibulin-5表達(dá)減少,caspase-3表達(dá)顯著增加,P-Akt、P-BAD、Bcl-2表達(dá)明顯減少,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01);與MCAO組相比,陽性藥物組和健脾益氣方各劑量組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分降低(P0.05),神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)明顯降低。陽性藥物組和健脾益氣方各劑量組腦組織Fibulin-5蛋白表達(dá)增高,caspase-3蛋白表達(dá)顯著減少,P-Akt、P-BAD、Bcl-2蛋白表達(dá)明顯增高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01或P0.05)。結(jié)論:健脾益氣方可以改善(I/R)大鼠神經(jīng)功能缺損情況,促進(jìn)神經(jīng)功能的恢復(fù),減少神經(jīng)細(xì)胞損傷。健脾益氣方上調(diào)細(xì)胞外基質(zhì)Fibulin-5的表達(dá),減少caspase-3蛋白表達(dá),增加P-Akt、P-BAD、Bcl-2蛋白表達(dá),降低凋亡指數(shù)AI,提示健脾益氣方可能通過穩(wěn)定神經(jīng)元細(xì)胞外基質(zhì),從而抑制細(xì)胞發(fā)生凋亡,起到保護(hù)腦缺血損傷的作用。健脾益氣方對(duì)腦缺血的保護(hù)和治療作用從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看與給藥時(shí)間之間有明顯的時(shí)效關(guān)系,3天組多無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而7天組出現(xiàn)明顯改善。因而健脾益氣方用于治療時(shí)用藥時(shí)間不宜過短,建議不少于7天為宜。
【學(xué)位單位】：湖南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

注 ：1Sham 組 ， 2Mcao 組 ， 3 低 劑 量 組， 4 高 劑 量 組 ， 5 陽 性 藥 物 組圖 1 病 理 組 織 形 態(tài) 觀 察 （ HE 染 色 法 × 400）七天組 ：光學(xué)顯微鏡下觀察，可見 Sham 組神經(jīng)細(xì)胞形態(tài) 、排列度、胞核位置正常，核仁深染，呈現(xiàn)藍(lán)紫色，胞漿呈粉紅色、核膜清見，均未見炎性細(xì)胞浸潤現(xiàn)象。Mcao 組腦組織缺血皮質(zhì)區(qū)大量神經(jīng)細(xì)

注 ：1Sham 組 ， 2Mcao 組 ， 3 低 劑 量 組， 4 高 劑 量 組 ， 5 陽 性 藥 物 組圖 2 病 理 組 織 形 態(tài) 觀 察 （ HE 染 色 法 × 400）5.3 健脾益氣法組方對(duì)腦缺血再灌注大鼠 Fibulin-5，P-AP-BAD，Bcl-2 和 caspase-3 蛋白表達(dá)水平的影響

注 ：1Sham 組 ， 2Mcao 組 ， 3 低 劑 量 組， 4 高 劑 量 組 ， 5 陽 性 藥 物 組圖 2 三 天 組 Fibulin-5 蛋 白 的 表 達(dá) （ 免 疫 組 化 ×400）

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本文編號(hào)：2830082