馬甲子(Paliurus ramosissimus(Lour.)Poir)為鼠李科馬甲子屬植物,主含三萜類,總黃酮和香豆素類成分,用于治療瘡癰潰瘍,解毒消腫等。經(jīng)課題組前期研究發(fā)現(xiàn),白樺脂酸和馬甲子素為馬甲子中具有較好抗腫瘤活性的化學(xué)成分。以該兩種成分為指標(biāo),首先對半仿生法提取馬甲子的各工藝參數(shù)進(jìn)行單因素考察,進(jìn)一步采用L9(3~4)正交試驗進(jìn)行優(yōu)化,最終確定提取工藝為:鮮葉粉碎,經(jīng)5倍量95%乙醇,在pH為2條件下回流提取80 min,藥渣繼續(xù)在pH為8條件下回流提取40 min,合并兩次提取液,放冷過濾,濃縮并冷凍干燥成浸膏,結(jié)果表明,該工藝穩(wěn)定可行。經(jīng)工藝對比,半仿生法優(yōu)于冷浸法,優(yōu)于超聲法。通過比較不同大孔樹脂對白樺脂酸和馬甲子素的靜態(tài)吸附及動態(tài)吸附試驗,選用AB-8型大孔樹脂,并得出最佳純化工藝參數(shù)為:馬甲子素濃度16.07μg/mL,白樺脂酸濃度為1023μg/mL,以3 mL/min的速度上樣,上樣量為0.4 g醇提物/g干樹脂,馬甲子素和白樺脂酸的吸附率分別為87.1%和82.03%;用900 mL85%乙醇以3 mL/min的速度洗脫,馬甲子素和白樺脂酸的洗脫率分別為88.23%和73.52%。相比于醇提物,該有效部位中馬甲子素的含量提高了8倍,白樺脂酸的含量提高了5倍,同時,純化過程除去了大量的色素類成分,使其有效部位的性狀也得到改善�，F(xiàn)分別對馬甲子醇提物、乙酸乙酯部位和有效部位進(jìn)行體外抗腫瘤活性檢測,并對馬甲子進(jìn)一步分離純化,得到8個單體成分,MTT法檢測抗腫瘤活性。結(jié)果顯示,以白樺脂酸為母核的五環(huán)三萜類衍生物馬甲子素、馬甲子素A、馬甲子素B和messagenic acid B均表出較好的抑制腫瘤增殖作用,且存在雙取代強于單取代,單取代強于母核的特性。初步建立了馬甲子有效部位的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),擬定馬甲子有效部位中馬甲子素和白樺脂酸的含量分別不少于0.7%和40%,并對3批馬甲子有效部位同時進(jìn)行加速試驗及長期穩(wěn)定性試驗考察,結(jié)果表明,各項檢查均符合規(guī)定。
【學(xué)位單位】：成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R284.2
【部分圖文】：

馬甲子素和白樺脂酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線

馬甲子素溶液（A）和供試品溶液（B）的DVD圖譜

D圖 1.3 白樺脂酸對照品溶液（C）和供試品溶液（D）的 ELSD 圖譜2.1.5 精密度考察精密吸取馬甲子素濃度為 0.0031 mg·mL-1和白樺脂酸濃度為 0.402 mg·mL-1的對照品溶液各 10 μL，連續(xù)進(jìn)樣 6 次，測定馬甲子素和白樺脂酸峰面積的 RSD分別為 1.38%、1.04%，表明儀器精密度良好，數(shù)據(jù)見表 1.2。表 1.2 精密度測定結(jié)果NO. 1 2 3 4 5 6 RSD/%馬甲子素峰面積88.6 86.7 85.9 89.2 87.3 87.5 1.38白樺脂酸峰面積1731 1766 1742 1759 1783 1756 1.042.1.6 重復(fù)性試驗

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2828458