目的:本研究課題通過觀察便秘大鼠肺腸組織神經(jīng)遞質(zhì)及水通道蛋白的變化,分析津虧腸燥,損傷肺陰的病理過程,旨在初步闡明腸病及肺的相關(guān)生物學(xué)基礎(chǔ),并運用名醫(yī)驗方"通便湯"對該模型動物進行干預(yù),從現(xiàn)代醫(yī)學(xué)角度詮釋中醫(yī)學(xué)腸病從肺論治的科學(xué)性。方法:將60只SD大鼠隨機分為正常組20只,造模組40只,用復(fù)方苯已哌啶造模120天,記錄大鼠體重,觀察各組大鼠大便形態(tài)、數(shù)量、含水量變化,隨機抽取正常組、造模組各10只,觀察大鼠腸道傳輸功能,并運用Elisa、免疫組化技術(shù)觀察便秘模型動物肺腸組織神經(jīng)遞質(zhì)SP、VIP及水通道蛋白AQP1、AQP3的變化;將造模組30只大鼠隨機分為模型組、通便湯組、聚乙二醇散劑組,每組10只,藥物干預(yù)治療1月后,記錄、檢測上述指標(biāo)。結(jié)果:1.模型組大鼠排便數(shù)量、大便含水量、大鼠小腸炭墨推進率和結(jié)腸存留糞便較正常組均明顯降低(P0.01)。造模結(jié)束后,模型組肺中SP含量較正常組顯著降低(P0.01),模型組腸組織中SP較正常組降低(P0.05);模型組肺所含的VIP含量較正常組明顯增加(P0.01),結(jié)腸組織中所含的VIP含量較正常組增加(P0.05)。造模結(jié)束后,模型組肺組織中AQP1及結(jié)腸組織中AQP3在著色量及著色程度上均高于正常組(P0.01)。2.藥物干預(yù)4周后,模型組大鼠排便數(shù)量、大便含水量及大鼠小腸炭墨推進率和結(jié)腸存留糞便較正常組均明顯降低(P0.01);通便湯及福松組大鼠排便粒數(shù)、大便含水量及結(jié)腸存留糞便較模型組均明顯改善(P0.01),在大鼠小腸炭墨推進率方面通便湯組與造模組比較統(tǒng)計結(jié)果有顯著差異(P0.01),福松組與模型組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);其中通便湯在改善大鼠排便數(shù)量方面優(yōu)于福松組(P0.01),且通便湯在改善大鼠糞便含水量、大鼠小腸炭墨推進率方面均優(yōu)于福松組(P0.05),而兩組在改善大鼠結(jié)腸存留大便方面無明顯差異(P0.05)。3.藥物干預(yù)4周后,模型組大鼠肺腸組織SP含量較正常組顯著降低(P0.01),VIP含量較正常組顯著升高(P0.01);通便湯及福松干預(yù)后與模型組相比肺組織SP含量均增加,其中通便湯組肺組織SP含量改變較為明顯(P0.01),兩組干預(yù)后大鼠結(jié)腸SP含量較模型組同樣出現(xiàn)明顯上升趨勢(P0.05);治療后福松組及通便湯組大鼠肺腸VIP含量與模型組相比均明顯降低(P0.01),通便湯和福松干預(yù)后兩組肺腸SP、VIP含量變化無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4.免疫組化結(jié)果顯示,模型組肺腸中AQP1及AQP3的IOD值均高于正常組(P0.01),且染色范圍和深度均較正常組增大,通便湯和福松干預(yù)后肺及結(jié)腸組織中水通道含量較模型組均降低(P0.01),通便湯組較福松組降低明顯(P0.01)。Western blot檢測藥物干預(yù)后各組肺AQP1和腸AQP3相關(guān)蛋白表達,結(jié)果顯示模型組肺組織中AQP1和結(jié)腸組織AQP3蛋白表達均較正常組明顯升高(P0.01),通便湯及福松干預(yù)后,肺腸組織中AQP1及AQP3表達較模型組均有所下降,統(tǒng)計結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.應(yīng)用復(fù)方苯乙哌啶成功復(fù)制慢性傳輸型便秘模型,且此藥造模安全穩(wěn)定。2.肺腸神經(jīng)遞質(zhì)SP、VIP及肺AQP1、腸AQP3可能是便秘"腸病及肺"的生物學(xué)基礎(chǔ)。3.通便湯能明顯改善大鼠便秘癥狀,促進小腸蠕動,并能減少結(jié)腸留存大便量,能夠有效的治療慢性傳輸型便秘。4.通便湯治療便秘可能是通過上調(diào)肺腸組織SP含量,下調(diào)肺腸VIP含量及肺AQP1及腸AQP3蛋白含量來達到治療便秘的作用。
【學(xué)位單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R285.5
【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一部分 理論研究
    1. 祖國醫(yī)學(xué)對便秘的認識
        1.1 古代醫(yī)家對便秘病因病機的認識
        1.2 中醫(yī)治療便秘的認識
    2. 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對便秘的認識
        2.1 STC發(fā)病的病因及機理
        2.2 STC現(xiàn)代治療進展
    3. 中醫(yī)藏象理論與便秘的發(fā)病關(guān)系
        3.1 "肺與大腸相表里"的生理病理相關(guān)性
        3.2 "肺與大腸相表里"的相關(guān)機制研究
第二部分 實驗研究
    實驗一、慢性傳輸型便秘模型復(fù)制
        1. 實驗材料和方法
            1.1 實驗動物
            1.2 實驗動物飼養(yǎng)環(huán)境
            1.3 主要實驗儀器及試劑
            1.4 STC大鼠模型的復(fù)制方法
            1.5 觀察指標(biāo)
            1.6 造模成功的標(biāo)準(zhǔn)
            1.7 數(shù)據(jù)處理
        2. 實驗結(jié)果
            2.1 一般情況
            2.2 造模前及造模第120天的各組大鼠24小時糞便數(shù)量及含水量比較
            2.3 造模前后兩組小腸炭墨推進率及結(jié)腸留存大便粒數(shù)比較
        3. 結(jié)論
    實驗二、STC模型大鼠肺腸水通道蛋白及VIP、SP含量測定
        1. 實驗材料和方法
            1.1 主要實驗試劑及儀器
            1.2 實驗標(biāo)本的采取
            1.3 Elisa技術(shù)
            1.4 免疫組化技術(shù)
            1.5 數(shù)據(jù)處理
        2. 實驗結(jié)果
            2.1 Elisa結(jié)果
            2.2 免疫組化結(jié)果
        3. 結(jié)論
    實驗三、通便湯對STC模型大鼠排便時間和糞便的影響
        1. 實驗材料和方法
            1.1 實驗動物
            1.2 實驗動物飼養(yǎng)環(huán)境
            1.3 主要實驗儀器及試劑
            1.4 STC大鼠模型的復(fù)制方法
            1.5 實驗分組及給藥
            1.6 觀察指標(biāo)
            1.7 數(shù)據(jù)處理
        2. 實驗結(jié)果
            2.1 一般情況
            2.2 造模前、造模第120天及藥物干預(yù)4周后各組大鼠24小時糞便數(shù)量及含水量比較
            2.3 藥物干預(yù)后各組小腸炭墨推進率及結(jié)腸留存大便粒數(shù)比較
        3. 結(jié)論
    實驗四、通便湯對STC模型大鼠肺腸組織VIP、SP含量的影響
        1. 實驗材料和方法
            1.1 主要實驗試劑及儀器
            1.2 實驗標(biāo)本的采取
            1.3 Elisa技術(shù)
            1.4 數(shù)據(jù)處理
        2. 實驗結(jié)果
        3. 結(jié)論
    實驗五、通便湯對STC模型大鼠肺腸組織水通道蛋白分布和表達的影響
        1. 實驗材料和方法
            1.1 主要實驗試劑及儀器
            1.2 實驗標(biāo)本的采取
            1.3 免疫組化
            1.4 Western blot
            1.5 數(shù)據(jù)處理
        2. 實驗結(jié)果
            2.1 免疫組化
            2.2 Western blot結(jié)果
        3. 結(jié)論
第三部分 討論部分
    1. 實驗研究的意義
    2. 通便湯組方配伍的規(guī)律
        2.1 主張從肺論治
        2.2 重用白術(shù)
        2.3 避而未用蒽醌類瀉藥
    3. STC模型建立及評價標(biāo)準(zhǔn)
    4. 實驗結(jié)果討論
        4.1 便秘大鼠肺腸SP、VIP、AQP含量變化討論
        4.2 藥物干預(yù)后大便數(shù)量、含水量及腸動力變化討論
        4.3 藥物干預(yù)后大鼠肺腸SP、VIP、AQP含量變化討論
    5. 實驗研究的創(chuàng)新點
    6. 實驗研究的結(jié)論
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果
致謝

【參考文獻】

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