發(fā)布時(shí)間：2020-09-25 19:09

　　 目的探討丹參通絡(luò)解毒湯對心肌缺血再灌注損傷(MIRI)模型大鼠自噬的作用及其機(jī)制。方法通過結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈左前降支的方法建立MIRI模型,采用隨機(jī)數(shù)字表法分為空白組(K組)、假手術(shù)組(S組)、缺血再灌注組(IR組)、丹參通絡(luò)解毒湯組(DTJD組)、自噬抑制劑組(3-MA組),每組10只。除空白組和假手術(shù)組外,其余各組大鼠均通過結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈左前降支的方法,制備心肌缺血再灌注模型。采用電鏡觀察心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu);使用全自動(dòng)生化分析儀測定心肌損傷標(biāo)志物:血漿中肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)和血清中乳酸脫氫酶(LDH);運(yùn)用ELISA法檢測細(xì)胞氧化應(yīng)激水平:丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性;用免疫組化法測定各組大鼠心肌組織LC3蛋白的表達(dá);采用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測心肌Beclin-1mRNA表達(dá);采用Western blot檢測各組大鼠細(xì)胞自噬基因水平:Atg5、Beclin-1和LC3??/LC3?蛋白的表達(dá)。結(jié)果電鏡顯示,DTJD組可以調(diào)節(jié)缺血再灌注損傷大鼠心肌細(xì)胞的自噬,保護(hù)心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu),降低心肌缺血再灌注的損傷。C組與S組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與S組比較,IR組大鼠血清中LDH和CK-MB含量均顯著升高(P0.01);心肌組織SOD水平顯著降低、MDA水平顯著升高(P0.01);心肌組織Beclin-1mRNA表達(dá)增強(qiáng)(P0.01);心肌組織自噬蛋白Atg5、Beclin-1和LC3??/LC3?表達(dá)顯著增強(qiáng)(P0.01);與IR組比較,DTJD組和3-MA組血清中CK-MB及LDH含量明顯降低(P0.01),心肌組織SOD水平增加、MDA水平下降(P0.01);心肌組織Beclin-1mRNA表達(dá)減少(P0.01);自噬蛋白Atg5、Beclin-1和LC3??/LC3?表達(dá)均減少(P0.01)。結(jié)論1.丹參通絡(luò)解毒湯可明顯減少心肌細(xì)胞線粒體的損傷,改善心肌組織的病理狀態(tài),且可影響自噬小體的形態(tài)結(jié)構(gòu)。2.丹參通絡(luò)解毒湯可明顯使SOD上調(diào)、MDA下降,減輕線粒體損傷,使氧化應(yīng)激反應(yīng)減弱,進(jìn)而下調(diào)Atg5蛋白和Beclin-1蛋白以及LC3??/LC3?的比值,抑制MIRI的自噬反應(yīng),從而發(fā)揮保護(hù)受損心肌細(xì)胞的作用。3.丹參通絡(luò)解毒湯可通過下調(diào)Atg5蛋白和Beclin-1蛋白以及LC3??/LC3?的比值,抑制MIRI的自噬反應(yīng),使CK-MB和LDH的水平下降,起到減輕大鼠心肌細(xì)胞的損傷。
【學(xué)位單位】：湖南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

Beclin-1擴(kuò)增曲線

GAPDH擴(kuò)增曲線

圖 2.1 Beclin-1 熔點(diǎn)曲線 圖 2.2 GAPDH 熔點(diǎn)曲線圖 2 RT-PCR 擴(kuò)熔點(diǎn)曲線3.7 Western blot 法檢測大鼠心肌組織中自噬蛋白表達(dá)（1）提取蛋白樣品：把心臟組織從-80℃冰箱中取出并在冰上切碎組織

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 牟婕;馮文靜;王珊;馮美蘋;毛擁軍;;自噬調(diào)控衰老的研究進(jìn)展[J];中華老年多器官疾病雜志;2019年01期

2 李黎;季漪;李文婷;馬艷霞;李沐涵;吳勉華;;基于細(xì)胞自噬的中醫(yī)藥抗腫瘤作用研究進(jìn)展[J];中華中醫(yī)藥雜志;2019年01期

3 汪艷;;調(diào)控自噬在臨床肝病治療性應(yīng)用的轉(zhuǎn)化研究[J];肝臟;2019年07期

4 韓蘇夏;蔡夢嬌;;自噬在腫瘤治療策略中的角色[J];西部醫(yī)學(xué);2018年09期

5 周岐鳴;劉洋;季光;宋海燕;;調(diào)節(jié)自噬改善非酒精性脂肪性肝病的藥物研究進(jìn)展[J];中華中醫(yī)藥學(xué)刊;2018年10期

6 李曉瓊;何玲玲;李新毅;;自噬與中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病研究進(jìn)展[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2018年10期

7 馬文科;戴舒惠;羅鵬;楊悅凡;費(fèi)舟;;線粒體自噬的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2017年06期

8 付婉;董笛;趙穎;;自噬的相關(guān)分子機(jī)制[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2017年05期

9 方聰聰;毛善平;董慧敏;劉寶輝;王舜;;線粒體自噬與中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病關(guān)系的研究進(jìn)展[J];卒中與神經(jīng)疾病;2017年02期

10 李旭卉;吳習(xí)習(xí);張凱;羅海霞;李敏;;線粒體自噬與癌癥關(guān)系的研究進(jìn)展[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2017年09期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 張興;鄭紅剛;花寶金;;自噬與肺癌[A];第十七屆全國中西醫(yī)結(jié)合腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)摘要集[C];2019年

2 肖伊寧;呂佩源;;選擇性自噬的研究進(jìn)展[A];7th中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)全國中青年神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)暨第十屆全國神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病與腦脊液細(xì)胞學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2014年

3 郭云良;;“營養(yǎng)與自噬”淺析[A];第十屆全國中西醫(yī)結(jié)合營養(yǎng)學(xué)術(shù)會(huì)議論文資料匯編[C];2019年

4 胡成楓;胡春蘭;陳良標(biāo);;自噬在斑馬魚細(xì)胞冷應(yīng)激過程中的作用機(jī)制探究[A];2017年中國水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2017年

5 肖伊寧;呂佩源;;選擇性自噬的研究進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十七次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下）[C];2014年

6 秦正紅;粱中琴;陶陸陽;黃強(qiáng);劉春風(fēng);蔣星紅;倪宏;邢春根;;自噬在細(xì)胞生存與死亡中的作用[A];中國藥理學(xué)會(huì)第九次全國會(huì)員代表大會(huì)暨全國藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

7 秦正紅;;自噬與腫瘤和神經(jīng)細(xì)胞生存——藥物作用的新靶位[A];全國生化與分子藥理學(xué)藥物靶點(diǎn)研討會(huì)論文摘要集[C];2008年

8 余慧芬;唐李;李妍;;自噬現(xiàn)象對腫瘤發(fā)生影響的研究進(jìn)展[A];2017第七屆泛環(huán)渤海生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2017年

9 王菲菲;邱學(xué)敏;王凌;;自噬對骨代謝的調(diào)節(jié)作用[A];第9屆中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)婦產(chǎn)科專業(yè)委員會(huì)第二次學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2017年

10 申森森;李林楠;徐林楠;白玉;劉虎威;;基于氣相色譜-高分辨質(zhì)譜的饑餓誘導(dǎo)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞自噬過程的代謝組學(xué)研究[A];第21屆全國色譜學(xué)術(shù)報(bào)告會(huì)及儀器展覽會(huì)會(huì)議論文集[C];2017年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 李潔尉　通訊員 周飛;花櫚木通過“自噬”殺死癌細(xì)胞[N];科學(xué)時(shí)報(bào);2011年

2 王建新 主持;“自噬”的快車剛剛啟動(dòng)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2016年

3 記者 周潔;解密“自噬”，抗癌治病更近一步[N];河北日報(bào);2016年

4 記者 陸琦 見習(xí)記者 谷雙雙;細(xì)菌通過誘導(dǎo)線粒體自噬求存活[N];中國科學(xué)報(bào);2019年

5 本報(bào)記者 房琳琳;“自噬機(jī)制”帶來對抗衰老新希望[N];科技日報(bào);2016年

6 生命學(xué)院;俞立課題組在《科學(xué)》發(fā)文揭示自噬調(diào)控的重要機(jī)制[N];新清華;2012年

7 本報(bào)實(shí)習(xí)生 劉如楠 記者 李晨陽;最新研究揭秘植物是怎樣衰老的[N];中國科學(xué)報(bào);2019年

8 本報(bào)首席記者 唐聞佳;上海與新科諾獎(jiǎng)得主頗有學(xué)術(shù)緣[N];文匯報(bào);2016年

9 記者 陶婷婷;成功揭示代謝降解調(diào)控新機(jī)制[N];上海科技報(bào);2013年

10 記者 白毅;浙大二院發(fā)現(xiàn)大氣顆粒污染誘導(dǎo)呼吸道自噬性損傷新機(jī)制[N];中國醫(yī)藥報(bào);2015年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 張海;鎘通過抑制自噬流和激活A(yù)kt-Beclin1通路誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞自噬關(guān)聯(lián)凋亡的機(jī)理研究[D];南京師范大學(xué);2019年

2 隋天琪;高爾基體膜蛋白1通過影響自噬調(diào)控抗腫瘤免疫應(yīng)答的機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2019年

3 趙陽;水痘-帶狀皰疹病毒（VZV）感染與細(xì)胞自噬的相關(guān)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2019年

4 張華璐;鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體Zip7對線粒體自噬的調(diào)控作用及分子機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2019年

5 張斌;自噬在高碘誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞及大鼠海馬組織凋亡中的作用研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2019年

6 李琦;MST1激活JNK/p53通路抑制線粒體自噬調(diào)控直腸癌細(xì)胞生長的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2019年

7 許悅;沙門氏菌新型效應(yīng)蛋白揭示細(xì)菌自噬通路機(jī)制的研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2019年

8 李芮冰;Sirtuin 3通過調(diào)節(jié)Bnip3介導(dǎo)的線粒體自噬改善非酒精性脂肪性肝病的機(jī)制研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2019年

9 閆冬瑩;錳誘導(dǎo)的α-synuclein蛋白寡聚體與自噬的相互作用對神經(jīng)細(xì)胞損傷的分子機(jī)制研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2019年

10 高祥;鑭對大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)細(xì)胞自噬水平的影響及其相關(guān)機(jī)制研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2019年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張婧婷;JNK促進(jìn)甲型流感病毒復(fù)制的分子機(jī)制[D];揚(yáng)州大學(xué);2019年

2 周鈺奇;硒對金黃色葡萄球菌感染的奶牛乳腺上皮細(xì)胞自噬影響的研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2019年

3 余鑫;自噬在機(jī)械通氣致大鼠腦組織神經(jīng)元凋亡中的作用[D];揚(yáng)州大學(xué);2019年

4 王婷;自噬或鐵死亡協(xié)同的光敏抗腫瘤活性研究[D];南京師范大學(xué);2019年

5 陳興興;草魚細(xì)胞中活化的STAT3能通過對Bcl-2進(jìn)行調(diào)控進(jìn)而緩解自噬[D];南昌大學(xué);2019年

6 凌仕誠;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)自噬與凋亡緩解高脂誘導(dǎo)黃顙魚腸道脂肪沉積的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2019年

7 馮婭琳;褐飛虱線粒體自噬相關(guān)基因的克隆與功能研究[D];中國計(jì)量大學(xué);2018年

8 劉詩語;氯化鑭誘導(dǎo)的神經(jīng)元氧化應(yīng)激對JNK相關(guān)信號通路活化狀態(tài)和自噬相關(guān)基因表達(dá)水平的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2019年

9 周冰倩;自噬在蛋白尿誘導(dǎo)的腎間質(zhì)纖維化中作用的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2019年

10 牛佳媛;七氟醚后處理通過IRE1/JNK/beclin1信號通路調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激-自噬減輕新生大鼠缺血缺氧性腦損傷[D];中國醫(yī)科大學(xué);2019年

本文編號：2826949