目的探討丹參通絡解毒湯對心肌缺血再灌注損傷(MIRI)模型大鼠自噬的作用及其機制。方法通過結扎左冠狀動脈左前降支的方法建立MIRI模型,采用隨機數(shù)字表法分為空白組(K組)、假手術組(S組)、缺血再灌注組(IR組)、丹參通絡解毒湯組(DTJD組)、自噬抑制劑組(3-MA組),每組10只。除空白組和假手術組外,其余各組大鼠均通過結扎左冠狀動脈左前降支的方法,制備心肌缺血再灌注模型。采用電鏡觀察心肌細胞超微結構;使用全自動生化分析儀測定心肌損傷標志物:血漿中肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)和血清中乳酸脫氫酶(LDH);運用ELISA法檢測細胞氧化應激水平:丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性;用免疫組化法測定各組大鼠心肌組織LC3蛋白的表達;采用實時熒光定量逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)方法檢測心肌Beclin-1mRNA表達;采用Western blot檢測各組大鼠細胞自噬基因水平:Atg5、Beclin-1和LC3??/LC3?蛋白的表達。結果電鏡顯示,DTJD組可以調節(jié)缺血再灌注損傷大鼠心肌細胞的自噬,保護心肌細胞結構,降低心肌缺血再灌注的損傷。C組與S組的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);與S組比較,IR組大鼠血清中LDH和CK-MB含量均顯著升高(P0.01);心肌組織SOD水平顯著降低、MDA水平顯著升高(P0.01);心肌組織Beclin-1mRNA表達增強(P0.01);心肌組織自噬蛋白Atg5、Beclin-1和LC3??/LC3?表達顯著增強(P0.01);與IR組比較,DTJD組和3-MA組血清中CK-MB及LDH含量明顯降低(P0.01),心肌組織SOD水平增加、MDA水平下降(P0.01);心肌組織Beclin-1mRNA表達減少(P0.01);自噬蛋白Atg5、Beclin-1和LC3??/LC3?表達均減少(P0.01)。結論1.丹參通絡解毒湯可明顯減少心肌細胞線粒體的損傷,改善心肌組織的病理狀態(tài),且可影響自噬小體的形態(tài)結構。2.丹參通絡解毒湯可明顯使SOD上調、MDA下降,減輕線粒體損傷,使氧化應激反應減弱,進而下調Atg5蛋白和Beclin-1蛋白以及LC3??/LC3?的比值,抑制MIRI的自噬反應,從而發(fā)揮保護受損心肌細胞的作用。3.丹參通絡解毒湯可通過下調Atg5蛋白和Beclin-1蛋白以及LC3??/LC3?的比值,抑制MIRI的自噬反應,使CK-MB和LDH的水平下降,起到減輕大鼠心肌細胞的損傷。
【學位單位】：湖南中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

Beclin-1擴增曲線

GAPDH擴增曲線

圖 2.1 Beclin-1 熔點曲線 圖 2.2 GAPDH 熔點曲線圖 2 RT-PCR 擴熔點曲線3.7 Western blot 法檢測大鼠心肌組織中自噬蛋白表達（1）提取蛋白樣品：把心臟組織從-80℃冰箱中取出并在冰上切碎組織

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 牟婕;馮文靜;王珊;馮美蘋;毛擁軍;;自噬調控衰老的研究進展[J];中華老年多器官疾病雜志;2019年01期

2 李黎;季漪;李文婷;馬艷霞;李沐涵;吳勉華;;基于細胞自噬的中醫(yī)藥抗腫瘤作用研究進展[J];中華中醫(yī)藥雜志;2019年01期

3 汪艷;;調控自噬在臨床肝病治療性應用的轉化研究[J];肝臟;2019年07期

4 韓蘇夏;蔡夢嬌;;自噬在腫瘤治療策略中的角色[J];西部醫(yī)學;2018年09期

5 周岐鳴;劉洋;季光;宋海燕;;調節(jié)自噬改善非酒精性脂肪性肝病的藥物研究進展[J];中華中醫(yī)藥學刊;2018年10期

6 李曉瓊;何玲玲;李新毅;;自噬與中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病研究進展[J];中風與神經(jīng)疾病雜志;2018年10期

7 馬文科;戴舒惠;羅鵬;楊悅凡;費舟;;線粒體自噬的研究進展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2017年06期

8 付婉;董笛;趙穎;;自噬的相關分子機制[J];中國生物化學與分子生物學報;2017年05期

9 方聰聰;毛善平;董慧敏;劉寶輝;王舜;;線粒體自噬與中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病關系的研究進展[J];卒中與神經(jīng)疾病;2017年02期

10 李旭卉;吳習習;張凱;羅海霞;李敏;;線粒體自噬與癌癥關系的研究進展[J];動物醫(yī)學進展;2017年09期

相關會議論文 前10條

1 張興;鄭紅剛;花寶金;;自噬與肺癌[A];第十七屆全國中西醫(yī)結合腫瘤學術大會摘要集[C];2019年

2 肖伊寧;呂佩源;;選擇性自噬的研究進展[A];7th中華醫(yī)學會神經(jīng)病學分會全國中青年神經(jīng)病學學術大會暨第十屆全國神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病與腦脊液細胞學學術大會論文匯編[C];2014年

3 郭云良;;“營養(yǎng)與自噬”淺析[A];第十屆全國中西醫(yī)結合營養(yǎng)學術會議論文資料匯編[C];2019年

4 胡成楓;胡春蘭;陳良標;;自噬在斑馬魚細胞冷應激過程中的作用機制探究[A];2017年中國水產(chǎn)學會學術年會論文摘要集[C];2017年

5 肖伊寧;呂佩源;;選擇性自噬的研究進展[A];中華醫(yī)學會第十七次全國神經(jīng)病學學術會議論文匯編（下）[C];2014年

6 秦正紅;粱中琴;陶陸陽;黃強;劉春風;蔣星紅;倪宏;邢春根;;自噬在細胞生存與死亡中的作用[A];中國藥理學會第九次全國會員代表大會暨全國藥理學術會議論文集[C];2007年

7 秦正紅;;自噬與腫瘤和神經(jīng)細胞生存——藥物作用的新靶位[A];全國生化與分子藥理學藥物靶點研討會論文摘要集[C];2008年

8 余慧芬;唐李;李妍;;自噬現(xiàn)象對腫瘤發(fā)生影響的研究進展[A];2017第七屆泛環(huán)渤海生物化學與分子生物學會學術交流會論文集[C];2017年

9 王菲菲;邱學敏;王凌;;自噬對骨代謝的調節(jié)作用[A];第9屆中國中西醫(yī)結合學會婦產(chǎn)科專業(yè)委員會第二次學術會議論文集[C];2017年

10 申森森;李林楠;徐林楠;白玉;劉虎威;;基于氣相色譜-高分辨質譜的饑餓誘導小鼠胚胎成纖維細胞自噬過程的代謝組學研究[A];第21屆全國色譜學術報告會及儀器展覽會會議論文集[C];2017年

相關重要報紙文章 前10條

1 記者 李潔尉　通訊員 周飛;花櫚木通過“自噬”殺死癌細胞[N];科學時報;2011年

2 王建新 主持;“自噬”的快車剛剛啟動[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2016年

3 記者 周潔;解密“自噬”，抗癌治病更近一步[N];河北日報;2016年

4 記者 陸琦 見習記者 谷雙雙;細菌通過誘導線粒體自噬求存活[N];中國科學報;2019年

5 本報記者 房琳琳;“自噬機制”帶來對抗衰老新希望[N];科技日報;2016年

6 生命學院;俞立課題組在《科學》發(fā)文揭示自噬調控的重要機制[N];新清華;2012年

7 本報實習生 劉如楠 記者 李晨陽;最新研究揭秘植物是怎樣衰老的[N];中國科學報;2019年

8 本報首席記者 唐聞佳;上海與新科諾獎得主頗有學術緣[N];文匯報;2016年

9 記者 陶婷婷;成功揭示代謝降解調控新機制[N];上�？萍紙�;2013年

10 記者 白毅;浙大二院發(fā)現(xiàn)大氣顆粒污染誘導呼吸道自噬性損傷新機制[N];中國醫(yī)藥報;2015年

相關博士學位論文 前10條

1 張海;鎘通過抑制自噬流和激活Akt-Beclin1通路誘導神經(jīng)細胞自噬關聯(lián)凋亡的機理研究[D];南京師范大學;2019年

2 隋天琪;高爾基體膜蛋白1通過影響自噬調控抗腫瘤免疫應答的機制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2019年

3 趙陽;水痘-帶狀皰疹病毒（VZV）感染與細胞自噬的相關研究[D];南方醫(yī)科大學;2019年

4 張華璐;鋅轉運體Zip7對線粒體自噬的調控作用及分子機制研究[D];天津醫(yī)科大學;2019年

5 張斌;自噬在高碘誘導SH-SY5Y細胞及大鼠海馬組織凋亡中的作用研究[D];天津醫(yī)科大學;2019年

6 李琦;MST1激活JNK/p53通路抑制線粒體自噬調控直腸癌細胞生長的研究[D];天津醫(yī)科大學;2019年

7 許悅;沙門氏菌新型效應蛋白揭示細菌自噬通路機制的研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2019年

8 李芮冰;Sirtuin 3通過調節(jié)Bnip3介導的線粒體自噬改善非酒精性脂肪性肝病的機制研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2019年

9 閆冬瑩;錳誘導的α-synuclein蛋白寡聚體與自噬的相互作用對神經(jīng)細胞損傷的分子機制研究[D];中國醫(yī)科大學;2019年

10 高祥;鑭對大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)細胞自噬水平的影響及其相關機制研究[D];中國醫(yī)科大學;2019年

相關碩士學位論文 前10條

1 張婧婷;JNK促進甲型流感病毒復制的分子機制[D];揚州大學;2019年

2 周鈺奇;硒對金黃色葡萄球菌感染的奶牛乳腺上皮細胞自噬影響的研究[D];揚州大學;2019年

3 余鑫;自噬在機械通氣致大鼠腦組織神經(jīng)元凋亡中的作用[D];揚州大學;2019年

4 王婷;自噬或鐵死亡協(xié)同的光敏抗腫瘤活性研究[D];南京師范大學;2019年

5 陳興興;草魚細胞中活化的STAT3能通過對Bcl-2進行調控進而緩解自噬[D];南昌大學;2019年

6 凌仕誠;內(nèi)質網(wǎng)應激介導自噬與凋亡緩解高脂誘導黃顙魚腸道脂肪沉積的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2019年

7 馮婭琳;褐飛虱線粒體自噬相關基因的克隆與功能研究[D];中國計量大學;2018年

8 劉詩語;氯化鑭誘導的神經(jīng)元氧化應激對JNK相關信號通路活化狀態(tài)和自噬相關基因表達水平的影響[D];中國醫(yī)科大學;2019年

9 周冰倩;自噬在蛋白尿誘導的腎間質纖維化中作用的研究[D];中國醫(yī)科大學;2019年

10 牛佳媛;七氟醚后處理通過IRE1/JNK/beclin1信號通路調節(jié)內(nèi)質網(wǎng)應激-自噬減輕新生大鼠缺血缺氧性腦損傷[D];中國醫(yī)科大學;2019年

本文編號：2826949