心腦血管疾病仍然是當今危害人類健康的頭號殺手,探尋和開發(fā)防治心腦血管疾病安全而有效的藥物是醫(yī)藥工作者迫在眉睫的任務。中藥復方是開發(fā)高效創(chuàng)新藥物的源泉,闡明其藥效物質基礎則是其關鍵環(huán)節(jié)和瓶頸。藥對是中藥復方的核心組成部分,反映著復方核心配伍關系,從藥對角度出發(fā)是研究復方物質基礎的重要切入口。在前期“良關系”藥對有效成分群辨識思路的指導下,本論文選擇活血化瘀的經(jīng)典藥對“丹參-降香”為研究對象,以臨床有效、質量穩(wěn)定可控的香丹注射液為研究載體,從藥代動力學角度對丹參-降香藥對在正常及急性血瘀模型大鼠體內的藥效物質基礎進行系統(tǒng)研究,旨在為中藥復方物質基礎研究提供依據(jù)。全文共分3章,作者的主要貢獻如下:1.建立了香丹注射液HPLC-Q-TOF/MS和GC/MS分析方法,對香丹注射液中的基礎物質進行了表征與鑒定,從中鑒定出53個水溶性成分和9個揮發(fā)性成分。以上研究為丹參-降香藥對的質量控制和質量標準的建立提供了基礎物質的可追溯性,也為丹參-降香藥對體內代謝研究奠定了同等條件下方法學基礎。2.建立了大鼠血漿中丹參酚酸類的HPLC分析方法,并采用該方法和擬定的HPLC-Q-TOF/MS法考察了丹參-降香藥對在正常及急性血瘀大鼠體內的代謝輪廓,共鑒定出39個藥物原型成分(主要為酚酸類)及79個藥物代謝產(chǎn)物,主要涉及甲基化、硫酸化以及葡萄糖醛酸化等代謝途徑。比較了丹參-降香藥對在正常及急性血瘀大鼠體內藥物代謝的差異性,結果表明,病理因素會使藥物成分入血增多,消除減慢,作用時間延長。3.采用擬定的HPLC-Q-TOF/MS分析方法研究了丹參-降香藥對在正常及急性血瘀大鼠心、腦、肝、腎的組織分布,共鑒定出24個藥物原型成分及76個藥物代謝產(chǎn)物,主要集中分布于心、肝、腎等器官,其中吸收進入心、腦等靶器官和肝組織的物質為丹參酚酸類成分(如丹參素、迷迭香酸、丹酚酸A等),主要的代謝形式包括甲基化、硫酸化、葡萄糖醛酸化。在急性血瘀大鼠組織中的眾多代謝形式中發(fā)現(xiàn)并證實了異丙基化產(chǎn)物,不僅證實了丹參素異丙酯的存在,還首次發(fā)現(xiàn)了咖啡酸異丙酯。上述研究表明,異丙基化可能為“良關系”藥對丹參-降香方證對應的體內重要和特征性代謝通路。4.采用主成分分析法,借助SPSS統(tǒng)計學軟件分析了大鼠給藥香丹注射液后血漿中變化明顯的藥物成分、內源性應答物、代謝應答物之間的相關性,結合組織分布的研究結果,初步確定丹參-降香藥對體內物質基礎為迷迭香酸、丹酚酸A、丹參素異丙酯、咖啡酸異丙酯、丹酚酸A的甲基化結合單葡萄糖醛酸化物、丹酚酸A的二甲基化產(chǎn)物以及丹酚酸A的二甲基化結合葡萄糖醛酸化產(chǎn)物。5.初步考察了丹參-降香藥對體內物質基礎之一丹參素異丙酯的體內代謝過程,確定其體內代謝產(chǎn)物主要為丹參素及其代謝產(chǎn)物。藥物代謝研究的結果可為丹參素異丙酯的安全性和有效性評估提供有力支撐。同時本研究還構建了人體尿液中丹參素檢測的HPLC-Q-TOF/MS分析方法學,并對缺氧炎癥條件下病人尿液中的丹參素進行了結構確證(見附錄)。
【學位單位】：西北大學
【學位級別】：博士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

31圖 2 丹參素、原兒茶酸、原兒茶醛、香草酸、咖啡酸、阿魏酸的質譜裂解模式多環(huán)酚酸類化合物多環(huán)酚酸的結構特點是結構中含有兩個或兩個以上的芳香環(huán)。通過與對照品保留時間、二級質譜信息的比對，初步確定化合物 28，35，36，38 分別為紫草酸、迷迭香酸、丹酚酸 B 和丹酚酸 A�；衔� 35 在負離子下呈現(xiàn)出一個較強的分子離子峰[M H] (359.0770)，其特征性離子為 m/z 197.0441，179.0334，161.0230，表明化合物 35 的分子離子峰分 別 脫 去 了 一 分 子 咖 啡 酰 氧 基 [M H 162(caffeoyl)] ， 一 分 子 咖 啡 酸

32圖 3 迷迭香酸的質譜裂解模式與化合物 35 類似，化合物 31 具有一個明顯的母離子[M H] (417.0839)，其母離子首先丟失一分子 CO2產(chǎn)生 m/z 373.0915([M H CO2] )的碎片離子，該子離子進一步分別脫去 176(未知基團)和一分子丹參素得到子離子 m/z 197.0454[M H CO2 176 (unknown moeity)] 以及 m/z 175.0398[M H CO2 DSS] ，其二級質譜信息與先前研究[167]的丹酚酸 D 的二級質譜信息一致，因而推斷化合物 31為丹酚酸 D，其裂解途徑如圖 4 所示。

33圖 4 丹酚酸 D 的質譜裂解模式化合物 33 和 38 的分子離子峰的質荷比均為 m/z 493.11[M H] ，因而是一對同分異構體。通過與對照品色譜行為及二級質譜信息的比對，確定化合物 38 為丹酚酸 A，其代表性碎片離子 m/z 313.0694[M H CO2 CA] 是母離子通過斷裂一分子咖啡酸而形成，而碎片離子 m/z 295.0602[M H DSS] 是母離子通過斷裂一分子丹參素而形成，丹酚酸 A 的裂解途徑如圖 5 所示�；衔� 33 還產(chǎn)生了一個典型的碎片離子 m/z 277.0503，碎片離子 m/z 277.0503 的出現(xiàn)表明化合物 33中存在一個五元環(huán)醚的結構，因而碎片離子 m/z 295.0601[M H 198(DSS)] 會脫

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 高婧;楊悅;;全球創(chuàng)新藥物研發(fā)趨勢分析[J];中國新藥雜志;2015年24期

2 Han Yan;Yuanyuan Sun;Yuying Ma;Bin Ji;Xiaohong Hou;Zhiguo Yu;Yunli Zhao;;Determination of atractylon in rat plasma by a GC-MS method and its application to a pharmacokinetic study[J];Journal of Pharmaceutical Analysis;2015年05期

3 鄭曉暉;賈璞;白亞軍;;基于傳統(tǒng)君臣佐使組方配伍理論的組合中藥分子化學研究策略[J];西北大學學報(自然科學版);2015年03期

4 蔣蘆荻;賀昱u&;陳茜;陶歐;李貢宇;張燕玲;;基于分子對接技術的高頻降脂藥對作用機制研究[J];中國中藥雜志;2015年12期

5 SU Chun-Yan;MING Qian-Liang;RAHMAN Khalid;HAN Ting;QIN Lu-Ping;;Salvia miltiorrhiza: Traditional medicinal uses, chemistry, and pharmacology[J];Chinese Journal of Natural Medicines;2015年03期

6 Chang-xiao Liu;Rui Liu;Hui-rong Fan;Xue-feng Xiao;Xiao-peng Chen;Hai-yu Xu;Yan-ping Lin;;Network Pharmacology Bridges Traditional Application and Modern Development of Traditional Chinese Medicine[J];Chinese Herbal Medicines;2015年01期

7 王喜軍;;中藥藥效物質基礎研究的系統(tǒng)方法學——中醫(yī)方證代謝組學[J];中國中藥雜志;2015年01期

8 吳巧鳳;宓嘉琪;吳新新;蔣亞奇;;黃連香薷飲抗流感病毒作用的拆方研究[J];中華中醫(yī)藥學刊;2014年09期

9 張波;李佳;劉紅燕;彭艷麗;;降香揮發(fā)油研究進展[J];中國藥師;2014年08期

10 李思銘;徐浩;陳可冀;;The Diagnostic Criteria of Blood-Stasis Syndrome:Considerations for Standardization of Pattern Identification[J];Chinese Journal of Integrative Medicine;2014年07期

相關會議論文 前1條

1 楊志福;田云;楊靜;喬逸;陳敏純;賈艷艷;關月;文愛東;;Cocktail探針評價血瘀證對大鼠肝細胞色素P450的影響[A];2010年中國藥學大會暨第十屆中國藥師周論文集[C];2010年

相關博士學位論文 前3條

1 白亞軍;基于“君臣佐使”配伍理論的藥物分子設計、合成與活性研究[D];西北大學;2014年

2 賈璞;基于“良”關系的丹參—紅花藥對效應物質研究[D];西北大學;2013年

3 南葉飛;君—使化合物用于君—使藥對體內作用機制研究[D];西北大學;2010年

相關碩士學位論文 前3條

1 陳勇勇;丹紅注射液對大鼠腦內神經(jīng)遞質影響及體內代謝研究[D];西北大學;2016年

2 秦方剛;α-細辛醇及其衍生物的設計、合成與抗癲癇活性研究[D];西北大學;2015年

3 張前;“丹參—降香”君—使對藥藥代動力學及作用物質基礎研究[D];西北大學;2010年

本文編號：2825758