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閩北三葉青中蘆丁含量的測(cè)定及其指紋圖譜分析

發(fā)布時(shí)間:2020-09-16 15:15
   藥用植物有效成分的積累受到基因型和環(huán)境等因素的雙重調(diào)控。本研究選定閩北地區(qū)不同產(chǎn)地的三葉青為研究對(duì)象,以蘆丁作為黃酮活性成分的評(píng)價(jià)指標(biāo),分析了閩北8個(gè)不同產(chǎn)區(qū)三葉青蘆丁含量,并建立了閩北地區(qū)間三葉青的指紋圖譜。論文通過(guò)甲醇濃度、超聲功率、提取時(shí)間和料液比四個(gè)單因素試驗(yàn),確定了最優(yōu)蘆丁提取條件,利用HPLC法測(cè)定三葉青中蘆丁的含量,并研究了多種因素對(duì)蘆丁測(cè)定的影響。采用不同萃取劑、色譜柱、萃取方式分析建立了福建省閩北地區(qū)三葉青的HPLC指紋圖譜分析方法。為閩北地區(qū)間不同產(chǎn)地三葉青中蘆丁含量檢測(cè)和三葉青指紋圖譜的制定提供前期的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1、建立了提取三葉青中蘆丁的工藝條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:超聲波提取時(shí)間為20 min、甲醇濃度為60%、料液比為1:50 g/mL、超聲提取功率為324 W,為本試驗(yàn)三葉青中蘆丁的提取最佳工藝條件。采用高效液相色譜法進(jìn)行三葉青蘆丁含量的測(cè)定,其色譜條件為:安捷倫Allsphere ODS-2(250×4.6 mm,5μm)色譜柱;流動(dòng)相為乙腈:0.1%磷酸水溶液(16:84);波長(zhǎng)360 nm;柱溫40℃;流速1 mL/min;進(jìn)樣量10μL。蘆丁濃度在5μg/mL到100μg/mL范圍內(nèi)時(shí),峰面積(у)與蘆丁濃度(х)的回歸方程為Y=16.0853×X-19.0162,R=0.9992;三葉青樣品加標(biāo)回收率為95.00%-99.56%,平均加標(biāo)回收率為98.30%,RSD=1.53%(n=6)。結(jié)果表明,不同產(chǎn)地的三葉青中蘆丁含量為0.36-3.28 mg/g,閩北地區(qū)8個(gè)產(chǎn)地三葉青中蘆丁含量依次為:松溪縣花橋鎮(zhèn)邵武市金杭鎮(zhèn)武夷山市上梅鄉(xiāng)光澤縣司前鎮(zhèn)政和縣外屯鎮(zhèn)順昌縣洋口鎮(zhèn)蒲城縣富嶺鎮(zhèn)邵武市南武夷藥博園。2、利用高效液相色譜儀對(duì)三葉青樣品進(jìn)行指標(biāo)性成分檢測(cè)分析,構(gòu)建了高效液相色譜指紋圖譜方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:采用甲醇40 mL,提取時(shí)間為20min,超聲功率為324 W進(jìn)行超聲波提取三葉青中有效成分。利用高效液相色譜儀進(jìn)行分離各個(gè)組分,色譜條件為:Agilent 5 TC-C18(2)(150×4.6 mm,5μm)色譜柱,0.1%磷酸-乙腈為流動(dòng)相,360 nm波長(zhǎng)檢測(cè)蘆丁,1 mL/min流量,40℃柱箱溫度。三葉青的指紋圖譜分析表明:8批不同產(chǎn)地的三葉青指紋圖譜的相似度在0.815-0.926之間,表明閩北三葉青藥材的指紋圖譜相似度良好,可以為閩北產(chǎn)區(qū)的三葉青種質(zhì)鑒定和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的制定提供一定的依據(jù)。
【學(xué)位單位】:福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:R284

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本文編號(hào):2820013

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