目的:本研究采用黃芪多糖聯(lián)合順鉑的方式處理人卵巢癌SKOV3細(xì)胞,探討黃芪多糖通過調(diào)控細(xì)胞自噬增加卵巢癌SKOV3細(xì)胞對順鉑化療敏感的可能作用機制,為黃芪多糖通過發(fā)揮其抗腫瘤效應(yīng)并對順鉑起到輔助化療增敏作用而應(yīng)用于臨床提供理論依據(jù)。方法:1.MTT法檢測黃芪多糖、順鉑及黃芪多糖聯(lián)合順鉑對卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖抑制的影響;2.流式細(xì)胞術(shù)分別檢測黃芪多糖、順鉑及黃芪多糖聯(lián)合順鉑對卵巢癌SKOV3細(xì)胞的凋亡的影響;3.流式細(xì)胞術(shù)分別檢測黃芪多糖、順鉑及黃芪多糖聯(lián)合順鉑對卵巢癌SKOV3細(xì)胞的周期分布的影響;4.RT-PCR法檢測黃芪多糖、順鉑及黃芪多糖聯(lián)合順鉑對卵巢癌SKOV3細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白Beclin1,LC3Ⅱ,p62的mRNA表達(dá)水平的影響;5.WB法檢測黃芪多糖、順鉑及黃芪多糖聯(lián)合順鉑對卵巢癌SKOV3細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白Beclin1,LC3Ⅱ,p62的表達(dá)水平的影響。結(jié)果:1.MTT結(jié)果示:與對照組相比,黃芪多糖、順鉑及黃芪多糖聯(lián)合順鉑均可明顯抑制卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖(P0.05),聯(lián)合給藥組的抑制作用更加顯著(P0.01);與黃芪多糖、順鉑單獨給藥組相比,黃芪多糖聯(lián)合順鉑給藥對卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖抑制率明顯提高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2.流式細(xì)胞術(shù)凋亡結(jié)果顯示:與對照組相比,黃芪多糖、順鉑及黃芪多糖聯(lián)合順鉑對卵巢癌SKOV3細(xì)胞的凋亡率均明顯增加(P0.05),其中聯(lián)合給藥組的凋亡率顯著增加(P0.01);與黃芪多糖、順鉑單獨給藥組相比,黃芪多糖聯(lián)合順鉑給藥對卵巢癌SKOV3細(xì)胞的凋亡作用更加明顯,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.流式細(xì)胞術(shù)周期分布結(jié)果顯示:與對照組相比,黃芪多糖、順鉑及黃芪多糖聯(lián)合順鉑對卵巢癌SKOV3細(xì)胞均發(fā)生了明顯的周期阻滯,以G0/G1期的阻滯最為明顯,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),其中聯(lián)合給藥組G0/G1期的阻滯顯著(P0.01);與黃芪多糖、順鉑單獨給藥組相比,黃芪多糖聯(lián)合順鉑給藥組對卵巢癌SKOV3細(xì)胞的周期阻滯作用更加明顯,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4.RT-PCR結(jié)果顯示:與對照組相比,黃芪多糖、順鉑及黃芪多糖聯(lián)合順鉑使卵巢癌SKOV3細(xì)胞的Beclin1、LC3Ⅱ基因表達(dá)上調(diào),P62基因表達(dá)下調(diào),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),聯(lián)合給藥組的上述變化更加顯著(P0.01),與黃芪多糖、順鉑單獨給藥組相比,黃芪多糖聯(lián)合順鉑給藥組對卵巢癌SKOV3細(xì)胞上述基因的調(diào)控作用非常明顯,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。5.WB結(jié)果顯示:與對照組相比,黃芪多糖、順鉑及黃芪多糖聯(lián)合順鉑使卵巢癌SKOV3細(xì)胞的Beclin1、LC3Ⅱ蛋白表達(dá)上調(diào),P62蛋白的表達(dá)下調(diào),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),聯(lián)合給藥組的上述變化更加顯著(P0.01);與黃芪多糖、順鉑單獨給藥組相比,黃芪多糖聯(lián)合順鉑給藥對卵巢癌SKOV3細(xì)胞上述蛋白的調(diào)控作用也非常明顯,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:黃芪多糖可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬來增加卵巢癌SKOV3細(xì)胞對順鉑的化療敏感性,這一作用的可能機制是通過上調(diào)自噬相關(guān)蛋白Beclin1,LC3Ⅱ,下調(diào)自噬標(biāo)記蛋白P62,增強卵巢癌SKOV3細(xì)胞自噬活性,從而增加卵巢癌SKOV3細(xì)胞對順鉑化療的敏感性。
【學(xué)位單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R285.5

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