紅花為菊科紅花屬植物紅花的干燥花,具有活血通經(jīng)、逐瘀止痛之功效,是一種藥食兩用的植物資源。蜂花粉系蜜蜂從蜜源植物花藥中采集的生殖細胞,經(jīng)其特殊加工后形成的淡黃色團狀物。多糖作為蜂花粉中有效的活性成分,具有調(diào)節(jié)免疫、抗氧化、抗炎、抗病毒等多種生物學活性。這些生物學活性與抗腫瘤作用有密切關(guān)系。本課題組前期實驗研究已發(fā)現(xiàn)紅花蜂花粉多糖的均一組分PBPCⅡ具有顯著的體外抗腫瘤活性,但PBPCⅡ是否具有體內(nèi)抗腫瘤作用及作用機制研究尚不清楚,有必要進行進一步的探索研究。目的:觀察云南產(chǎn)紅花蜂花粉多糖組分PBPCⅡ?qū)180荷瘤小鼠的腫瘤抑制作用,并在細胞與分子水平上研究其抗腫瘤作用機制。方法:取雌性昆明種小白鼠60只,體質(zhì)量18-22 g。采用瘤塊接種法,除空白對照組外,其余小鼠于右腋下接種S180肉瘤瘤塊建立實體腫瘤模型,隨機分為模型組、環(huán)磷酰胺(CTX)組(30 mg/kg)和PBPCⅡ低、中、高劑量組(100、200、400 mg/kg),每組10只。連續(xù)給藥14 d。末次給藥后,禁食不禁水24 h,稱體質(zhì)量,采血后,斷頸處死小鼠,剖取腫瘤塊及胸腺、脾臟各組織并稱質(zhì)量,分別計算抑瘤率和免疫器官指數(shù)。通過ELISA法檢測小鼠血清IL-1α、IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α、VEGF的水平,RT-qPCR實驗檢測腫瘤組織bax、bcl-2、c-myc、p53相關(guān)基因mRNA表達水平變化,Western Blot實驗檢測腫瘤組織Bax、Bcl-2、C-myc、P53相關(guān)基因蛋白的表達水平,HE染色觀察S180荷瘤小鼠腫瘤組織的病理組織學變化。結(jié)果:PBPCⅡ低、中、高劑量組均有一定的抑制腫瘤生長作用,抑瘤率分別為37.44%,42.55%,54.01%,并能升高小鼠胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)。ELISA結(jié)果顯示,與腫瘤模型組比較,PBPCⅡ可提高荷瘤小鼠血清中IL-1α、IL-2、IFN-γ、TNF-α的水平,降低血清IL-6、VEGF水平。RT-qPCR結(jié)果顯示,與腫瘤模型組相比,PBPCⅡ能明顯促進bax、p53 mRNA表達,降低bcl-2、c-myc mRNA的表達量。Western Blot結(jié)果顯示,與腫瘤模型組相比,PBPCⅡ能明顯促進Bax、P53蛋白表達,降低Bcl-2、C-myc蛋白表達量。HE染色結(jié)果顯示,與腫瘤模型組相比較,PBPCⅡ組腫瘤細胞表現(xiàn)出細胞凋亡、壞死的形態(tài)學改變。結(jié)論:PBPCⅡ能夠明顯抑制S180肉瘤小鼠腫瘤的生長,具有較好的抗腫瘤作用。調(diào)節(jié)機體免疫功能、誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡可能是其發(fā)揮抗腫瘤作用的途徑之一。
【學位單位】：大理大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

圖 1 末次給藥后腫瘤模型組與高劑量組小鼠對比圖3.2 PBPCII 對 S180 荷瘤小鼠體質(zhì)量的影響結(jié)果見表 7。結(jié)果表明，給藥前各組小鼠體質(zhì)量差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；給藥后 PBPC 各劑量組與 CTX 組比較，體質(zhì)量顯著增加（P＜0.05）；與腫瘤模型

圖 2 PBPCII 對 S180 荷瘤小鼠實體瘤的抑制作用（注：Low 100 mg/kg；Middle 200 mg/kg；High 400 mg/kg；CTX 30 mg/kg ）3.4 PBPCII 對 S180 荷瘤小鼠血清細胞因子水平的影響結(jié)果見表 9、表 10。結(jié)果表明，與腫瘤模型組相較，PBPCII 各劑量組的 IL-1

圖 3 PBPCII 對 S180 荷瘤小鼠肉瘤組織 bax 基因 mRNA 表達的影響（注：與腫瘤模型組：*P＜0.05；與 CTX 組：#P＜0.05）II 對 S180 荷瘤小鼠肉瘤組織 bcl-2 基因 mRNA 表達水平的圖 4。

【參考文獻】

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本文編號：2819147