XXM及其單體對(duì)2VO大鼠作用及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間：2020-09-14 20:50

　　目的:探討XXM及其相關(guān)單體成分KAE對(duì)慢性缺血缺氧引起的腦損傷的作用及其機(jī)制。方法:采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎(bilateral common carotid arteries occlusion,2-VO)建立大鼠慢性腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ?Morris水迷宮、斜板實(shí)驗(yàn)以及抓握實(shí)驗(yàn)檢測慢性腦缺血大鼠的行為學(xué);HE染色和尼氏染色觀察大鼠腦組織病理性變化;試劑盒檢測腦組織內(nèi)SOD活性以及MDA含量;ELISA檢測腦組織VEGF、NT-3和BDNF的含量;Western blotting檢測腦組織抗氧化蛋白、神經(jīng)保護(hù)蛋白等的表達(dá)水平。采用CoCl2誘導(dǎo)的PC12建立缺氧損傷細(xì)胞模型,Western blotting檢測細(xì)胞抗氧化蛋白、神經(jīng)保護(hù)蛋白等的表達(dá)水平。結(jié)果:1.XXM可改善慢性腦缺血大鼠的行為功能,表現(xiàn)如下:(1)XXM可改善慢性腦缺血大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙,表現(xiàn)在以下方面:①XXM中、高劑量可顯著縮短2-VO大鼠在Morris水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)中的潛伏期;②XXM高劑量可顯著增加2-VO大鼠在Morris水迷宮空間探索實(shí)驗(yàn)中穿越所在位置的次數(shù);③XXM可顯著增加2-VO大鼠在Morris水迷宮空間探索實(shí)驗(yàn)中第一次穿越平臺(tái)所在位置的時(shí)間,且與游泳速度無關(guān)。(2)XXM可改善2-VO大鼠協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)行為能力,表現(xiàn)為XXM高劑量可顯著增加2-VO大鼠在斜板試驗(yàn)和抓握試驗(yàn)中的評(píng)分。(3)2-VO大鼠出現(xiàn)明顯的海馬CA1區(qū)、皮層和白質(zhì)損傷,XXM劑量可減輕2-VO大鼠的海馬、皮層以及白質(zhì)神經(jīng)元的損傷,其中以中、高劑量效果最為明顯。2.KAE可改善慢性腦缺血大鼠的行為功能,表現(xiàn)如下:(1)KAE可改善慢性腦缺血大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙,表現(xiàn)在以下方面:①KAE高劑量可顯著縮短2-VO大鼠在Morris水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)中的潛伏期;②KAE高劑量可顯著增加2-VO大鼠在Morris水迷宮空間探索實(shí)驗(yàn)中穿越所在位置的次數(shù);③KAE可顯著增加2-VO大鼠在Morris水迷宮空間探索實(shí)驗(yàn)中第一次穿越平臺(tái)所在位置的時(shí)間,且與游泳速度無關(guān)。(2)KAE可改善2-VO大鼠協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)行為能力。表現(xiàn)為XXM高劑量可顯著增加2-VO大鼠在抓握試驗(yàn)中的評(píng)分。(3)2-VO大鼠出現(xiàn)明顯的海馬CA1區(qū)、皮層和白質(zhì)損傷,KAE可減輕2-VO大鼠的海馬、皮層以及白質(zhì)神經(jīng)元的損傷,其中以高劑量效果最為明顯。3.XXM可改善慢性腦缺血大鼠缺血損傷,表現(xiàn)在以下方面:(1)XXM可顯著升高2-VO大鼠腦組織中SOD活性以及抗氧化蛋白Dj-1表達(dá)水平,并能顯著減少腦組織中MDA的含量;(2)XXM可顯著增加2-VO大鼠腦組織中神經(jīng)保護(hù)因子-3,VEGF以及BDNF的含量,并且顯著提高海馬中GAP蛋白的表達(dá)水平;(3)XXM可顯著增加2-VO大鼠腦組織中突觸素的表達(dá)水平;(4)XXM可顯著降低海馬中線粒體損傷蛋白PTP表達(dá)水平以及免疫炎性反應(yīng)蛋白P2X7的表達(dá)水平。4.KAE可改善慢性腦缺血大鼠缺血損傷,表現(xiàn)在以下方面:(1)KAE可顯著升高2-VO大鼠腦組織中SOD活性,并能顯著減少腦組織中MDA的含量;(2)KAE可顯著增加2-VO大鼠腦組織中以及抗氧化蛋白Dj-1表達(dá)水平。5.XXM及其單體KAE可改善CoC12誘導(dǎo)的PC12缺氧損傷,主要表現(xiàn)在,XXM和KAE通過增加DJ-1以及降低Nrf2實(shí)現(xiàn)對(duì)缺氧細(xì)胞的抗氧化保護(hù)作用。結(jié)論:XXM及其單體KAE可顯著改善慢性腦缺血誘導(dǎo)的腦損傷,明顯提高2-VO大鼠學(xué)習(xí)記憶能力障礙和協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)功能障礙,其機(jī)制可能與減少神經(jīng)元損傷,抗氧化應(yīng)激以及免疫炎性反應(yīng),改善突觸結(jié)構(gòu)域功能異常以及能量代謝障礙有關(guān),同時(shí)對(duì)腦部重塑具有一定作用。這些都提示,XXM及其單體對(duì)缺血性中風(fēng)具有一定的治療潛能。
【學(xué)位單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

實(shí)驗(yàn)方案,給藥,大鼠