隨著近些年來免疫學(xué)的發(fā)展,人們發(fā)現(xiàn)許多疾病與免疫力低下有密切關(guān)系,因此研究發(fā)現(xiàn)一種安全有效的免疫增強(qiáng)劑迫在眉睫�？蛋⑸湟禾幏浇M成為人參、黃芪和氧化苦參堿,臨床上常與化療藥物聯(lián)合用于多種腫瘤的治療。本實(shí)驗(yàn)從多水平、多方面對康艾注射液的免疫調(diào)節(jié)作用進(jìn)行研究。1.對Raw 264.7巨噬細(xì)胞免疫活性的影響方法:實(shí)驗(yàn)分為空白組、康艾注射液40、80、120μL/mL組及陽性對照脂多糖10μg/mL組�？瞻捉M給予無血清DMEM培養(yǎng)液,藥物組分別給予康艾注射液40、80及120μL/mL,陽性對照組給予脂多糖10μg/mL,預(yù)處理24 h后檢測Raw264.7細(xì)胞吞噬和黏附能力,細(xì)胞內(nèi)ROS,NF-κB分布,上清液NO、TNF-α及IL-6水平。結(jié)果:康艾注射液能夠明顯增強(qiáng)Raw 264.7細(xì)胞吞噬能力和黏附能力(P0.01),提高ROS、NO、TNF-α及IL-6水平(P0.05或P0.01),并促進(jìn)NF-κB的核易位,提示康艾注射液具有增強(qiáng)Raw 264.7細(xì)胞免疫活性的作用。2.對白細(xì)胞減少小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)和骨髓有核細(xì)胞數(shù)的影響(1)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的白細(xì)胞減少動(dòng)物模型方法:將小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、康艾注射液5、10及20 mL/kg組及陽性藥強(qiáng)力康顆粒2 g/kg組。模型組、康艾注射液各劑量組及陽性藥組小鼠于實(shí)驗(yàn)第1、3天腹腔注射(ip)給予環(huán)磷酰胺80 mg/kg建立環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的白細(xì)胞減少模型�？瞻捉M、模型組ip給予生理鹽水20 mL/kg,藥物組ip給予康艾注射液5、10及20 mL/kg,陽性藥組灌胃(ig)給予強(qiáng)力康2 g/kg,1次/天,共7天。于實(shí)驗(yàn)第0、2、4、6、8天尾靜脈取血,進(jìn)行外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù),于實(shí)驗(yàn)第8天取股骨,進(jìn)行骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)。結(jié)果:康艾注射液可明顯對抗環(huán)磷酰胺致小鼠外周血白細(xì)胞和骨髓有核細(xì)胞數(shù)減少(P0.05或P0.01),提示康艾注射液對環(huán)磷酰胺致白細(xì)胞減少具有明顯的對抗作用。(2)X射線誘導(dǎo)的白細(xì)胞減少動(dòng)物模型方法:將小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、康艾注射液5、10及20 mL/kg組及陽性藥強(qiáng)力康顆粒2 g/kg組。模型組、康艾注射液各劑量組及陽性藥組小鼠于實(shí)驗(yàn)第1天給予X射線照射,0.305 GY/min,共2.0 GY,建立X射線誘導(dǎo)的白細(xì)胞減少模型�？瞻捉M、模型組ip給予生理鹽水20 mL/kg,藥物組ip給予康艾注射液5、10及20 mL/kg,陽性藥組灌胃(ig)給予強(qiáng)力康2 g/kg,1次/天,共7天。于實(shí)驗(yàn)第0、2、4、6、8天尾靜脈取血,進(jìn)行外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù),于實(shí)驗(yàn)第8天取股骨,進(jìn)行骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)。結(jié)果:康艾注射液可明顯對抗X射線所致小鼠外周血白細(xì)胞和骨髓有核細(xì)胞數(shù)減少(P0.05或P0.01),提示康艾注射液對X射線致白細(xì)胞減少具有明顯的對抗作用。3.對免疫功能低下小鼠免疫功能的影響(1)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫功能低下動(dòng)物模型方法:將小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、康艾注射液5、10及20 mL/kg組及陽性藥左旋咪唑20 mg/kg組。模型組、康艾注射液各劑量組及陽性藥組小鼠于實(shí)驗(yàn)第1、3、5天ip給予環(huán)磷酰胺80 mg/kg建立環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫功能低下模型�？瞻捉M、模型組ip給予生理鹽水20 mL/kg,藥物組ip給予康艾注射液5、10及20 mL/kg,陽性藥組ig給予左旋咪唑20 mg/kg,1次/天,共7天。測定小鼠胸腺和脾臟系數(shù)、遲發(fā)型超敏反應(yīng)強(qiáng)度、抗體生成能力、巨噬細(xì)胞吞噬能力、T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力、NK細(xì)胞活性及血清中TNF-α和IL-6含量。結(jié)果:康艾注射液對環(huán)磷酰胺致免疫功能低下小鼠NK細(xì)胞活性沒有明顯影響(P0.05)�？蛋⑸湟嚎梢悦黠@提高環(huán)磷酰胺致免疫功能低下小鼠臟器系數(shù)、血清溶血素以及TNF-α和IL-6含量,增強(qiáng)遲發(fā)型超敏反應(yīng)、T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力、巨噬細(xì)胞吞噬能力(P0.05或P0.01),提示康艾注射液對環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的小鼠免疫功能低下具有明顯的增強(qiáng)作用。(2)氫化可的松誘導(dǎo)的免疫功能低下動(dòng)物模型方法:將小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、康艾注射液5、10及20 mL/kg組及陽性藥左旋咪唑20 mg/kg組。模型組、康艾注射液各劑量組及陽性藥組小鼠于實(shí)驗(yàn)第1、3、5、7天皮下注射(sc)給予氫化可的松40 mg/kg建立氫化可的松誘導(dǎo)的免疫功能低下模型�？瞻捉M、模型組ip給予生理鹽水20 mL/kg,藥物組ip給予康艾注射液5、10及20 mL/kg,陽性藥組ig給予左旋咪唑20 mg/kg,1次/天,,共7天。測定小鼠胸腺和脾臟系數(shù)、遲發(fā)型超敏反應(yīng)強(qiáng)度、抗體生成能力、巨噬細(xì)胞吞噬能力、T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力、NK細(xì)胞活性及血清中TNF-α和IL-6含量。結(jié)果:康艾注射液可以明顯提高氫化可的松致免疫功能低下小鼠臟器系數(shù)、血清溶血素及TNF-α和IL-6含量,增強(qiáng)遲發(fā)型超敏反應(yīng)、巨噬細(xì)胞吞噬能力、T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力和NK細(xì)胞活性(P0.05或P0.01),提示康艾注射液對氫化可的松誘導(dǎo)的小鼠免疫功能低下具有明顯的增強(qiáng)作用。結(jié)論:康艾注射液可以增強(qiáng)RAW 264.7細(xì)胞的免疫活性,升高白細(xì)胞減少小鼠白細(xì)胞數(shù),增強(qiáng)免疫功能低下小鼠免疫力,具有良好的免疫增強(qiáng)作用,有望成為一種安全有效的免疫增強(qiáng)劑應(yīng)用于臨床。
【學(xué)位單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5

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1 郭e

本文編號：2818202