本論文內(nèi)容包括四部分,第一部分闡述了豆科(Leguminosae)植物截葉鐵掃帚Lespedeza cuneata(Dum.-Cours.)G.Don乙酸乙酯部位的化學(xué)成分研究,第二部分分析了截葉鐵掃帚中揮發(fā)油成分,第三部分闡述了截葉鐵掃帚乙酸乙酯部位黃酮類化合物抗糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)活性研究,第四部分對胡枝子屬植物的藥用情況、化學(xué)成分和藥理活性研究的最新進展進行了綜述。目的:研究藥用植物截葉鐵掃帚的化學(xué)成分及其抗DN活性。方法:采用正、反相硅膠柱層析,MCI柱層析,Sephadex LH-20柱層析等多種分離方法進行化學(xué)成分分離純化,并運用現(xiàn)代波譜學(xué)技術(shù)(1H-NMR、13C-NMR、2D-NMR)對分離得到的化合物進行結(jié)構(gòu)鑒定。采用水蒸汽蒸餾法提取截葉鐵掃帚揮發(fā)油,利用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用技術(shù)分析鑒定揮發(fā)油中的化學(xué)成分。將體外培養(yǎng)的腎小球系膜細胞(MC)隨機分為3組:正常對照組(5.6 m M葡萄糖)、高糖組(30 m M葡萄糖)、給藥組。各組細胞培養(yǎng)48h后,采用WST-1法檢測化合物對細胞增殖的抑制能力,進一步進行劑量依賴性分析和效價評估,初步篩選出活性較高的化合物。結(jié)果:本實驗從截葉鐵掃帚全株80%乙醇提取物的乙酸乙酯部位共分離鑒定出32個化合物,分別為:2'-羥基-4',6'-二甲氧基查耳酮(1),7-羥基-5,8-二甲氧基二氫黃酮(2),山柰酚(3),異鼠李素(4),槲皮素(5),香葉木素(6),木犀草素(7),根皮素(8),淫羊藿素(9),木犀草苷(10),蘆丁(11),山柰苷(12),淫羊藿苷(13),4β,10β-香蘭木二醇(14),柳杉二醇(15),(3R,4R,6S)-3,6-二羥基薄荷烯(16),丁香脂素(17),異嗪皮啶(18),兒茶酚(19),苯乙酸(20),香草酸(21),4-羥基肉桂酸(22),環(huán)(L-丙氨酸-L-苯丙氨酸)(23),癸二酸(24),3,4-二羥基苯甲酸(25),肉桂酸(26),4-羥基-3-甲氧基苯乙醇(27),對羥基苯乙醇(28),3,4-二羥基苯乙醇(29),羥基酪醇乙酸酯(30),辛酸甲酯(31),β-谷甾醇(32),其中化合物1～2、4、8～12、14～20、22～32為首次從截葉鐵掃帚中分離得到。分析截葉鐵掃帚中揮發(fā)油化學(xué)成分,地上部位經(jīng)鑒定的有53種揮發(fā)油,主要成分為植酮(12.44%)、1-辛烯-3-醇(6.29%)、十七烯(5.21%)等。地下部位經(jīng)鑒定的有19種揮發(fā)油,其中以植物醇(62.77%)、鄰苯二甲酸異丁基辛酯(3.83%)、棕櫚酸甲酯(3.47%)為主。二者GC圖譜差異明顯,雖然檢出7種共同的化學(xué)成分,但地上部位揮發(fā)油成分種類更豐富。腎小球系膜細胞(MC)在高糖誘導(dǎo)48h時,與正常組比較促增殖作用明顯。檢測給藥組對高糖培養(yǎng)的MC增殖的影響,檢測出黃酮類化合物1、3、6、7、8、9、10、12、13在100μM濃度時能不同程度抑制高糖誘導(dǎo)的MC的增殖。進一步進行劑量依賴性分析和效價評估,給藥組1、3、6、7、10、12、13在一定濃度范圍內(nèi)存在劑量依賴性,計算IC_(50),根據(jù)IC_(50)進行效價評估,化合物7效價最好,6和10次之,12最差。結(jié)論:截葉鐵掃帚乙酸乙酯部位分離得到的化合物除3、5～7、13、21以外,其余均首次從該植物中分離得到。截葉鐵掃帚地上與地下部位揮發(fā)油種類與含量差異較大。截葉鐵掃帚乙酸乙酯部位黃酮類化合物中,6、7、10在一定濃度范圍內(nèi)存在劑量依賴性,并具有較好的活性,其中化合物7效價最好。
【學(xué)位單位】：大理大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R284.1;R285
【部分圖文】：

圖 1-2 化合物 3 的結(jié)構(gòu)圖末。1H-NMR (400 MHz, C5D5N)譜此為黃酮類化合物 C-5 位羥基的特2 (1H, dd, J = 8.5, 2.0 Hz), 7.39 (1H信號，提示該化合物 B 環(huán)為 3', 4'-, J = 2.0 Hz)為黃酮類化合物 A 環(huán)上，在δH: 3.90 (3H, s)處還顯示出現(xiàn)了-NMR 譜中并沒有見到 3-H 的信號合13C-NMR (100 MHz, C5D5N)譜類化合物的碳信號以及 1 個甲氧該化合物有 5 個次甲基碳信號、107.68 為羰基碳信號。將化合物 4 的

波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為異鼠李素，其結(jié)構(gòu)見圖1-3圖 1-3 化合物 4 的結(jié)構(gòu)圖化合物 5 為黃色粉末。1H-NMR (400 MHz, CD3OD)譜顯示δH: 7.71 (1H, d, J =2.1 Hz), 7.60 (1H, dd, J = 8.5, 2.1 Hz), 6.86 (1H, d, J = 8.5 Hz)為黃酮類化合物 B 環(huán)上的芳氫信號，提示化合物 B 環(huán)為 3', 4'-二取代；δH: 6.36 (1H, d, J = 2.0 Hz), 6.15(1H, d, J = 1.9 Hz)則為黃酮類化合物 A 環(huán)上的氫信號，提示該化合物為 5, 7-二取

圖 1-4 化合物 5 的結(jié)構(gòu)圖粉末，從1H-NMR (400 MHz, DM示結(jié)構(gòu)中存在黃酮類化合物特征活.3 Hz, H-6'), 7.47 (1H, d, J =2.2 Hz, 在 ABX 自旋耦合系統(tǒng)，3'和 4'位均，δH: 6.43 (1H, d)和δH: 6.17 (1H, dMR (100 MHz, DMSO-d6)譜信息可合物母核碳原子信號。1H-NMR及定該化合物為木犀草素，其結(jié)構(gòu)式

【參考文獻】

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本文編號：2817826