目的:通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探究神效瓜蔞散治療乳腺癌的機(jī)制。方法:1、選取SKBR-3乳腺癌細(xì)胞,加入0μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml和400μg/ml等不同劑量神效瓜蔞散水提物,使用臺(tái)盼藍(lán)法連續(xù)計(jì)數(shù)6天觀察神效瓜蔞散水提物對(duì)SKBR-3乳腺癌細(xì)胞增殖的影響。2、選取SKBR-3乳腺癌細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)分組同上,培養(yǎng)72h,采用MTS實(shí)驗(yàn)的方法觀察神效瓜蔞散水提物對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖的影響。3、選取SKBR-3乳腺癌細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)分組同上,通過(guò)劃痕實(shí)驗(yàn)觀察神效瓜蔞散對(duì)乳腺癌細(xì)胞遷移的影響。4、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析,從TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)、TCMID數(shù)據(jù)庫(kù)等數(shù)據(jù)庫(kù)獲得神效瓜蔞散的有效成分和相應(yīng)靶點(diǎn),通過(guò)網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫(kù)TTD和相關(guān)文獻(xiàn)中獲得乳腺癌的發(fā)病和治療靶點(diǎn),通過(guò)Cytoscape軟件制作對(duì)應(yīng)中藥的成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖,預(yù)測(cè)神效瓜蔞散作用于乳腺癌的機(jī)制。5、通過(guò)Western blot檢測(cè)經(jīng)神效瓜蔞散處理過(guò)的乳腺癌SKBR-3細(xì)胞的ERα蛋白表達(dá)情況,以驗(yàn)證網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測(cè)的神效瓜蔞散作用于乳腺癌的機(jī)制。結(jié)果:1、臺(tái)盼藍(lán)法結(jié)果不同劑量神效瓜蔞散(0μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml和400μg/ml)作用于乳腺癌SKBR-3細(xì)胞后,可以看見從50μg/ml的濃度細(xì)胞數(shù)目就開始減少,且在第3天細(xì)胞數(shù)目開始明顯減少,并呈劑量、時(shí)間依賴性(P0.05)。2、MTS實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同劑量神效瓜蔞散(0μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml和400μg/ml)作用于乳腺癌SKBR-3細(xì)胞72h后,發(fā)現(xiàn)隨著神效瓜蔞散濃度的增加,OD值呈劑量依賴性下降(P0.05)。3、劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同劑量神效瓜蔞散(0μg/ml、100μg/ml、200μg/ml)作用于乳腺癌SKBR-3細(xì)胞24h后,發(fā)現(xiàn)隨著神效瓜蔞散濃度的增加,各加藥組細(xì)胞遷移的距離明顯減少。4、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)神效瓜蔞散的瓜蔞、甘草、當(dāng)歸、乳香和沒(méi)藥5個(gè)成分,通過(guò)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)、TCMID數(shù)據(jù)庫(kù)等數(shù)據(jù)庫(kù)篩選到有效成分265個(gè)和相關(guān)靶點(diǎn)2305個(gè),乳腺癌通過(guò)TTD數(shù)據(jù)庫(kù)和相關(guān)文獻(xiàn)篩選到靶點(diǎn)一共121個(gè),通過(guò)Cytoscape軟件構(gòu)建的神效瓜蔞散成分靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)可以推測(cè)神效瓜蔞散通過(guò)ER、HSP90、PTGS2等靶點(diǎn)作用于乳腺癌發(fā)揮其抗腫瘤作用。5、Western blot實(shí)驗(yàn)通過(guò)Western blot實(shí)驗(yàn)觀察到加入不同濃度的神效瓜蔞散(0、100、200μg/m L)后,隨著藥物劑量的增加,ERα逐漸減少(P0.05)。結(jié)論:1、神效瓜蔞散能夠在體外抑制乳腺癌細(xì)胞SKBR-3的增殖和遷移。2、神效瓜蔞散可能主要通過(guò)抑制ER內(nèi)分泌、炎癥等通路治療乳腺癌。
【學(xué)位單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R285
【部分圖文】：

天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文細(xì)胞的增殖具有抑制作用，并且呈劑量、時(shí)間依賴性。1.2.3 劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果 為了初步探索神效瓜蔞散對(duì)乳腺癌 SKBR-3 細(xì)胞遷移的影響，本研究采用了劃痕實(shí)驗(yàn)的方法。劃痕實(shí)驗(yàn)設(shè)置了對(duì)照組、不同劑量神效瓜蔞散（100μg/ml、200μg/ml）組，在乳腺癌 SKBR-3 細(xì)胞加入上述不同濃度組的神效瓜蔞散培養(yǎng) 24 后，拍照實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖 3，從圖中可以看出對(duì)照組的乳腺癌SKBR-3 細(xì)胞遷移距離最少，隨著神效瓜蔞散劑量的增加乳腺癌 SKBR-3 細(xì)胞遷移距離相應(yīng)增加，由此可以得出神效瓜蔞散可以抑制乳腺癌 SKBR-3 細(xì)胞細(xì)胞遷移，并且呈劑量依賴性。

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4 弭陽(yáng);;神效瓜蔞散治療乳腺增生病128例[J];湖南中醫(yī)雜志;1993年01期

5 盧慧;谷新利;劉剛;孫才華;石國(guó)慶;;奶牛乳房炎和前胃馳緩的中草藥防治[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘;2006年06期

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本文編號(hào)：2817928