淫羊藿(Epimedium brevicornu Maxim)屬于小檗科淫羊藿屬植物,主要能夠治療陽萎早泄,腰痛腿酸,四肢麻痹,失眠多忘等作用。淫羊藿中的主要活性成分是黃酮類成分,這類成分對免疫系統(tǒng)、骨骼系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)、神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)等具有顯著的藥理作用。淫羊藿在炮制的過程中,其黃酮類成分的含量會發(fā)生改變,其中淫羊藿苷(Icariin)的含量發(fā)生了顯著的提升,這是由于黃酮類成分在受熱之后結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化而導(dǎo)致。Icariin作為淫羊藿總黃酮(total flavones of epimedium,TFE)中含量較高的一種黃酮苷,具有改善心腦血管、加強(qiáng)性腺、增強(qiáng)機(jī)體免疫等功能。我們通過建立小鼠和HEK293細(xì)胞的順鉑(cisplatin)誘導(dǎo)腎毒性損傷的模型,從腎功能指標(biāo)、炎癥指標(biāo)、氧化應(yīng)激指標(biāo)、細(xì)胞凋亡的水平等方面,深入探討了TFE和ICA的腎保護(hù)作用,并初步闡明了其在腎保護(hù)方面的分子機(jī)制。1、TFE對cisplatin誘導(dǎo)小鼠腎損傷的保護(hù)作用。將小鼠隨機(jī)分為4組,每組8只,TFE(300和600mg·kg~(-1))+cisplatin組分別灌胃給予TFE 300mg·kg~(-1)和600 mg·kg-1,空白組(Normal)和模型組(cisplatin)給予同樣劑量的生理鹽水。第7天給藥1h后,cisplatin組和TFE(300和600mg·kg~(-1))+cisplatin組一次性腹腔注射cisplatin20 mg·kg~(-1)以建立cisplatin腎損傷模型。小鼠眼眶取血,頸椎脫臼處死后,取血清和各器官組織,分別用于各項(xiàng)指標(biāo)的檢測和組織病理學(xué)染色分析。結(jié)果表明:TFE能夠有效的降低肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)、丙二醛(MDA)水平、提高谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GSH)水平,此外TFE還能抑制腎細(xì)胞凋亡以及炎性浸潤,通過抑制炎性因子Nrf2的表達(dá)來降低腎組織炎癥,減少腎組織受到的損傷。2、淫羊藿在經(jīng)羊脂油炮制前后,主要黃酮的含量變化。精密稱取淫羊藿600g,平均分成12份,每份50g并且揉碎,根據(jù)《中國藥典》規(guī)定的比例(物料比5:1),其中6份淫羊藿葉拌入10g羊脂油進(jìn)行炒制,溫度90℃,每份炒制10分鐘,將淫羊藿葉炒至翠綠為止。其余6份淫羊藿葉直接進(jìn)行淫羊藿總黃酮的提取。結(jié)果表明,在經(jīng)過羊脂油文火炒制之后,其中四種屬于黃酮類成分的物質(zhì)朝藿定A(Epimedin A)、朝藿定B(Epimedin B)、朝藿定C(Epimedin C)以及ICA均發(fā)生不同程度的含量變化,其中朝藿定A下降了12%~16%、朝藿定B下降了13%~15%、朝藿定C下降了25%~29%,ICA的含量升高,升高了40%~52%。這說明淫羊藿在炮制之后,多糖苷黃酮類成分向次級糖苷黃酮類成分發(fā)生轉(zhuǎn)變,這種轉(zhuǎn)變可能是淫羊藿經(jīng)過炮制之后,藥理活性得到提升的原因之一。3、通過建立HEK293細(xì)胞損傷模型,觀察ICA對cisplatin誘導(dǎo)的腎毒性的保護(hù)作用及可能的分子機(jī)制。首先,利用MTT法測定細(xì)胞活力,檢測細(xì)胞中丙二醛(MDA)和還原型谷胱甘肽(GSH)的含量來評價(jià)其氧化應(yīng)激水平,用Hoechst33258染色法、western blot探討HEK293細(xì)胞的凋亡和其炎癥信號通路相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果表明:ICA能夠有效的降低HEK293細(xì)胞中MDA的水平,抑制GSH的降低,并且能夠調(diào)控促凋亡因子Bax和抗凋亡因子Bcl-2以及caspase-3/-9的表達(dá)水平,從而拮抗cisplatin誘導(dǎo)的HEK293細(xì)胞凋亡。同時,ICA能夠降低炎癥反應(yīng)因子iNOS、NF-κB、TNF-α和IL-1β等蛋白的表達(dá),從而抑制cisplatin誘導(dǎo)的HEK293細(xì)胞炎癥反應(yīng)。綜上所述,本研究結(jié)果清晰地表明,TFE及其主要的黃酮成分ICA能夠至少部分通過抑制炎癥、緩解氧化應(yīng)激損以及抗凋亡作用來拮抗cisplatin所引起的腎毒性,從而起到腎保護(hù)的作用。
【學(xué)位單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

2圖 1-1.淫羊藿苷，朝藿定 A，朝藿定 B，朝藿定 C 的化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig. 1-1. Chemical structure of Icariin, Epimedin A, Epimedin B, Epimedin C

圖 1-2. 淫羊藿中主要的黃酮成分及其結(jié)構(gòu)Fig. 1-2. Main flavonoids of Epimedium and their structures1.2 多糖淫羊藿中含有很多多糖類成分[18]，李德耀[19]等從淫羊藿中分離得到 10 個多

圖 3-1. 淫羊藿苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig. 3-1. Chemical structure of Icariin取分離方式目前已經(jīng)比較成熟，主要是李玉山[57

【參考文獻(xiàn)】

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1 劉暢;錢彥方;胡京紅;朱宇婷;魏震;張秀霞;趙珈藝;孫紅梅;;益氣養(yǎng)陰除結(jié)方聯(lián)合順鉑對肺腺癌A549細(xì)胞生長及凋亡的影響[J];北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2015年12期

2 王全洪;;不同炮制方法對黔產(chǎn)淫羊藿中總黃酮及淫羊藿苷的影響[J];陜西中醫(yī);2015年11期

3 胡彥武;劉凱;閆夢彤;蔣金凌;張洋;王亞帝;張敏;任立群;;淫羊藿總黃酮及淫羊藿苷的心血管保護(hù)作用及機(jī)制研究進(jìn)展[J];中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志;2015年13期

4 馬致潔;李曉菲;呂e

本文編號：2815085