目的:研究桑黃的化學(xué)成分,并考察其體外抗炎活性。方法:取干燥的桑黃子實(shí)體5.0公斤,用70%的乙醇浸泡,提取,所得乙醇浸膏分別用二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇依極性由小到大順次萃取。利用正反相硅膠色譜、葡聚糖凝膠色譜和高效液相色譜等柱色譜分離技術(shù)分別對桑黃的乙酸乙酯層和正丁醇層萃取物進(jìn)行分離和純化。并運(yùn)用旋光儀、核磁共振波譜等波譜學(xué)方法對得到的單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)的鑒定。進(jìn)而利用Griess法、ELISA法,測定并分析化合物對脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞(RAW264.7)中一氧化氮(nitric oxide,NO)、白細(xì)胞介素6(interleukin-6,IL-6)和腫瘤壞死因子(tumournecrosis factor-α,TNF-α)表達(dá)的抑制作用,進(jìn)行化合物的抗炎活性研究。結(jié)果:從桑黃的乙酸乙酯層和正丁醇層中共分離得到20個(gè)化合物,通過波譜學(xué)解析,結(jié)構(gòu)鑒定為啤酒甾醇(1)、-谷甾醇(2)、白樺脂酸(3)、3β,6β,16β-三羥基-羽扇豆烷(4)、3β,20-二羥基-羽扇豆烷(5)、3-乙酰熊果酸(6)、齒孔醇(7)、乙基-β-D-吡喃葡萄苷(8)、乙基-α-D-半乳糖苷(9)、果糖(10)、α-黑曲霉糖(11)、海藻糖(12)、2-脫氧-D-核苷酸-1,4-內(nèi)酯(13)、二氫槲皮素(14)、cedrusin(15)、女貞甙(16)、橄欖苦苷(17)、鄰苯二甲酸二戊酯(18)、6,6'-二乙基鄰苯二甲酸二己酯(19)、1--O-(β-D-glucopyranosyl)-(2S,3R,4E,8E)-2-[(2 R)-2-hydroxynonadecanoy-lamino]-9-methyl-4,8-octadecadiene-1,3-diol(20)。其中,化合物4、9、16和17是首次從桑黃中分離得到�？寡谆钚詫�(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,化合物1、4、9-12、16、17、19和20在濃度為3μM、10μM和30 μM時(shí)可顯著抑制LPS誘導(dǎo)的RAW264.7產(chǎn)生NO、IL-6和TNF-α的含量,減少炎癥反應(yīng)。
【學(xué)位單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R284;R285
【部分圖文】：

圖２桑黃乙酸乙酯層萃取物的分離流程圖逡逑桑黃正丁醇層萃取物（１５７．０邋ｇ邋）逡逑ＣＨＸ＾－ＣＨｐＨｔｒｍｌＯ：！邋（0２Ｊ邋�。╁义希疲颍模插澹ǎ欤眨辏┻姡疲颍澹保兀常ǎ保担保叮┻姡疲颍模矗ǎ欤浚蓿担╁义希茫龋簦希龋粒悖妫欤停蓿蓿线姡茫龋蓿龋桑蓿线姡茫�，Ｃ；－ＣＨ＾＞Ｈ逡逑０：３：４ｉｏ邋１０仍邐（ＩＳｔｏｌＯ）邐00．｝邋Ｍ＞５：１）逡逑Ｃｏｍｐ．邋１１邐Ｄ－２－２邐Ｄ－３－４邐Ｄ－３－Ｓ邐Ｄ＾－８邐Ｄ－４－２邐Ｄ－４Ｊ邐ＩＭ－５逡逑（５＾邋ｍｓ）逡逑ＰＥ－ＥＯＡｃ－逡逑ＣＨ＾Ｌ．－ＣＨｊａＨ邐ＰＥ－ＥｘＯＡｃ－ＣＨ，ＯＨ邐ＰＥ－ＥｉＯＡｃ－ＣＨ，ＯＨ邐ＣＨ－．ＯＨ邐ＣＨ．０Ｈ４１Ｐ邐ＣＨ．ＯＨ－Ｈ；？邐ＣＨ．ＯＨ（２Ｓ：ｌ）邐｛２５．１：０．４）邐（２１０－３Ｓ）邐（ｌ＾．ｌ．＆４ｔｏ邐０邐｛１？Ｊ邋ｔｏ邋１０）邐（３：１７邋ｔｏ１．２：１：０．＜）逡逑Ｄ－２－２－１邐Ｃｏｍｐ＊邋１６邐Ｃｏｍｐ．邋１４邐Ｃｏｍｐ．邋１０逡逑（２３２邋ｍｇ）邐（１４．４邋ｍｇ）邐Ｕ－Ａ－２－１邐（７．０邋ｍ＾）逡逑ＰＥ－ＥｉＱＡｃ－逡逑ＰＥ－Ｅｔ0Ａｃ－ＣＨ，ＣＷ邐ＣＨ－Ｏ－ＣＨｊＯＨ邐ＣＨｊＯＨ逡逑ａ：邋１：０．１）邐（１５１）邐（１：１Ａ１）邋Ｄ－ｌ－Ｊ－１邐Ｄ－４－３－２邐Ｄ－４－＾－３逡逑Ｃｏｍｐ．邋１２逡逑°ａ！ＯＨＨ0Ｈ逡逑

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Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ邋（３０邋＾ｉＭ）逡逑圖４化合物１－２０對ＲＡＷ２６４．７細(xì)胞存活率的影響逡逑結(jié)果表明，化合物濃度在３０邐時(shí)，化合物１－２０的細(xì)胞存活率如圖４所示，結(jié)逡逑果顯示細(xì)胞存活率超過８０％的化合物包括１、２、４－６、８－１２、１４－２０，這些化合物在逡逑３０邋ｐＭ濃度時(shí)對ＲＡＷ２６４．７細(xì)胞均無毒性。逡逑４．２．２化合物抑制ＬＰＳ邋ｉ秀導(dǎo)ＲＡＷ２６４．７產(chǎn)生ＮＯ量的測定結(jié)果逡逑在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中，只選取存活率超過８０％的化合物１、２、４－６、８－１２、１４－２０進(jìn)行化逡逑合物抑制ＬＰＳ誘導(dǎo)ＲＡＷ２６４．７細(xì)胞產(chǎn)生ＮＯ含量的實(shí)驗(yàn)，見圖５。逡逑５２逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2812723