目的:本課題通過創(chuàng)立慢性疲勞大鼠模型,研究CFS發(fā)病的病因及發(fā)病機制。歸納升陽益胃顆粒影響造模大鼠一般情況和行為學指標如力竭游泳時間、直立運動次數和跨格運動次數的影響;通過檢測不同組別大鼠骨骼肌中的SDH和細胞色素c的含量,探討升陽益胃顆粒治療CFS的機制,為該方在臨床上治療CFS提供實驗和理論依據。方法:(1)分組、造模:將60只雄性SPF級SD大鼠,適應性喂養(yǎng)3d后,開始造模。然后隨機將大鼠分為正常組、模型組、諾迪康膠囊組、升陽益胃顆粒低、中、高劑量組,每組各10只。正常組不進行造模,其余5組根據改良的尹喜玲法進行造模,時間為14天。(2)灌胃方法與劑量:諾迪康膠囊組按0.182g/(kg·d)給以諾迪康膠囊混懸液灌胃,升陽益胃顆粒低、中、高劑量組分別按1.625g/(kg·d)、3.25g/(kg·d)、6.5g/(kg·d)給予升陽益胃顆�；鞈乙汗辔浮＿B續(xù)14天,1次/天。每隔3天測量一次大鼠體重,實時調整給藥量。(3)取材:大鼠成功經局部麻醉后,快速取出各組大鼠左后肢股四頭肌,稱取1g在生理鹽水中漂洗,制備骨骼肌組織勻漿和線粒體懸浮液,分裝標號置于-20℃的冰柜中保存。(4)指標測定:造模前、造模后以及末次灌胃后均測量一次大鼠體重、力竭游泳時間、跨格運動次數及直立運動次數。運用ELISA法測定大鼠骨骼肌中SDH和Cyt-c的含量。所得數據采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件對數據進行處理。結果:(1)一般情況:造模前,各組大鼠一般情況無差異。造模開始后,正常組大鼠進食飲水量、活動情況、皮毛色澤、二便情況無異常表現(xiàn)。隨著造模時間的推移,模型組和給藥組大鼠進食飲水量減少,皮毛失去色澤,活動量減少,糞便稀,尾巴臟。給藥后,升陽益胃顆粒低、中、高劑量組大鼠、諾迪康膠囊組進食量和飲水量增加明顯,活動量明顯加大,皮毛漸漸有光澤,大便稀溏漸恢復至正常,升陽益胃顆粒中、高劑量組變化更明顯。(2)體重及行為學指標:造模前:各組大鼠體重及行為學指標對比P0.05,無顯著性差異。造模后:各造模組大鼠體重及行為學指標與正常組相比P0.05,有顯著性差異,造模各組間比較P0.05,無顯著差異。給藥后:模型組大鼠體重及各行為學指標明顯低于其余5組(P0.05),有顯著性差異;正常組大鼠體重及各行為學指標高于諾迪康膠囊組和升陽益胃顆粒低劑量組(P0.05),有顯著性差異,而與升陽益胃顆粒中、高劑量組相比(P0.05),則無顯著性差異;升陽益胃顆粒中劑量組與升陽益胃顆粒高劑量組相比(P0.05),無明顯差異。(3)骨骼肌SDH含量的測定:與模型組比較,正常組、諾迪康膠囊組、升陽益胃顆粒低、中、高劑量組骨骼肌SDH含量增加,均有顯著性差異(P0.05);與諾迪康膠囊組比較,升陽益胃顆粒低劑量組骨骼肌SDH含量減少,升陽益胃顆粒中、高劑量組骨骼肌SDH含量增加,有顯著性差異(P0.05);與升陽益胃顆粒低劑量組比較,升陽益胃顆粒中、高劑量組骨骼肌SDH含量增加,有顯著性差異(P0.05);與升陽益胃顆粒中劑量組比較,升陽益胃顆粒高劑量組骨骼肌SDH含量增加,有顯著性差異(P0.05)。(4)線粒體細胞色素c含量的測定:與模型組相比較,正常組、諾迪康膠囊組、升陽益胃顆粒低、中、高劑量組骨骼肌線粒體Cyt-c的含量明顯增加,均有顯著性差異(P0.05);與諾迪康膠囊組比較,升陽益胃顆粒低劑量組骨骼肌線粒體Cyt-c的含量減少,升陽益胃顆粒高劑量組骨骼肌線粒體Cyt-c的含量增加,均有顯著性差異(P0.05),升陽益胃顆粒中劑量組骨骼肌線粒體Cyt-c的含量無顯著性差異(P0.05);與升陽益胃顆粒低劑量組相比,升陽益胃顆粒中、高劑量組骨骼肌線粒體Cyt-c的含量增加,有顯著性差異(P0.05);與升陽益胃顆粒中劑量組相比,升陽益胃顆粒高劑量組骨骼肌線粒體Cyt-c的含量增加,有顯著性差異(P0.05)。結論:(1)本實驗采用復合因素構建大鼠慢性疲勞模型,重復性和可操作性都比較好,因為其是能造成身體疲勞和精神疲勞均有的動物模型,能較好的模擬人類長期身體和心理刺激導致患病的病理過程。(2)升陽益胃顆粒能恢復大鼠體重漸至正常,延長大鼠力竭游泳時間,提高跨格運動次數和直立運動次數;升陽益胃顆粒能改善慢性疲勞大鼠疲勞狀態(tài),為臨床上應用其治療慢性綜合征提供了實驗室依據。(3)升陽益胃顆粒能明顯增加造模大鼠骨骼肌中SDH和cyt-c的含量,從而調節(jié)機體組織線粒體能量代謝,提高機體利用氧的能力,發(fā)揮其抗疲勞作用。這從一方面解釋了其升陽益胃顆粒的抗疲勞機制。
【學位單位】：河南中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2017
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

圖 1 各組大鼠造模前、造模后及給藥后體重的比較注：A 組為正常組，B 組為模型組，C 組為諾迪康膠囊組，D 組為升陽益胃顆粒低劑量組，E 組為升陽益胃顆粒中劑量組，F(xiàn) 組為升陽益胃顆粒高劑量組。3 行為學指標3.1 力竭游泳時間造模前：各組大鼠力竭游泳時間無顯著性差異（P>0.05）。造模后：與正常組相比，造摸各組大鼠力竭游泳時間均明顯減少，有顯著性差異（P<0.05），造模各組間比較無顯著差異（P>0.05）。給藥后：與正常組比較，升陽益胃顆粒中、高劑量組大鼠力竭游泳時間無顯著性差異（P>0.05），模型組、諾迪康膠囊組與升陽益胃顆粒低劑量組大鼠力竭游泳時間明顯減少，有顯著性差異（P<0.05）；與模型組比較，諾迪康膠囊組、升陽益胃顆粒低、中、高劑量組力竭游泳時間明顯延長，均有顯著性差異（P<0.05）；與諾迪康膠囊組比較，升陽益胃顆粒低劑量組力竭游泳時間無顯著性差異（P>0.05），升陽益胃顆粒中、高劑量組力竭游泳時間明顯延長，有顯著性差異（P<0.05）；與升陽益胃顆粒低劑量組相比，升陽益胃顆粒中、高劑量組

表 2 各組大鼠造模前、造模后及給藥后力竭游泳時間比較(min， x ± s)組別 n 造模前 造模后 給藥后正常組 10 63.38±6.60▲63.82±4.62 68.15±5.37★模型組 9 62.70±5.67▲21.01±3.20●23.98±2.96諾迪康膠囊組 8 61.41±6.09▲19.99±3.01●54.34±3.94★△升陽益胃顆粒低劑量組 10 61.97±6.38▲21.27±4.10●56.31±5.14★△升陽益胃顆粒中劑量組 10 63.38±6.61▲21.46±3.87●71.21±7.69★○升陽益胃顆粒高劑量組 10 62.40±5.94▲20.42±4.64●72.17±6.89★○注：▲ 造模前，各組間比較 P>0.05�！裨炷：�，與正常組比較 P<0.05。給藥后，★與模型組比較 P<0.05；△與正常組比較 P<0.05；○與正常組比較P>0.05；◆與諾迪康膠囊組比較 P>0.05；■與升陽益胃顆粒中劑量組比較P>0.05。

跨格運動次數明顯增加，有顯著性差異（P<0.05）；與升陽益胃顆粒中劑量組相比，升陽益胃顆粒高劑量組跨格運動次數雖稍有增加，但無顯著性差異（P>0.05）。（表 3、圖 3）表 3 各組大鼠造模前、造模后及給藥后跨格運動次數比較(次， x ± s)組別 n 造模前 造模后 給藥后正常組 10 85.70±8.17▲86.40±8.56 86.90±6.24★模型組 9 84.67±6.44▲44.33±5.68●45.56±6.29諾迪康膠囊組 8 85.50±6.95▲42.63±4.57●78.88±7.47★升陽益胃顆粒低劑量組 10 84.40±8.03▲42.30±5.14●79.20±7.79★△升陽益胃顆粒中劑量組 10 83.90±8.28▲42.10±6.29●88.70±6.16★升陽益胃顆粒高劑量組 10 85.30±6.90▲42.50±5.93●90.40±6.54★○注：▲ 造模前，各組間比較 P>0.05�！裨炷：螅c正常組比較 P<0.05。給藥后，★與模型組比較 P<0.05；△與正常組比較 P<0.05；○與正常組比較 P>0.05；◆與諾迪康膠囊組比較 P>0.05；■與升陽益胃顆粒中劑量組比較 P>0.05。

【參考文獻】

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本文編號：2809989