發(fā)布時間：2020-08-28 05:54

【摘要】：目的:探討楊桃根中的2-十二烷基-6-甲氧基-2,5-二烯-1,4-環(huán)己二酮(2-dodecyl-6-methoxycyclohexa-2,5-diene-1,4-dione,DMDD)對高脂高糖飲食引起的胰島素抵抗小鼠的影響及其可能的作用機(jī)制。方法:將6～8周齡的雄性C57BL/6J小鼠隨機(jī)地分成兩組:正常飲食(ND或者Normal)組及高脂高糖飲食(HFSD)組,HFSD組采用高脂高糖飼料喂養(yǎng)12周后將體重超過ND組體重的20%且空腹血糖(FBG)"g 7.8 mmol/L的小鼠隨機(jī)分為模型(Model)組、二甲雙胍(Metformin)組、DMDD低劑量(DMDDL)組、DMDD 中劑量(DMDDM)組、DMDD 高劑量(DMDDH)組;隨后各組小鼠灌胃給藥4周,DMDD低、中、高組、Metformin組的給藥劑量分別為:12.5、25.0、50.0、280 mg·kg-1 Normal 及 Model 組給予等體積的雙蒸水;給藥期間,每周稱體重、測FBG,第14周末進(jìn)行糖耐量試驗(IPGTT)、第15周進(jìn)行胰島素耐量試驗(ITT)、第16周初進(jìn)行胰島素釋放試驗(IRT),16周末,取血,處死小鼠,測量如下指標(biāo):1.測量體長、腹圍,稱量肝臟、胰腺及附睪脂肪;比色法測血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG);按試劑盒說明書測定肝臟組織中丙二醛(MDA)的含量、總超氧化物歧化酶(T-SOD)及還原型谷胱甘肽(GSH-PX)的活性;2.酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測血清胰島素(Insulin)、游離脂肪酸(FFA)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、瘦素(LEP)、抵抗素(Resistin)及脂聯(lián)素(ADP),計算胰島素抵抗指數(shù)(IRI)、胰島素敏感指數(shù)(ISI)、糖耐量曲線下面積(IPGTTAUC)、胰島素耐量曲線下面積(ITTAUC)、胰島素釋放試驗曲線下面積(IRRTAUC);3.蘇木精-伊紅(HE)染色法觀察附睪脂肪組織、肝臟組織及胰腺組織的病理變化;免疫組化法測定肝臟及胰腺組織中Toll樣受體4(TLR4)、髓樣分化因子88(MyD88)、核因子-κB(NF-κB)及凋亡相關(guān)蛋白:含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解-3(Caspase-3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解-8(Caspase-8)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解-9(Caspase-9),Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bax)、B淋巴細(xì)胞瘤-2基因(Bcl-2)的表達(dá);采用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記(TUNEL)法檢測胰島細(xì)胞凋亡。4.實時定量-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RTQ-PCR)法測定肝臟及脂肪組織中TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α 及 IL-6mRNA 的表達(dá)。結(jié)果:1.與模型組比較,DMDD各劑量組小鼠的體重、附睪脂肪重量、肝臟比重、FBG、TC、TG、肝臟組織中MDA的含量顯著降低(P0.01),T-SOD及GSH-PX的活性明顯提高,但體長、腹圍及進(jìn)食量的變化不明顯;2.與模型組比較,血清 Insulin、FFA、TNF-α、IL-6、LEP、Resistin明顯降低,ADP、ISI明顯提高;DMDD各劑量組各個時間點的血糖及AUC均顯著降低;3.HE染色顯示治療組脂肪細(xì)胞的面積變小、脂滴沉積減少,肝臟脂肪變性明顯改善;與模型組相比,經(jīng)二甲雙胍及DMDD治療后,胰島細(xì)胞的結(jié)構(gòu)基本完整。免疫組化顯示治療組的肝臟及胰腺組織中的TLR4、MyD88、NF-κB,凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3、-8、-9及促凋亡蛋白Bax的表達(dá)顯著減少(P0.01),而抗凋亡蛋白Bcl-2明顯增多;與正常組比較,模型組中凋亡的胰島細(xì)胞數(shù)明顯增加;與模型組比較,各治療組的胰島細(xì)胞凋亡數(shù)明顯減少;4.RTQ-PCR顯示,與正常組比較,肝臟及脂肪組織中的TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α及IL-6 mRNA被上調(diào);與模型組比較,經(jīng)DMDD及Metformin治療后,TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α及 IL-6mRNA 下調(diào)。結(jié)論:DMDD對肥胖誘導(dǎo)的胰島素抵抗具有防治作用。其作用可能與其改善肥胖、高血糖、高血脂,抗氧化、抗炎、抑制凋亡有關(guān);其改善IR的機(jī)制可能與TLR4/MyD88/NF-κB信號通路有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5
【圖文】：

圖１－２邋ＨＦＳＤ對小鼠血糖的影響逡逑Ｆｉｇ．邋１－２邋Ｔｈｅ邋ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ｈｉｇｈ－ｆａｔ．邋ｈｉｇｈ－ｓｕｇａｒ邋ｄｉｅｔ邋ｏｎ邋ｂｌｏｏｄ邋ｇｌｕｃｏｓｅ邋ｉｎ邋ｍｉｃｅ逡逑

＇ｓｄ逡逑圖１－２邋ＨＦＳＤ對小鼠血糖的影響逡逑Ｆｉｇ．邋１－２邋Ｔｈｅ邋ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ｈｉｇｈ－ｆａｔ．邋ｈｉｇｈ－ｓｕｇａｒ邋ｄｉｅｔ邋ｏｎ邋ｂｌｏｏｄ邋ｇｌｕｃｏｓｅ邋ｉｎ邋ｍｉｃｅ逡逑與正常組飲食組對比，＊尸＜邋０．０５；邋＊＊尸＜０．０１逡逑＊Ｐ＜邋０．０５．邋＊＊Ｐ＜邋０．０１邋ｖｓ．邋ＮＤ邋ｇｒｏｕｐ逡逑３．３邋ＤＭＤＤ對胰島素抵抗小鼠的體長、腹圍、附睪脂肪重量、肝臟比重以逡逑及進(jìn)食量的影響逡逑與Ｎｏｒｍａｌ邋ｇｒｏｕｐ進(jìn)行比較，Ｍｏｄｅｌ邋ｇｒｏｕｐ小鼠的附睪脂肪重量以及肝臟逡逑比重顯著增加（Ｐ＜邋０．０１）；治療４周后，與Ｍｏｄｅｌ邋ｇｒｏｕｐ相比較，Ｍｅｔｆｏｒｍｉｎ逡逑２３逡逑

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【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

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相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

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本文編號：2807198