發(fā)布時間：2020-08-23 17:44

【摘要】：目的:觀察六君子湯含藥血清對TGF-β1介導(dǎo)的A549細(xì)胞MMP-9和整合素β1表達(dá)的影響,探討六君子湯影響肺癌轉(zhuǎn)移的可能機(jī)制。材料與方法:大鼠六君子湯灌胃7天,提取含藥血清,選取肺腺癌A549細(xì)胞。實驗分三組:空白血清組,空白血清+TGF-β1組,六君子湯最佳濃度含藥血清+TGF-β1組。普通顯微鏡下觀察TGF-β1干預(yù)A549細(xì)胞的程度;選取細(xì)胞劃痕方法觀察六君子湯含藥血清干預(yù)TGF-β1誘導(dǎo)的A549細(xì)胞的遷移程度;采用免疫細(xì)胞化學(xué)方法、免疫蛋白印跡技術(shù)觀察MMP-9和整合素β1的蛋白表達(dá)變化。結(jié)果:1、TGF-β1干預(yù)下A549細(xì)胞形態(tài)發(fā)生間質(zhì)化改變,細(xì)胞之間連接松散。2、與空白血清組比較,空白血清+TGF-β1組細(xì)胞遷移程度明顯增加(P0.05),與空白血清+TGF-β1組比較,含藥血清組細(xì)胞遷移程度下降(P0.05)。3、與空白血清組比較,MMP-9和整合素β1的蛋白表達(dá)量增加(P0.05);與空白血清+TGF-β1組比較,MMP-9和整合素β1的蛋白表達(dá)量下降(P0.05)。結(jié)論:1、六君子湯含藥血清能夠減緩TGF-β1介導(dǎo)的A549細(xì)胞的遷移程度。2、六君子湯含藥血清能夠降低TGF-β1介導(dǎo)的A549細(xì)胞MMP-9和整合素β1的蛋白表達(dá)量。3、六君子湯含藥血清能夠減緩肺癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移程度,這可能跟下調(diào)A549細(xì)胞MMP-9、整合素β1蛋白表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5
【圖文】：

實驗結(jié)果1、普通顯微鏡下觀察 TGF-β1 誘導(dǎo)后 A549 細(xì)胞形態(tài)的變化將 TGF-β1 誘導(dǎo)的 A549 細(xì)胞分別于 0h，24h，48h 鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)變化。與 0比較，24h 和 48h 鏡下觀察，TGF-β1 誘導(dǎo)的細(xì)胞多發(fā)生梭形、紡錐形改變，細(xì)胞間隙變大，細(xì)胞之間連接變得松散。結(jié)果表明，本實驗條件下 TGF-β1 能夠明顯誘導(dǎo) A54細(xì)胞呈現(xiàn)出間質(zhì)形態(tài)轉(zhuǎn)化的特點，細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力增強。因此，在本實驗條件下，TGF-β1 誘導(dǎo)細(xì)胞后，可直接探討作用藥物與轉(zhuǎn)移的關(guān)系。鏡下結(jié)果見圖 1。

圖 2 不同時間點細(xì)胞遷移形態(tài)圖（×100）白血清組；B：空白血清+TGF-β1 誘導(dǎo)組；C：六君子湯最佳含藥血清+表 1 不同時間點細(xì)胞劃痕愈合率（%）

胞免疫化學(xué)方法檢測 MMP-9 整合素 β1 蛋白表達(dá)結(jié)果（DAB 染色，白血清組；B：空白血清+TGF-β1 誘導(dǎo)組；C：六君子湯最佳含藥血清rn blot 檢測 MMP-9 和整合素 β1 蛋白的表達(dá)549 空白血清組相比，TGF-β1 誘導(dǎo)組細(xì)胞 MMP-9 和整合素 β1 蛋白.05），而與空白血清+TGF-β1 誘導(dǎo)組相比，六君子湯含藥血清組 A5整合素 β1 蛋白表達(dá)量下降（P＜0.05），見圖 4。統(tǒng)計分析結(jié)果見表β-actinMMP-9整合素 β1A B C

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7 唐方;

本文編號：2801827