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同源異效桑源藥材(桑葉、桑枝、桑白皮、桑椹)的物質(zhì)基礎(chǔ)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-08-22 22:08
【摘要】:栽桑養(yǎng)蠶是我國農(nóng)業(yè)的傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)之一,但桑樹資源的不同部位均為我國傳統(tǒng)中藥材。其中,?浦参锷orus alba L.的干燥葉入藥為桑葉,具有疏散風(fēng)熱,清肺潤燥,清肝明目的功效;其干燥嫩枝入藥為桑枝,具有祛風(fēng)濕、利關(guān)節(jié)的功效;干燥根皮入藥為桑白皮,具有瀉肺平喘,利水消腫的功效。干燥果穗入藥為桑椹,具有滋陰補(bǔ)血,生津潤燥的功效。桑來源不同部位的桑源藥材功效各異,桑源藥材傳統(tǒng)功效相關(guān)的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)是什么?桑源藥材間化學(xué)成分上有何異同,與藥效有何關(guān)系?目前,已有對桑源部分部位藥材的化學(xué)成分分析和藥效相關(guān)的研究報(bào)道,但對桑源藥材同源異效的物質(zhì)基礎(chǔ)還未見系統(tǒng)深入研究。因此本論文采用HPLC-MS方法首次對桑源藥材(桑葉、桑枝、桑白皮、桑椹)的化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)研究,分析桑源藥材間化學(xué)成分異同;并采用分子對接技術(shù)虛擬篩選桑源藥材抗炎和止咳平喘的物質(zhì)基礎(chǔ),為桑源藥材的質(zhì)量控制提供參考,為桑源藥材的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:1.桑源藥材甲醇提取物HPLC-MS分析采用HPLC-MS對桑源藥材甲醇提取物中化學(xué)成分進(jìn)行定性分析,共鑒定出46種化合物的結(jié)構(gòu),包括5種酚酸類,30種黃酮類,4種Diels-Alder型加合物,2種二苯乙烯類,4種2-芳基苯并呋喃類,1種萜類化合物。桑葉中鑒定出16種化合物,桑枝中鑒定出14種化合物,桑白皮中鑒定出30種化合物,桑椹中鑒定出9種化合物。其中桑白皮和桑枝共有10種化合物,分別為綠原酸、桑皮苷A、二氫桑色素、氧化白藜蘆醇、桑酮G、桑根酮G、桑黃酮K、柘樹黃酮C、桑酮H和桑根酮醇A。桑葉和桑椹共有9種化合物,分別為1-咖啡?鼘幩、隱綠原酸、綠原酸、新綠原酸、蘆丁、異槲皮苷、山奈酚-3-O-蕓香糖苷、紫云英苷和槲皮素。桑葉、桑枝、桑白皮、桑椹共有成分為綠原酸。桑葉中的專屬化合物有槲皮素-3,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖、山奈酚-3,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖、槲皮素-3-O-β-D-吡喃糖基-(1,6)-β-D-吡喃葡萄糖苷、6″-乙酰異槲皮苷、6″-O-巴豆酰紫云英苷、6″-乙酰紫云英苷。桑枝中的專屬化合物有奎寧酸、桑酮C。桑白皮中的專屬化合物有桑色素、桑辛素O、桑皮苷C、桑酮醇A、桑根酮T、桑黃酮Y、桑呋喃G、桑呋喃C、Albanin A、桑呋喃J、檸檬苦素、桑根酮C、桑黃酮W、桑黃酮O、桑根酮D、環(huán)桑素、桑辛素、桑根酮醇M、桑辛素二聚體和桑黃酮U。2.桑源藥材水提物不同極性部位HPLC-MS分析采用HPLC-MS進(jìn)一步對水提物的不同極性部位化學(xué)成分進(jìn)行定性分析,共鑒定出50種化合物,分別從石油醚部位初步鑒別了7種化合物,從氯仿部位初步鑒別了6種化合物,從乙酸乙酯部位初步鑒別了28種化合物,從正丁醇部位初步鑒別了18種化合物的結(jié)構(gòu)。其中桑源藥材中共有成分4種,分別為9,10,11-三羥基-12-十八碳烯酸、二十烷酸、異槲皮苷、桑黃素-3-O-β-D-葡萄糖苷。桑葉中的專屬成分有柚皮苷、丁香酯素、5-羥基香豆素-7-O-β-D-呋喃芹糖苷、桑辛素M、山奈酚-7-葡萄糖苷、桑辛素D、桑辛素G、桑辛素C、槲皮素-3,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖、山奈酚-3,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖、Guangsangon L、3'-甲氧基槲皮素。桑枝中專屬成分有環(huán)桑色烯、柘樹咕噸酮S、Liriodendrin-A。桑白皮中專屬成分有棕櫚酸乙酯、二十一烷酸、花旗松素、桑色素、桑皮苷C、桑辛素O、東莨菪內(nèi)酯、Cathafuran B、山奈酚、奎寧酸。桑椹中專屬成分有9,12,13-三羥基-10-十八碳烯酸、新綠原酸、隱綠原酸、蘆丁、山奈酚-3-O-蕓香糖苷、6″-乙酰異槲皮苷、山奈酚-3-O-β-D-吡喃糖基-(1,6)-β-D-吡喃葡萄糖苷、Benzoic acid 4-O-β-D-glucopyranoside。綜合桑源藥材甲醇提取物和不同極性萃取部位HPLC-MS結(jié)果分析,共鑒定出78種化合物,分別為7種脂肪酸類、42種黃酮類、5種香豆素類、9種2-芳基苯并呋喃類、5種Diels-Alder型加合物、5種酚酸類、2種二苯乙烯類、1種三萜類、2種其他類。其中桑葉鑒定出31種化合物,桑枝鑒定出27種化合物,桑白皮鑒定出47種化合物,桑椹鑒定出22種化合物。其中綠原酸、異槲皮苷、槲皮素、9,10,11-三羥基-12-十八碳烯酸、二十烷酸、桑黃素-3-O-β-D-葡萄糖苷為桑源藥材共有化合物。桑葉中專屬化合物11種,桑枝中專屬化合物3種,桑白皮中專屬化合物20種,桑椹中專屬化合物3種。由此可見,桑源藥材間不僅存在共有成分,也有各自的特異性成分。3.基于分子對接技術(shù)虛擬篩選桑源藥材抗炎和止咳平喘的物質(zhì)基礎(chǔ)選取一氧化氮合酶、腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-6和白細(xì)胞介素-1β作為桑源藥材抗炎研究靶點(diǎn),基于分子對接虛擬篩選桑源藥材抗炎物質(zhì)基礎(chǔ)。與一氧化氮合酶對接結(jié)果顯示:Cathafuran B、6″-乙酰紫云英苷、槲皮素、紫云英苷、Benzoic acid4-O-β-D-glucopyranoside、6″-O-巴豆酰紫云英苷、柘樹黃酮C和桑根酮D具有潛在的一氧化氮合酶抑制作用。其中桑葉中4種化合物:6″-乙酰紫云英苷、槲皮素、紫云英苷和6″-O-巴豆酰紫云英苷;桑枝中2種化合物:槲皮素和柘樹黃酮C;桑白皮中4種化合物:Cathafuran B、槲皮素、柘樹黃酮C和桑根酮D;桑椹中2種化合物:槲皮素和Benzoic acid 4-O-β-D-glucopyranoside。與腫瘤壞死因子-α對接結(jié)果顯示:Cathafuran B、桑黃酮K、桑黃酮Y、桑黃酮O、桑呋喃G、環(huán)桑色烯和桑辛素二聚體具有潛在的腫瘤壞死因子-α抑制活性。其中桑白皮中6種化合物:Cathafuran B、桑黃酮K、桑黃酮Y、桑黃酮O、桑呋喃G和桑辛素二聚體;桑枝中1種化合物:環(huán)桑色烯。與白細(xì)胞介素-6對接結(jié)果顯示:Cathafuran B、桑辛素二聚體、異槲皮苷和桑黃酮U具有潛在的白細(xì)胞介素-6抑制作用。其中桑白皮中4種化合物:Cathafuran B、桑辛素二聚體、異槲皮苷和桑黃酮U;異槲皮苷為桑葉、桑枝、桑白皮、桑椹中共有化合物。與白細(xì)胞介素-1β對接結(jié)果顯示:蘆丁、槲皮素-3-O-β-D-吡喃糖基-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷、6″-O-巴豆酰紫云英苷、環(huán)桑色烯和桑黃酮Y具有潛在的白細(xì)胞介素-1β抑制活性。其中桑葉中3種化合物:蘆丁、槲皮素-3-O-β-D-吡喃糖基-(1,6)-β-D-吡喃葡萄糖苷和6″-O-巴豆酰紫云英苷;桑枝中2種化合物:槲皮素-3-O-β-D-吡喃糖基-(1,6)-β-D-吡喃葡萄糖苷和環(huán)桑色烯。桑白皮中1種化合物:桑黃酮Y;桑椹中1種化合物:蘆丁。以上結(jié)果表明,桑源藥材中與抗炎靶點(diǎn)分子對接效果較好的化合物中,桑葉中有6種化合物,桑枝中5種化合物,桑白皮中10種化合物,桑椹中5種化合物。選取磷酸二酯酶4B和β_2腎上腺素受體作為桑源藥材止咳平喘研究靶點(diǎn),基于分子對接虛擬篩選桑源藥材止咳物質(zhì)基礎(chǔ)。與磷酸二酯酶4B對接結(jié)果顯示:奎寧酸、Cathafuran B、桑黃酮U、異槲皮苷、棕櫚酸乙酯、桑根酮G、隱綠原酸、桑辛素二聚體具有潛在的磷酸二酯酶4B抑制活性。其中桑葉中3種化合物:奎寧酸、異槲皮苷和隱綠原酸;桑枝中2種化合物:奎寧酸和異槲皮苷;桑白皮中7種化合物:奎寧酸、Cathafuran B、桑黃酮U、異槲皮苷、棕櫚酸乙酯、桑根酮G和桑辛素二聚體;桑椹中2種化合物:異槲皮苷和隱綠原酸。與β_2腎上腺素受體對接結(jié)果顯示:桑黃酮U、Cathafuran B、柘樹黃酮C、桑根酮D、桑辛素二聚體、桑黃酮W、檸檬苦素、桑根酮醇A具有潛在的β_2腎上腺素受體抑制作用。其中桑白皮中8種化合物:桑黃酮U、Cathafuran B、柘樹黃酮C、桑根酮D、桑辛素二聚體、桑黃酮W、檸檬苦素、桑根酮醇A;桑枝中1種化合物:柘樹黃酮C。以上結(jié)果表明,與止咳平喘靶點(diǎn)對接較好的化合物中,桑葉中有3種化合物,桑枝中2種化合物,桑白皮中14種化合物,桑椹中2種化合物。
【學(xué)位授予單位】:江蘇大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:R284.1
【圖文】:

藥材甲,桑白皮,桑枝,桑椹


12(A、桑葉,B、桑枝,C、桑白皮,D、桑椹)圖 2.1 桑源藥材甲醇提取物的 HPLC 圖和 TIC 圖Fig. 2.1 The HPLC and TIC of MeOH extract of Mulberry herbs

甲醇提取物,桑葉,酚酸,奎寧酸


圖 2.10 桑葉甲醇提取物的 HPLC 圖和 TIC 圖Fig.2.10 The HPLC and TIC of MeOH extract of Mori Folium表 2.2 桑葉甲醇提取物化學(xué)成分定性分析結(jié)果Tab.2.2 The identification results of the chemical constituents of MeOH extract of MoriFolium編號tR/min離子/[M-H]-碎片離子 分子式 化合物 種類1 9.18 352.98 190.92、178.94 C16H18O91-咖啡?鼘幩 酚酸2 13.45 191.00 172.85、84.94 C7H12O6奎寧酸 酚酸3 14.00 352.92 190.85、172.87 C16H18O9隱綠原酸 酚酸4 14.06 625.25 300.89、462.93 C27H30O17槲皮素-3,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖黃酮5 14.50 352.96 190.89、178.91 C16H18O9綠原酸 酚酸6 15.82 353.12 178.90、172.95 C16H18O9新綠原酸 酚酸7 16.80 609.00 447.13、284.88 C27H30O16山奈酚-3,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖黃酮

桑枝,甲醇提取物


江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文2.2.3.2 桑枝甲醇提取物 HPLC-MS 分析采用 HPLC-MS 對桑枝甲醇提取物的化學(xué)成分進(jìn)行定性分析。樣品中的多數(shù)化合物在 ESI 負(fù)離子模式條件下具有較好的響應(yīng)(見圖 2.12)。根據(jù)各色譜峰的保留時(shí)間、分子離子峰及主要碎片峰信息,并結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn),以及化學(xué)專業(yè)數(shù)據(jù)庫、TCMSP 、TCM、Mass Bank 和 SciFinder 等數(shù)據(jù)庫收錄的天然產(chǎn)物,初步判斷確認(rèn)了 13 種化合物的結(jié)構(gòu),包括 7 種黃酮類,2 種酚酸類,2 種二苯乙烯類,2 種 Diels-Alder 型加合物。結(jié)果如表 2.3 和圖 2.13 所示。

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