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三七防治兔外傷性增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變的實驗研究

發(fā)布時間:2020-08-22 20:44
【摘要】:目的:本實驗通過制作兔外傷性增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變(traumatic proliferative vitreoretinopathy,t PVR)模型,觀察中藥三七對外傷性增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變兔視網(wǎng)膜中轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)及肝細(xì)胞生長因子(HGF)表達(dá)的影響,探討中藥三七對兔外傷性增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變的防治作用。方法:采用鞏膜穿通傷聯(lián)合富含血小板的血漿玻璃體腔注入的方法制成外傷性PVR兔模型,將動物分成空白組、模型組、陽性對照組、三七低劑量組及三七高劑量組,三七治療組給予不同劑量的三七粉混懸液進(jìn)行灌胃,連續(xù)28天,陽性對照組一次性給予道諾霉素玻璃體腔注射,采用免疫組織化學(xué)分析的方法對兔視網(wǎng)膜中轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)及肝細(xì)胞生長因子(HGF)的表達(dá)進(jìn)行檢測和分析。結(jié)果:(1)各組眼底增生級數(shù):給藥后第1天,各組間的比較不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.296);給藥第7天后各組間的比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),且模型組與空白組的比較具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),陽性對照組及三七高劑量組的PVR分級低于模型組(P0.01),三七低劑量組與模型組的比較沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),三七高劑量組與陽性對照組間的比較沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)各組的眼底增殖膜截面積:模型組兔眼底增殖膜截面積明顯高于正常組,具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);陽性對照組、三七高劑量與模型組的比較具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),而三七低劑量組與模型組的比較不具統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(3)各組視網(wǎng)膜中轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)表達(dá)情況:與空白組相比,模型組視網(wǎng)膜中TGF-β蛋白含量明顯升高,具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。與模型組相比,陽性對照組及三七高劑量組中TGF-β蛋白含量降低,具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),三七低劑量組中TGF-β蛋白含量亦降低,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(4)各組視網(wǎng)膜中肝細(xì)胞生長因子(HGF)表達(dá)情況:與空白組相比,模型組兔視網(wǎng)膜中HGF蛋白含量明顯升高,具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。與模型組相比,三七低劑量組HGF蛋白含量無明顯差異(P0.05),陽性對照組、三七高劑量組HGF蛋白含量明顯降低,具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:本研究通過鞏膜穿通傷聯(lián)合富含血小板的血漿玻璃體腔注入的方法成功制成了兔外傷性PVR模型。研究發(fā)現(xiàn)中藥三七可減輕外傷性PVR兔眼底的增生程度及抑制眼底增殖膜的形成,同時可降低TGF-β、HGF在視網(wǎng)膜上的表達(dá),從而起到防治外傷性PVR的作用。
【學(xué)位授予單位】:成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R285.5;R-332
【圖文】:

內(nèi)界膜,外核層,內(nèi)核層,視網(wǎng)膜


1.4.3 兔眼球常規(guī)組織病理學(xué)檢測結(jié)果空白對照組:全層視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)清晰完整,各層結(jié)構(gòu)未見細(xì)胞水腫、缺失等情況。色素上皮層結(jié)構(gòu)整齊,細(xì)胞排列緊密,形態(tài)完整;外核層及內(nèi)核層細(xì)胞清晰可見,無形態(tài)上的改變;視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層能見到細(xì)胞排列整齊、致密,形態(tài)正常;視網(wǎng)膜內(nèi)界膜光滑、完整。模型對照組:玻璃體腔內(nèi)含有大量網(wǎng)狀、條索狀紅染的膠原纖維;視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)不整齊紊亂,局部出現(xiàn)扭曲;外核層、內(nèi)核層出現(xiàn)細(xì)胞變性、排列紊亂;節(jié)細(xì)胞層可看到空泡出現(xiàn)、細(xì)胞數(shù)量減少;神經(jīng)纖維層結(jié)構(gòu)增厚、腫脹、出現(xiàn)空泡變性;可見片狀膜樣增生組織在視網(wǎng)膜表面與內(nèi)界膜相連,內(nèi)界膜變得粗糙、增厚或結(jié)構(gòu)不完整斷裂。部分切片結(jié)果如圖示:

內(nèi)界膜,外核層,內(nèi)核層,視網(wǎng)膜


1.4.3 兔眼球常規(guī)組織病理學(xué)檢測結(jié)果空白對照組:全層視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)清晰完整,各層結(jié)構(gòu)未見細(xì)胞水腫、缺失等情況。色素上皮層結(jié)構(gòu)整齊,細(xì)胞排列緊密,形態(tài)完整;外核層及內(nèi)核層細(xì)胞清晰可見,無形態(tài)上的改變;視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層能見到細(xì)胞排列整齊、致密,形態(tài)正常;視網(wǎng)膜內(nèi)界膜光滑、完整。模型對照組:玻璃體腔內(nèi)含有大量網(wǎng)狀、條索狀紅染的膠原纖維;視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)不整齊紊亂,局部出現(xiàn)扭曲;外核層、內(nèi)核層出現(xiàn)細(xì)胞變性、排列紊亂;節(jié)細(xì)胞層可看到空泡出現(xiàn)、細(xì)胞數(shù)量減少;神經(jīng)纖維層結(jié)構(gòu)增厚、腫脹、出現(xiàn)空泡變性;可見片狀膜樣增生組織在視網(wǎng)膜表面與內(nèi)界膜相連,內(nèi)界膜變得粗糙、增厚或結(jié)構(gòu)不完整斷裂。部分切片結(jié)果如圖示:

箭頭,節(jié)細(xì)胞層,內(nèi)界膜,兔眼


圖 3、4 為空白對照組兔視網(wǎng)膜組織 HE 染色,如圖可見視網(wǎng)膜全層結(jié)構(gòu)清晰、各層細(xì)胞排列整齊、致密,形態(tài)正常,未見明顯病變。圖 5、6 為模型對照組兔視網(wǎng)膜組織 HE 染色,圖 5 可見視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)紊亂,內(nèi)核層細(xì)胞數(shù)量減少、節(jié)細(xì)胞層細(xì)胞出現(xiàn)空泡變性、細(xì)胞核幾乎消失,神經(jīng)纖維層腫脹變性,結(jié)構(gòu)明顯增厚(黃色箭頭),內(nèi)界膜表面粗糙、結(jié)構(gòu)斷裂, 玻璃體條索狀增生物(黑色箭頭) ;圖 6 可見視網(wǎng)膜形態(tài)扭曲、外核層細(xì)胞增多、排列紊亂(紅色箭頭),節(jié)細(xì)胞層增厚、神經(jīng)纖維腫脹變性(黃色箭頭) , 可見視網(wǎng)膜表面膜狀增生組織與內(nèi)界膜附著粘連(黑色箭頭)。1.4.4 兔眼底增殖膜截面積檢測結(jié)果兔眼底增殖膜截面積結(jié)果如表 6 所示:圖 5 (x200)模型對照組 圖 6 (x200) 模型對照組

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2801125

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